细胞转染实验是生物医学实验室中常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用病毒等微生物作为基因导入载体,以慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感。
Polysciences是一家化学品制造公司,产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年,起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案,帮助科学家揭示未知领域。上海曼博生物是Polysciences官方授权du jia代理商,更多关于转染试剂相关问题,欢迎咨询上海曼博生物! PEI转染试剂的工作原理是什么呢?北京cGMP级PEI转染试剂
Polysciences 是一家化学品制造公司,产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年,起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案,帮助科学家揭示未知领域。随后,开拓了在病理(组织研究)应用产品,使组织除了石蜡包埋外,还能够包埋在塑料块中;开发染料和染色剂,以实现更好的样品观测方式。与government合作,开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家cancer中心合作,开发天然产物分离和纯化产品,并用于紫杉醇的初步临床试验。抗体药物研发客户提供小众创新产品,包括从Research grade到cGMP等级的无动物源培养基质,转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务,支持ATMP(Advance Therapy Medicinal Products)药物研发从R&D到Clinical trial以及后期商业化的无缝转化;以及提供药物开发和探索的抗体文库定制和商业授权灵活的CHO工程细胞株以支持抗体药物的商业化生产,以此希望帮助国内科研工作者快速地接触世界范围内的技术,分享研发工具进步带来的技术红利,终为细胞、基因产业以及再生医学行业等乃至整个生命科学行业赋能!
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线性PEI转染试剂是一种阳离子聚合物,分子量25000,它能与核酸形成复合物,并使该复合物进入哺乳动物细胞。线性PEI转染试剂广适用于常见细胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。该试剂即使在有血清存在的情况下,它仍然能的将核酸导入细胞。78bio公司提供的线性PEI转染试剂具有如下优点:优越的转染效率,重组蛋白的高表达水平,与含血清的培养基相兼容,低细胞毒性,易于操作?质量控制每批次线性PEI转染试剂均经过转染测试。将eGFP表达质粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus转染试剂转入亚融合状态的HEK-293细胞,转染16h后,超过95%的细胞表达eGFP。更多关于PEI转染试剂相关的产品信息,欢迎咨询上海曼博生物!
方法:1.细胞分盘:通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上(根据实验需要选择培养皿,使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90%)。根据细胞贴壁情况于含5%CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。2.制备PEI-DNA混合物:以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管,一管将质粒DNA(总量2-8μg为佳)加入240μLHBS中,混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM,充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中,轻轻摇动平皿混匀,置于含5%~7%CO2的37℃温箱孵育。注:每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀,保证所取的浓度一致。3.培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基,继续培养,16h左右可以观测到报告基因的表达。更多关于PEI转染试剂相关产品问题,欢迎咨询上海曼博生物!用PEI转染试剂时,一般和DNA的比例是多少呢?
Polysciences是一家化学品制造公司,产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年,起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案,帮助科学家揭示未知领域。随后,开拓了在病理(组织研究)应用产品,使组织除了石蜡包埋外,还能够包埋在塑料块中;开发染料和染色剂,以实现更好的样品观测方式。与government合作,开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家cancer中心合作,开发天然产物分离和纯化产品,并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠,用于DNA、蛋白质和肽的研究。Polysciences的高纯度单体和聚合物产品在医疗器械中有许多应用,并不断开发和增强其性能。近期业务扩展到电子产品,Polysciences的精密微粒子产品拓展了纳米技术应用中测量精度。公司秉承为应用而研发,目前已拥有超过3000种产品。PolysciencesInc.致力于提供先进的技术、制造能力和技术支持,帮助客户实现他们的目标。上海曼博生物是Polysciences官方授权du jia代理商,更多关于转染试剂相关问题,欢迎咨询上海曼博生物!分子量为25000的线性PEI转染试剂即Polysciences23966转染效率比较高。SigmaPEI转染试剂价格多少
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