培养基配制:素:为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。PHA的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均被为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。培养基制备器全自动程序,无人值守;分装过程无需人工干预。江苏实验室培养基制备器
培养基的储存:干粉培养基应保存在阴凉干燥处,要避免阳光直射;未开瓶的培养基在室温下的较长保存2年,开瓶后的干粉培养基易吸湿,应注意防潮并在6个月内用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查,如容器密闭性复查、一次开封日期、内容物的感官检查,如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作的重要环节,培养基自身质量的优劣、保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。山东琼脂培养基 培养基制备器培养基制备器可直接连接标准、通用的蠕动泵和稀释、充填培养皿系统。
培养基配置原则:控制pH条件,当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时,H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物,培养基pH不会过度降低;如果培养基中OH-浓度增加,OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物,培养基pH也不会过度升高。但KH2PO4和K2HPO4缓冲系统只能在一定的pH范围内(6.4-7.2)起调节作用。有些微生物,如乳酸菌能大量产酸,上述缓冲系统就难以起到缓冲作用,此时可在培养基中添加难溶的碳酸盐(如CaCO3)来进行调节,CaCO3难溶于水,不会使培养基pH过度升高,但它可以不断中和微生物产生的酸,同时释放出CO2,将培养基pH控制在一定范围内。在培养基中还存在一些天然的缓冲系统,如氨基酸、肽、蛋白质都属于两性电解质,也可起到缓冲剂的作用。
微生物检验培养基制备的要点:调培养基pH,虽然中海培养基中含有缓冲物质,可以尽量使培养基的pH值保持在标准范围内,但如果配制的培养基不能要求,则必须进行必要的调整。如果您有校准过的pH计,则可以使用pH计。如果没有,可以使用精确的pH试纸,然后根据需要使用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸进行微调。使用0.1氢氧化钠或0.1mol/L盐酸进行调整至所需的pH值。培养基有酸性或碱性,pH值一般为7.4~7.6。对于需要用氢氧化钠高压灭菌的介质,将pH调至比要求值高0.1~0.2个单位,因为用氢氧化钠调节时,高压灭菌后介质的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培养基中含有碳酸钙,则无需调整pH值。选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。
培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。大容量 培养基制备器供应商
高压蒸汽灭菌一般使培养基pH降低,应在配制培养基时加以调节。江苏实验室培养基制备器
液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下,可消除这种阻碍以及增加供氧量,所以有利于细胞生长,提高生产量。培养基的配制:配料:配方换算→在容器中加入少量水→按照配方称取各种药品,依次加入→加足所需水量一药一勺,取药后立即盖上瓶盖。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或的1NNaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。江苏实验室培养基制备器
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