抗体由于其大小和复杂性,是一种难以表征的分子。偶联药物有效载荷是对抗Ai症等疾病的一种有吸引力的方法,但进一步增加了异质性的复杂性和风险。抗体药物偶联物 (ADC) 需要像任何其他基于 IgG 的生物制药一样进行仔细和详细的表征,并且需要适当的分析工作流程。Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶将ADC消化成其亚基,可以详细表征这类复杂的药物。Genovis的内切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 还可以研究完整的 ADC,但降低复杂性并提高分辨率。Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,使用LC-MS进行中级分析。河北IgGZEROIdeS蛋白酶抗体酶切
Genovis提供色谱柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在铰链下方对IgG进行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一种IgG特异性半胱氨酸蛋白酶,可消化铰链下方单个氨基酸位点的抗体,产生均质的F(ab')2和Fc片段。酶解后,可以使用反相HPLC、质谱或其他分析方法分析片段。抗体消化和亚基生成的自动化使生物反应器的在线监测应用成为可能,例如,作为2D-LC-MS设置的一部分,将反应器直接耦合到MS。这种自动化的抗体亚基分析方法减少了操作人员的时间、样品处理时间并提高了通量。重庆FabDELLOIdeS蛋白酶抗体酶切Genovis提供FabRICATOR (IdeS)验证包。三种不同批次的冻干酶,用于验证基于FabRICATOR的分析方法。
与IdeS不同,Genovis的FabULOUS(SpeB)是一种半胱氨酸蛋白酶,可在来自多个不同物种和亚类的IgG的铰链区域消化,产生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和绵羊的IgG被FabULOUS消化,产生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位点是......KTHT...例如,制备的Fab片段可用于亲和力研究、Fab糖基化研究和结构研究。对来自多个物种和亚类的IgG有活性–上铰链区域的消化物;快速-在一小时内生成Fab和Fc片段;有效消化小鼠IgG1。FabULOUS来源于化脓性链球菌,在大肠杆菌中表达。FabULOUS的分子量为29kDa,该酶含有His标签。
大多数zhiliao抗体携带人 IgG1 骨架,双特异性或多特异性形式的开发正在迅速增加。此类抗体的分析需要特异性酶来表征特性,例如单价结合、二硫键扰乱和配对 Fc 糖基化。传统方案包括使用木瓜蛋白酶和 Lys-C 的酶消化,这需要优化以大限度地减少过度消化并获得足够的产量。Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE) 在铰链上方的一个特定位点消化人 IgG1,以产生完整的 Fab 和 Fc 片段。该酶在大多数人IgG1 上也具有活性,其中铰链区域以下的突变已被引入。为了证明FabALACTICA的性能,我们消化了不同的人IgG1抗体,并使用RP-HPLC分析了所得片段。用FabALACTICA消化后观察到的定义峰显示了不同人IgG1抗体的均质片段生成和强大的酶性能。FabALACTICA 酶也可用于生成完整的 Fc 片段。LC-MS中级分析用于快速表征mAb和其他基于IgG的生物制药。
上海倍笃生物科技有限公司(简称“倍笃生物”),由中国科学院及生物医药产业界人士,于2018年1月共同创立。公司代理多个品牌的仪器、试剂及耗材(如Genovis的IdeS酶),遵守相关法规要求,如cGMP规范、ISO13485质量管理体系认证等,致力于为诊断领域如分子诊断及病原微生物检测研发等,药物研发领域如细胞基因药物、核酸药物、抗体药物、干细胞及外泌体研究等客户提供合规、高质量物料及专业服务,以期与客户共同协作,加快研发及生产进度,为客户提供更多价值。可精确定位特定的修饰。而无需肽图分析,可以较少的手动操作时间快速完成。广东GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白组学
GlySERIAS是从噬菌体K克隆而来的,在大肠杆菌中表达。该酶含有 His 标签,分子量为 18 kDa。河北IgGZEROIdeS蛋白酶抗体酶切
Genovis的FabDELLO在铰链上方的单个位点消化人IgG1,并在两小时内生成均质的Fab和Fc片段(Genovis的IdeS在铰链区下方的单个位点进行消化)。生成的片段可用于结晶和高阶结构(HOS)的NMR研究、结合研究等。突变的铰链区域是zhiliao性候选抗体的常见修饰,以降低效应器功能。这些突变可能会影响具有高底物特异性的酶的抗体消化效率。例如,高度特异性的FabRICATOR(IdeS)消化效率对含有常见LALA突变的抗体产生负面影响。FabDELLO作用于人IgG1铰链上方的单个暴露赖氨酸残基,能够对具有突变铰链区域的抗体进行流行的中级LC-MS分析。例如,用FabDELLO消化市售的IgG1risankizumab,在下铰链区域具有LALA突变,并通过反相LC-MS进行分析。消化产生均匀的Fab和Fc片段。用20mMDTT还原片段,用于中级LC-MS分析,发现产生了均相的Fc/2、轻链(LC)和Fd片段。用FabDELLO消化后观察到的定义峰显示出均匀的片段生成和酶的稳健性能。河北IgGZEROIdeS蛋白酶抗体酶切
Genovis除了提供IdeS酶以外,还提供很多种特异性蛋白酶,如半胱氨酸蛋白酶 FabALACTI...
【详情】大多数zhiliao性抗体都携带人IgG1骨架,双特异性和多特异性形式的开发正在迅速增加。此类抗体的...
【详情】经过多年的经验积累及市场积淀,倍笃生物已组合多条不同产品线,分别满足体外诊断、organoid及干细...
【详情】为什么客户想在他们的工作试用Genovis的FabRICATOR(IdeS)。FabRICATOR的...
【详情】与IdeS不同,在蛋白质zhiliao药物的质量控制过程中,详细分析和识别质量属性非常重要。对于具有...
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【详情】上海倍笃生物科技有限公司(简称“倍笃生物”),由中国科学院及生物医药产业界人士,于2018年1月共同...
【详情】一些应用(如结合研究)具有高度灵敏度,因此在制备中需要不含残留酶的纯抗体片段。因此,Genovis的...
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【详情】抗体 Fc 糖基化谱是一种重要的 CQA,因为它会影响疗效、和免疫原性。因此,需要从早期开发、工艺开...
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