1、动物模型名称：固定制动致制动应激大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：180~220g6、实验动物环境：SPF级。1、实验方法：采用固定制动方法。大鼠每天固定5~6小时进行制动应激，连续制动40天。2、检测标准：模型组大鼠体重增长速度较正常对照缓慢；旷场试验的结果显示，造模结束时与正常对照组比较，模型组大鼠的水平穿越格数、垂直运动次数、理毛时间均减少，**格停留时间、粪便粒数均增加；ELISA的结果显示，造模结束时与正常对照组比较，模型组大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明显增高。小鼠疾病建模请找上海东寰。上海疾病动物模型建模厂家
步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管，12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的，在吸附柱膜**加入50～200μl灭菌水或者洗脱液，停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量，洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2：一种低成本基因组dna的粗提方法：步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm)，放入离心管中，加入100μl尾部消化缓冲液，注意不要剪尾太长；步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜；步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min，使蛋白酶k失活；步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min，上清直接用于pcr体系(每50μlpcr体系加入上清2μl)。尾消化缓冲液成分：50mmkcl10mmtris-hcl()％tritonx-100(b)长链pcr反应：长链引物：pcrprimers1(℃):扩增片段：5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):扩增片段：3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述两条扩增片段，野生型等位基因没有扩增产物。心血管疾病疾病动物模型建模优势通过小鼠疾病模型的构建有助于我们深入揭示潜在致病基因作用机制。
引起组织坏死，从而导致卵巢功能早衰。技术实现要素：针对上述现有技术，本发明提供了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本发明根据“顺铂可诱导卵巢细胞凋亡，引起组织坏死，从而导致卵巢功能早衰”这一原理，使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型，并对比各种方法间的优劣性，筛选出顺铂比较好的浓度及给药时间，为筛选顺铂导致的卵巢早衰动物模型比较好剂量提供了一种操作简单，成功率高，结果可靠的实验方法。本发明是通过以下技术方案实现的：一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法：将剂量为按体重一日2～3mg/kg的顺铂施用于大鼠，施用方式为腹腔注射，施用方法：连续施用7天，末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。或：将剂量为按体重4～6mg/kg的顺铂施用于大鼠，施用方式为腹腔注射，施用方法：第1天、第8天施用；末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。进一步地，可将顺铂溶于％氯化钠溶液配置成顺铂注射液，然后注射。所述顺铂，可市场常规购买得到，比如齐鲁制药公司生产的顺铂。进一步地，注射期间每天称量大鼠体重，注射后每周称量2次；末次注射后15天，麻醉取血检测***水平，取卵巢检测对比卵巢重量。
可用锇酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或细胞涂片以及某些薄膜组织的固定。（2）固定的目的①保持其原有状态：使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，迅速防止组织、细胞的死后变化，防止自溶与，防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有形态结构，使之尽量保持生前的状态和结构。②以便染色后易于鉴别和观察：不同组织成分对染料有不同的亲和力，以便染色后易于鉴别和观察。③使组织块硬化，便于制作薄片（组织块在脱水、包埋、切片、染色等过程中不易损坏）。（3）固定液固定液种类：一类是单纯固定液，即只有一种试剂；另一类是混合固定液，由两种或两种以上试剂组成。作为较好的固定液，应有下列特性，首先，有强渗透力，能迅速的渗入组织内部；其次，不使组织过度收缩或膨胀，并能使组织内欲观察的成分得以凝固为不溶性物质；，能使组织达到一定的硬度并获得较佳的折光率和对某些染料具有较强的亲和力。固定液通常使用10%的甲醛溶液。特殊要求的组织，常需要特殊的固定液，取样之前应做好准备。如眼球样本应使用FAS眼球固定液，脂肪组织应使用脂肪组织固定液等。此外，在进行骨组织样本制备的时候，还应注意提前进行脱钙处理。必须真正了解研究者感兴趣且需要的小鼠疾病模型。
人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物，动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究、新药靶点发现及筛选、药效评价、转化医学等医学前沿领域。动物模型的优越性主要表现在以下几下方面。(一)避免了在人身上进行实验所带来的风险(二)临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来(三)可以克服人类某些疾病潜伏期长，病程长和发病率低的缺点(四)可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性(五)可以简化实验操作和样品收集(六)有助于更***地认识疾病的本质模型应适用于多数研究者使用，容易复制，实验中便于操作和采集各种标本。宝山区疾病动物模型建模优势
动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究。上海疾病动物模型建模厂家
配制成2mg/kg顺铂注射液，按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2：建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下：将％氯化钠溶液(齐鲁制药，批号：aa1a8029a)中，配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例3建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下：将％氯化钠溶液25ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药，批号：aa1a8029a)中，配制成4mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实施例4：建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下：将％氯化钠溶液(齐鲁制药，批号：aa1a8029a)中。上海疾病动物模型建模厂家
空白组卵巢内细胞形态完整，可见各级卵泡生长活跃，并大多数为原始卵泡，卵泡颗粒层较多，黄体发育好。4m...
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