培养基配置原则:控制pH条件,培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的很适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化,若不对培养基pH条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。因此,为了维持培养基pH的相对恒定,通常在培养基中加入pH缓冲剂,常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐(如KH2PO4和K2HPO4)组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性,KH2PO4溶液呈酸性,两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。培养基通常采用高压蒸汽灭菌。中国台湾培养基制备器厂家
干粉颗粒微生物培养基储存条件:通常情况下,干粉培养基和颗粒培养基产品,在室温干燥避光的储存环境中,并注意密封存放,避免产品阳光直射,室内湿度与温度太高,如不注意密封情况,颗粒粉末在会有结块和受潮的现象,所以使用后一定要拧紧盖子,注意防潮。关于储存时长,只要严格按照培养基厂家的标签要求存放,未开封的培养基可保存两至三年。我们平常使用时,干粉没必要放在冰箱里,但如果在制备当天打开培养基后没有用完,建议将其存放在冰箱中,减少受潮问题但不要放置太多天。总之没有开封的干粉、颗粒培养基存放在阴凉干燥处即可。实验室培养基制备器供应商在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。
简单制作培养基,需调整培养基成分,介质中使用的化学物质应该是化学纯品,铜锅或铁锅易导致铜、铁混入培养基,使细菌难以繁殖。用不锈钢锅加热溶解较为适宜。溶解于水的锅子,可用温水加热,随时搅拌,防止结焦。若发现结焦,则不能使用介质,需重新调配。在溶解大多数固体成分之后,用少量热将其全部溶解,直到沸腾。简单制作培养基,需调整培养基的pH值,由于加热消毒过程中培养基的pH值会发生变化,因此应在培养基组分完全溶解后,调整pH值。举例来说,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而肠浸出物的pH值则明显上升。所以,在这一步中,操作者要注重不断探索经验,掌握培养基的很终pH值,保证培养基的质量。在调整pH值后,要将其煮沸几分钟,以利于培养基沉淀。
培养基的灭菌:一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。某些畏热成分,如糖类,应另行配成20%或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和物品等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出,冷至55℃-60℃时,摆置成适当斜面,待其自然凝固。培养基制备器温度和压力严格控制锁定装载舱口和外部盖子。
培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、灭菌15min,但容器和装量较大时,应延长至20min。含糖培养基115℃、灭菌30min。含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌。血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、灭菌30min为好。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形。河北培养基制备器厂家
培养基制备器试管塞不要塞得太紧(使用硅胶塞的时候),勿使用橡皮塞。中国台湾培养基制备器厂家
培养基的验收:购买的培养基到货后,应有专人做好培养基接受和培养基验收工作,应仔细核对生产企业提供的关于培养基资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。每批培养基到货物后都应对培养基的质量进行检测,满足检测方法规定的要求后方可投入使用。培养基是液体、半固体或固体形式的,含天然或合成成分,用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。中国台湾培养基制备器厂家
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