培养基制备器-培养基使用规程:1.目的:规范本中心微生物实验室培养基的使用和管理。2.适用范围,本规程适用于培养基的储存、融化和废弃等。3.职责,3.1检验人员:按照本规程规范使用培养基、定期检查培养基是否失效。3.2科室负责人:负责指导、监督检验人员规范使用培养基。4.使用程序,4.1培养基的储存,4.1.1除特殊说明和标准规定,通常情况下基础培养基(如营养琼脂培养基)应在4℃冰箱中保存不超过3个月,或在室温(20℃)下保存不超过一个月。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。吉林触摸屏培养基制备器
制备培养基的小技巧1.培养基可按制备也可使用按生产的符合规定的商品化成品培养基,脱水培养基除附有和使用说明外还应注明有效期、贮存条件、适用性试验的质控菌株和用途。配制时应按使用说明上的要求操作,受潮结块不能使用,以确保培养基的质量符合要求。2.配制培养基使用的容器应是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角烧瓶、刻度吸管、试管、培养皿等。使用的器皿应洗净,用蒸馏水冲净,烘干后方可使用。禁用金属容器如铁、铜、铝容器,避免金属离子与培养基成分结合,生成有害物质,影响细菌生长。陕西培养基制备器定制培养基制备器注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
培养基的类别按照培养基的物理状态分:培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。(1)古体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。古体培养基常月于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。(2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养,目标菌应呈现良好生长,并有典型的菌落外观、大小和形态,非目标菌应是微弱生长或无生长。
配制培养基的原则:灭菌处理:为了避免杂菌污染,获得微生物纯培养物,培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0.IMPa(121℃)维持15~30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培养基常用0.05MPa(110℃)灭菌20~30min某些对糖类要求更高的培养基,可先将糖过滤除菌或间歇灭菌,再与其他已灭菌的成分混合。长时间高温灭菌也会使磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁等阳离子形成难溶性化合物而产生沉淀。为了防止这类沉淀发生,可将这些物质分别灭菌,冷却后再混合;也可在培养基中加入少量整合剂(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金属离子形成可溶性络合物,防止沉淀的产生。高压蒸汽灭菌一般使培养基pH降低,应在配制培养基时加以调节。全自动培养基制备分装系统:两个存储器;存储器高度可选。
天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。例如。牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基和LB培养基等。常用的天然有机营养物质包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。组合培养基合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如,高氏1号培养基和查氏培养基等。合成培养基有一定的配方,配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。半组合培养基指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。培养基制备器具有液量分配,时间分配,复制分配三种工作模式。中国澳门琼脂灭菌 培养基制备器
一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应折叠成折扇或漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。吉林触摸屏培养基制备器
培养基质量测试:(1)澄清度:水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取,细胞才能生长增殖,因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查,判断细胞培养基的澄清度。按中国药典2005年版二部附录ⅨB进行。(2)pH值:哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度,pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品,用注射用水(水温20℃-30℃)溶解至1L,加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中,用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中国药典2005年版二部附录ⅥH进行;加入规定量的碳酸氢钠到上述溶液中,按中国药典2005年版二部附录ⅥH进行。吉林触摸屏培养基制备器
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