简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:需要对其进行消毒处理,普通介质使用121℃高压蒸汽灭菌15分钟。本发明适用于各种介质的制备,如无特殊要求,可用于灭菌。一些热成分,如碳水化合物,应该单独制备20%或更多的浓缩液,过滤或间断杀菌,然后通过无菌操作技术加入到培养液中。在低温下,明胶培养基也能杀菌。血、体液及素应经无菌处理后,加至约50℃冷却培养基中。需要对培养基的质量进行检测。每次处理完培养基,都要仔细检查,如破损、浸渍、颜色异常、棉塞污染等,要进行筛选和弃置,才能确定pH值。培养基培养一晚,若有细菌生长,培养基将被丢弃。常规菌株接种1×2管或瓶培养基,24h培养,对生长不良或无菌的菌株进行培养,追踪其产生原因,并反复接种。如不发生变化,应丢弃培养基,禁止使用。培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。江西培养基制备器定制
三角培养瓶是细胞培养中的常用耗材,也可用于培养基的配制、混合及储存。利用三角培养瓶制备培养基可以按照以下步骤操作:配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角培养瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角培养瓶,很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。安徽进口培养基制备器制备培养基的操作要点:固体培养基在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。
高压灭菌造成培养基结焦焦化问题:在实验过程中,检测人员发现在高压灭菌后的培养基有结焦焦化现象。微生物认为造成这种现象是:控制培养基在容器中不要超过百分之八十,避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长(115-116度)二十分钟即可,温度不超过121度,而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。以上原因都会导致培养基结焦焦化。贮存:培养基在30℃下放置1天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。
Systec培养基准备器可以快速的准备好灭菌,放入灭菌锅,“水套系统”里加入夹层水(灭菌锅与灭菌锅腔体之间的夹套水用于有效的热传导),加入培养基原料,准备启动灭菌程序。培养基可以直接在Sampleprep内悬浮溶解。强力磁力搅拌确保培养基在内腔里混合的均匀性,并防止凝结。培养基可以在灭菌前用WATERBATH(水浴)模式预先溶解。同时,直观的图形化界面使没有经过专门培训的人员也能方便的操作。用户可以自定义设置多达50个灭菌程序,比如灭菌温度、时间、分装温度等。它们可以被储存起来并随时调用。培养基通常采用高压蒸汽灭菌。
用过的玻璃器皿:凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿,使用后可随时冲洗,吸取过化学试剂的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必须经过适当消毒后,将污垢除去,用皂液洗刷,再用流水冲洗干净。若用皂液未能洗净的器皿,可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸,其作用是将有机物氧化成可溶性物质,以便冲洗。洗液有很强的腐蚀作用,使用时应特别小心,避免溅到衣服、身体和其他物品上。培养基制备器培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,较好一次完成,不要中断。进口培养基制备器报价
分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。江西培养基制备器定制
培养基的实验室制备:1.pH的测定和调整:用pH计测定pH,必要时在灭菌前调节pH,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却至25℃时,要求pH的变化不超过0.2pH单位.通常使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度约为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调节pH。如果灭菌后调节pH,溶液需灭菌。注:商品化培养基在高压灭菌前后pH可能发生明显变化,但使用蒸馏水或去离子水时,灭菌前无需调节pH。2.分装:将配置好的培养基分装到适当的容器中,容器的体积至少为体积的1.2倍。江西培养基制备器定制
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