培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要,但是现有技术中有些培养基的某种组份容易分解,造成保存时间短等问题,导致培养基的使用成本十分高。其中,在动物培养基中,谷氨酰胺是一种必要的组份,但是在常温下,很短的时间内,约7-10日中培养基中的谷氨酰胺成份就可降解90%以上,这给其商品化带来很大的困难。这样的培养基在现有技术中很多,都具有上述的缺陷,例如,中国CN1087778C公开了一种杂交瘤细胞的无血清培养基,其中包含有谷氨酰胺成份,但是这种培养基的保存时间十分有限,很难达到商业使用的目的。为防止冷凝水过多,也可将培养基冷却至45 ~ 50°C再倒平板。四川全自动培养基制备器
培养基质量测试:(1)澄清度:水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取,细胞才能生长增殖,因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查,判断细胞培养基的澄清度。按中国药典2005年版二部附录ⅨB进行。(2)pH值:哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度,pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品,用注射用水(水温20℃-30℃)溶解至1L,加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中,用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中国药典2005年版二部附录ⅥH进行;加入规定量的碳酸氢钠到上述溶液中,按中国药典2005年版二部附录ⅥH进行。四川全自动培养基制备器选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。
一种微生物培养基配制器,其特征在于:包括配制罐、培养基包和控制器箱,所述配制罐上设有进料管、出料管,所述培养基包上设有进水管和出水管,所述培养基包的进水管连接水源,所述培养基包的进水端设有进水过滤器,所述培养基包的出水管连接至所述配制罐的进料管,所述控制器箱内设有加热单元和控制单元,所述加热单元对所述配制罐加热,所述配制罐中设有温度传感器,所述温度传感器连接至所述控制单元,所述控制单元根据所述温度传感器的反馈实时调整所述配制罐内培养基溶液的温度,在所述配制罐内设置搅拌器,所述搅拌器由所述控制器箱的控制单元控制对所述配制罐内的培养基溶液进行搅拌。
培养基的类型:1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。(1)天然培养基:天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。用作这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源多方面,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。(2)合成培养基合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。(3)半合成培养基。培养基制备器注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
三角培养瓶是细胞培养中的常用耗材,也可用于培养基的配制、混合及储存。利用三角培养瓶制备培养基可以按照以下步骤操作:配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角培养瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角培养瓶,很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。培养基制备器杀菌剂可从此口加入,也可用注射器从硅酮膜注入。山东培养基制备器供应商
培养基制备器灭菌之后保持的温度是可以预设的。杀菌剂装入口宽大,并附有保险锁。四川全自动培养基制备器
培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。四川全自动培养基制备器
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