稳定转染方法：
1.接种细胞：转染前一晚，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果：在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后5h即可检测到转入基因的表达。 PEI转染试剂时出现沉淀什么原因？四川PEI转染试剂怎么样
上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务，以创新和为价值理念，通过自身研发团队，以及与国内外专业科研团队强强联合，不断创新，为生命科学和医药研发行业提供产品和服务。生物医学工程是综合应用生命科学与工程科学的原理和方法，从工程学角度在分子、细胞、组织、乃至整个人体系统多层次认识人体的结构、功能和其他生命现象，研究用于防病、治病、人体功能辅助及卫生保健的人工材料、制品、装置和系统技术的总称。
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注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。
上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务，以创新和为价值理念，通过自身研发团队，以及与国内外专业科研团队强强联合，不断创新，为生命科学和医药研发行业提供产品和服务。生物医学工程是综合应用生命科学与工程科学的原理和方法，从工程学角度在分子、细胞、组织、乃至整个人体系统多层次认识人体的结构、功能和其他生命现象，研究用于防病、治病、人体功能辅助及卫生保健的人工材料、制品、装置和系统技术的总称。
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准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。
依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL离心管。转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后，添加?体积的包含30%血清的生长培养基。 有哪些不错的PEI转染试剂？低毒性PEI转染试剂价格多少
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PEI在于可以应用于体内试验。当初试验经费很有限，被逼无奈只能放弃脂质体2000，选择PEI，以至于相当长的时间内，转染试验都不顺利。下面是几点关于PEI转染的注意要点：1.PEI的使用量可以参照脂质体2000的说明书，所用质粒尽量去内2.转染时，一定要把PEI+DMEM加入到质粒+DMEM中，顺序不可错，轻微混匀，静止20min3.转染后4小时，一定要换液！换含有FBS的完全培养液！因为PEI对细胞毒性太大4.如果后续试验涉及到稳定筛选，建议把血清浓度适当提高。四川PEI转染试剂怎么样
曼博生物，2019-02-15正式启动，成立了血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机等几大市场布局，应对行业变化，顺应市场趋势发展，在创新中寻求突破，进而提升PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的市场竞争力，把握市场机遇，推动医药健康产业的进步。曼博生物经营业绩遍布国内诸多地区地区，业务布局涵盖血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机等板块。我们强化内部资源整合与业务协同，致力于血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机等实现一体化，建立了成熟的血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机运营及风险管理体系，累积了丰富的医药健康行业管理经验，拥有一大批专业人才。上海曼博生物医药科技有限公司业务范围涉及生物医药科技（人体干细胞、基因诊断与zhiliao技术开发和应用除外）领域内的技术开发、自有技术转让，并提供相关的技术咨询和技术服务；计算机软件的开发、设计、制作（音像制品、电子出版物除外）、销售自产产品；实验室试剂及耗材（药品、危险品除外）、化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用baozha物、易制毒化学品）、仪器仪表、机械设备、电子设备、塑料制品、玻璃制品、办公用品、电子产品的批发、进出口、佣金代理（拍卖除外）。【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】等多个环节，在国内医药健康行业拥有综合优势。在血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机等领域完成了众多可靠项目。
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