Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门作用于糖链的内切酶,对研究蛋白质糖基化修饰具有重要意义。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制以及在糖生物学研究中的应用。引言蛋白质糖基化是一种普遍存在的翻译后修饰,对蛋白质的结构、稳定性和功能发挥着关键作用。Endo H是一种能够特异性识别并切割高甘露糖型N-连接糖链的内切酶,广泛应用于蛋白质糖基化分析。Endo H的结构特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量约为130 kDa。该酶具有一个催化中心,能够识别并切割特定的糖苷键。Endo H的三维结构尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些关键催化残基已被确定。催化机制Endo H通过水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)与N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之间的β-1,4糖苷键,从而释放高甘露糖型N-连接糖链。该过程不涉及辅因子,表明Endo H催化机制可能依赖于其活性位点的氨基酸残基。泛素化是一个可逆的过程,存在去泛素化酶可以去除泛素分子,从而调节泛素化的水平和功能。Recombinant Biotinylated Human IL-18BP Protein,His-Avi Tag

RecombinantBiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling),hFcTag性能参数分子别名(Synonyms)OX40Lreceptor;CD134;TNFRSF4;Ly-70表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling)isexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsLeu29-Ala216.[Accession|P43489]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof46.8kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-75kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制剂(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).储存条件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.Recombinant Human SCF Protein,His Tag泛素化是一种蛋白质翻译后修饰过程,涉及将泛素分子共价结合到靶蛋白上。这个过程由一系列酶促反应组成。

BovineThrombin,HighSpecificActivity,>2000IU/mg牛凝血酶(高活力,>2000IU/mg)本品有效切割质量比1:2000,通常在未做过预实验的情况下建议在1:1000质量比进行体系的优化,即1mg的目的蛋白加入2U的酶(2000U/mg),使用时可用生理盐水将酶配成100U/mL,有效消化缓冲液:20mMTris-HCl,含150mMNaCl,pH8.0。在20℃-37℃切割0.3-16h。注意:①具体反应温度可根据融合蛋白的性质而定,如需要低温保存的蛋白,可在4℃切割24h。②因为凝血酶会吸附在玻璃上,建议用塑料管分装冻存(-20℃)凝血酶溶液。注意事项1.此冻干产品稳定性好,2~8℃条件下保存3年,酶活力未有变化。室温条件下保存1年,酶活力未有变化。2.本产品作科研用途。3.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可特异切割赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组胰蛋白酶多用大肠杆菌或酵母系统重组表达并经过多步层析纯化获得,无糜蛋白酶等杂酶污染。重组胰蛋白酶与天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列与猪源胰蛋白酶序列同源。因其无动物源污染性和纯度高,在医药开发、生化研究、蛋白组学等领域中有着广泛的应用。翌圣目前可提供2款重组胰蛋白酶,分别为药典级(Cat#40512ES)、质谱级(Cat#20416ES)药典级:大肠杆菌表达的重组胰蛋白酶,氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致,生产过程不使用任何动物源原料,无外源性的病毒污染,可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:细胞培养、细胞发酵、蛋白质的酶解或各种组织的细胞分离等。本产品纯度高、不含杂酶、宿主蛋白和DNA残留量符合药典标准,避免了杂质对细胞生长的影响,pH为7.0-9.0,稳定pH为2±0.5。质谱级:毕赤酵母表达的重组猪胰蛋白酶,在GMP法规下生产,不含任何动物源成分,无动物源性的病毒污染,天然缺乏糜蛋白酶活性,并已过滤除菌。由于其在细胞外基质中的存在,透明质酸在细胞黏附、迁移、增殖和分化过程中扮演着关键角色。

N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义(UnitDefinition)1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-15~-25℃保存,有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去离子水,总反应体积20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。非变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至体积为20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。高亲和力和选择性A2AR抑制剂的开发:研究者正在开发新型的A2AR小分子拮抗剂,以提高药物的疗效和选择性。Recombinant Biotinylated Human ENPP-3 Protein,His-Avi Tag
酵母重组表达N-糖苷酶F,是一种利用酵母作为宿主细胞,通过基因工程技术表达特定酶的过程。Recombinant Biotinylated Human IL-18BP Protein,His-Avi Tag
糖苷内切酶H是一种重组糖苷酶,能够对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖结构进行切割,去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖。糖苷内切酶H克隆自褶皱链霉菌(Streptomycesplicatus)。并在酵母中重组表达。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括糖苷内切酶S(Cat#20413ES),酵母重组表达的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),酵母重组表达的N-糖苷酶F(比活性:100000U/mL)。储存条件-15~-25℃保存,有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;3)加入2μL的Buffer2,8μL去离子水,总反应体积20μL;4)加入1-2μL的EndoH,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。5)65℃下热失活10分钟。非变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至终体积为20μL。2)加入2~5μL的EndoH,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加EndoH的量和延长孵育时间。Recombinant Biotinylated Human IL-18BP Protein,His-Avi Tag
10mg/mLEB(溴化乙锭)溶液:凝胶电泳中的经典染料溴化乙锭(EthidiumBromide,简称EB)是一种广泛应用于分子生物学实验中的荧光染料,尤其在DNA和RNA凝胶电泳中用于染色和可视化DNA或RNA条带。10mg/mL的EB溶液是实验室中常用的高浓度储备液,能够方便地稀释至工作浓度,用于各种电泳实验。产品特点高灵敏度:EB能够特异性地嵌入DNA双链的碱基对之间,在紫外光下发出强烈的荧光,使得DNA条带在凝胶中清晰可见。适用范围广:适用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳,可检测DNA片段、质粒、基因组DNA以及RNA。即用型设计:10mg/mL的EB溶液为高浓度储备液,可根据实验需求...