培养基配置原则:控制氧化还原电位不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长,一般以+0.3—+0.4V为宜,厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。F值与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响。在pH相对稳定的条件下,可通过增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压,或加入氧化剂,从而增加F值;在培养基中加入抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等还原性物质可降低F值。培养基中营养物质的浓度过大,会使渗透压过高,使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。青海培养基制备器供应商
在制备培养基时,通常要考虑以下因素:1.缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用,因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。2.渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围,一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基,可通过测定渗透压防止3.粘度培养基的粘度主要受血清含量的影响,在多数情况下,对细胞生长没有什么影响。在搅拌条件下,用羧甲基纤维素增加培养基的粘度,可减轻细胞损害。这对在低血清浓度或无血清下条件下培养细胞显得尤为重要。贵州不锈钢内桶培养基制备器有的培养基还含有素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。
血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理:血清中沉淀物的出现有许多种原因,但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成的,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。若想去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。何谓热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和启动。
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:简单制作培养基,必须将其过滤并澄清液体介质必须完全澄清,普通液体介质可用滤纸过滤,滤纸应折成折扇状或漏斗状,以免滤纸因水力不均而破裂。当温度较高时,培养基可以用干净的白天鹅绒过滤。新制肉、肝、血、马铃薯等滤液,必须用丝绒布过滤,再用滤纸一次又一次地过滤。若过滤方法不能满足澄清的要求,则应采用蛋清过滤。需要对介质分类处理,按培养基及试管内其它烧瓶使用的容器、用途分为适当。货运量超过每2个集装箱3个容量包装的要求。封堵也是容器外包,可用防水防潮纸塞纸封堵容器内棉。电动式装配机采用定量很好的重用或半自动解。预处理和预处理对灭菌容器的清洗要干燥,灭菌时要彻底,培养基要干燥。一只小玻璃瓶批培养基被检测出,培养基被一批pH批作为该值基准时,应被分成20mL的培养基进行消毒处理。半固体培养基,指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。
培养基的实验室制备:1.水:除特定要求,实验室用水的电导率在25℃下应不高于25uS/cm(相当于电阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染应不超过103CFU/mL,较好低于102CFU/mL。应根GB/T5750.12或其他有效方法,定期检验微生物的污染。2.称量和复水:称量所需量的脱水培养基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物质的培养基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培养基结块)后再加水至所需的量。3.溶解和分装:脱水培养基加水后适当加热,并不搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热溶解前应浸泡几分钟。制备培养基的操作要点:固体培养基在实际中用得十分普遍。山西进口培养基制备器
。液体培养基是培养基物理分类一种,是相对固体培养基而言的,是微生物或动植物细胞的液状培养基。青海培养基制备器供应商
培养基的制备:正确制备培养基时微生物检验的较基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配置。记录所有相关数据,如质量/体积、pH、制备日期、灭菌条件和制备人员等。使用各别成分制备培养基时,应按照配方准确配制,记录所有细节信息,如;培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积(分装体积)、无菌措施(包括实施的方式、温度及时间)、配置日期、人员等,以便潮源。青海培养基制备器供应商
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