倒平板:灭菌溶化的培养基冷却到50℃左右后,倒入无菌干燥的培养皿中。培养基的温度不能过高,否则容易在培养皿的内盖上形成太多的冷凝水;温度太低,培养基又容易凝固成块,无法制成平板。倒平板时,应在靠近酒精灯火焰进行,以免外界的杂菌落入平板内,左手拿培养皿,右手拿三角瓶的底部,用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下,灼烧瓶口,用大拇指和食指把培养皿盖打开一条缝,至瓶口刚好伸入,倒入培养基,以铺满底为限,不超过培养皿高度的三分之一,迅速盖好盖,放在桌面上,轻轻地转动培养皿,使培养基分布均匀,冷凝后即可。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。青海培养基制备器品牌
灭菌:分装好的培养基应立即进行灭菌。灭菌的方法种类如下:1.高压蒸汽灭菌法:大多数热培养基都可用此法,小量分装时,用121℃、15min;灭菌量大时,用121℃、30min灭菌;含糖类的培养基只能113℃~115℃、15min灭菌,避免糖类遭破坏。2.煮沸灭菌:对含有不耐高温物质的培养基,可使用此方法。3.过滤除菌:以过滤的方法除菌,用无菌操作技术,定量加入培养基。血液、物品可用无菌操作技术抽取,加入冷却到50℃左右的培养基中。培养基含有不耐热的物质时,可用此法。青海培养基制备器品牌培养基制备器培养不同的微生物必须采用不同的培养条件;培养目的不同,原料的选择和配比不同。
培养基的安全分装:无菌补料:通过分装口可以定量添加无菌添加剂。大尺寸的分装口带有安全锁。通过使用一个瓶子将添加剂添加到分装开口或通过一个septum膜,使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。无菌分装:培养基制备器的分装口可以在分装的时候打开,用于无菌分装培养基。硅胶管是使用分装接头连接到分装口。为了确保培养基的无菌分装,硅胶管和分装接头必须提前在灭菌器中灭菌。培养基可以通过集成的空压机产生的无菌空气压力分装或通过连接到常见的蠕动泵或其他集成成泵的装置,来进行培养基的分装。分装选项:制备和灭菌过的培养基可以通过一个软管进行分装。在每次灭菌进程中,内吸管和分装口也通过进入的蒸汽进行了灭菌。分装软管和连接到该软管的分装接头必须使用合适的蒸汽灭菌工艺预先灭菌,并且必须在无菌条件下连接到分装口。
在制备培养基时,通常要考虑以下因素:(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长*pH值变化很小,但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4~7.7,转化细胞以pH=7.0~7.4更合适。据报道,上皮细胞以pH=5.5合适。为确定*佳pH值,做一个简单的生长实验或特殊功能分析酚红常用作指示剂,pH=7.4呈红色,pH=7.0变橙色,pH=6.5变黄色,而pH=7.6呈红色中略带蓝色,pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观察有很大的主观性,因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样,放在与制备培养基相同的瓶子中。(2)缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用,因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围,一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基,可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。培养基制备器是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。
微生物检验培养基制备的要点:培养基分装,准备好的中.海培养基根据用途不同分为烧瓶、试管等容器,分装试管量大采用自动分液器,分装试管量小,可以用漏斗分液。分液量不超过容器体积的三分之二。三角瓶不要超过体积的二分之一;琼脂斜面不要超过试管长度的五分之一。灭菌后斜面应为培养基量的三分之一,底层应为培养基量的三分之二;半固态琼脂的体积为三分之一;用于接种或保护细菌的高级琼脂,分装试管长度的三分之一和四分之一,接种厌氧菌的量应达到三分之二;琼脂平板90毫米内径13~15毫升,内径70毫米8~10毫升。如果琼脂平板表面较水,可将平板倒置,置于37℃培养箱中三十分钟,晾干后使用。每批培养基分装在二十毫升左右的小玻璃瓶中,与该批培养基同时灭菌,在以确定这批培养基的很终pH值。液体培养基在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。中国澳门培养基制备器哪家好
培养基制备器通过分装口可以定量添加无菌添加剂。青海培养基制备器品牌
配制培养基需要哪些制备:(1)称出规定数量的琼脂和蔗糖,加水直到培养基较终容积的34,加热溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液体培养基(不加琼脂)时无需加热。(2)按需要加入一定量的各种贮存母液,包括生长调节物质和其他特殊附加物。吸取母液要使用专一的移液管。如有必要,培养基中所需的维生素,可在高压灭菌之后通过减压过滤装置或微孔过滤器灭菌后再加入。(3)蒸馏水定容。充分混合后调节培养基的pH,一般以5.66.0为好。(4)培养基分装,分装量一般以占培养容器的1514为宜。之后在24h内完成高压灭菌,也可以高压灭菌后再进行培养基的无菌分装,室温下存放备用。暂时不用的培养基应放置于10摄氏度下保存,而含有生长调节物质的培养基在45摄氏度保存更佳。青海培养基制备器品牌
培养基制备的九个步骤关注要点:步骤一:称取数量:用1/100的电子天平称出培养基所需的药物。首先参照...
【详情】培养基的配制:分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角瓶:若作静置培养,则100ml培养基/...
【详情】血清培养基主要问题:血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如...
【详情】培养基的种类:培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基;根据物理...
【详情】培养基制备基本方法:培养基成分的称取,培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,很好一次完成,不...
【详情】培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。...
【详情】培养基的制备:正确制备培养基时微生物检验的较基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物...
【详情】微生物检验培养基制备的要点:调培养基pH,虽然中海培养基中含有缓冲物质,可以尽量使培养基的pH值保持...
【详情】培养基制备的基本方法和注意事项:1、培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因...
【详情】干粉培养基有哪些注意事项:①熔化培养基制备必须在玻璃容器中进行,如果使用铜或铁器皿,会影响细菌的生长...
【详情】马铃薯培养基的制作过程:(1)称量和熬煮:按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1...
【详情】培养基配置原则:原料来源的选择,在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在...
【详情】