背景技术:培养基是供微生物、植物、动物组织和细菌生长和维持生长用的人工配置的养料,完全灭菌后用于单种微生物培养和鉴定,一般都是在无菌状态下储存,定量使用的,属于一种高新产业。传统的制备培养基的过程先将培养基粉末进行人工配置,搅匀,然后再装到锥形瓶里边在蒸汽灭菌器里边灭菌再使用,这需要耗费大量的人力物力,而且效率不高。目前,国外进口的培养基制备器,可以将配置、灭菌合二为一,较后恒温保持等待分装。极大地提高了效率,而且节省了人力物力,但是国外的的进口设备价格比较昂贵,因此造成了生产成本的高居不下,在用户的使用范围上造成了一定的局限性。目前国内没有公司生产该的培养基制备器,因此,完成培养基配置、灭菌一体化显得尤为重要。培养基制备器试管塞不要塞得太紧(使用硅胶塞的时候),勿使用橡皮塞。黑龙江琼脂灭菌 培养基制备器
培养基制备的基本方法和注意事项:1.培养塞pH的初步调整培养基各成分完全溶解后,应进行pH的初步调正,因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,例如,牛肉浸液约可降低pH0.2.而肠浸液pH却会有明显的升高。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的较终pH,保证培养基的质量。pH调正后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。2.培养基的过滤澄清液体培养基必须澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。黑龙江琼脂灭菌 培养基制备器培养基制备器铝制表面光滑平坦;易于清洁,无孔隙和裂缝,以防培养基流进去。
培养基配制:配制用水,培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基:培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清:培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。
培养基配制:素:为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。PHA的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均被为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。培养基制备器对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥。
一种微生物培养基配制器,其特征在于:包括配制罐、培养基包和控制器箱,所述配制罐上设有进料管、出料管,所述培养基包上设有进水管和出水管,所述培养基包的进水管连接水源,所述培养基包的进水端设有进水过滤器,所述培养基包的出水管连接至所述配制罐的进料管,所述控制器箱内设有加热单元和控制单元,所述加热单元对所述配制罐加热,所述配制罐中设有温度传感器,所述温度传感器连接至所述控制单元,所述控制单元根据所述温度传感器的反馈实时调整所述配制罐内培养基溶液的温度,在所述配制罐内设置搅拌器,所述搅拌器由所述控制器箱的控制单元控制对所述配制罐内的培养基溶液进行搅拌。培养基根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等。黑龙江琼脂灭菌 培养基制备器
培养基的灭菌:一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。黑龙江琼脂灭菌 培养基制备器
微生物检验培养基制备的要点:培养基灭菌处理:分装完成的培养基应马上灭菌。其杀毒灭菌方式主要有三种类型:高压蒸汽灭菌方式,此方法可用于大多数耐热培养基。对于小份:使用121°C十五分钟;大份:121°C三十分钟;对于含碳水化合物的中.海培养基,需113~115°C十五分钟。灭菌以避免糖分的破坏。煮沸灭菌法方式,此方法可用于含有不耐高温物质的培养基。过滤除菌方式,过滤除菌,采用无菌技术定量添加培养基。血液和可以用无菌技术抽取并加入冷却至约五十度的培养基中。当中'海培养基中含有不耐热物质时可以使用此方法。黑龙江琼脂灭菌 培养基制备器
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