微生物检验培养基制备的要点:培养基倒入平板,将灭菌溶化的培养基冷却至五十度后,倒入无菌干燥的培养皿中。微生物培养基制备的温度不能太高,否则培养皿内盖容易形成过多的冷凝水;温度太低,中海培养基容易凝固成块状,不能做成平板。倒平板时,要靠近酒精的火焰以防止外来细菌落入盘中。左手托住培养皿,右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出锥形瓶的棉塞,烧灼烧瓶口,用拇指和食指在培养皿盖上打开一条缝,直到烧瓶口刚好伸手进去,倒入培养基,直到底部被覆盖。不要超过培养皿高度的三分之一,迅速盖上盖子,放在桌子上,轻轻旋转培养皿,使培养基分布均匀,凝结后即可。培养基制备器真彩色液晶屏显示,触摸屏加按键操作。北京全自动培养基制备器
液体培养基:为确定液体培养基的生长率,应接种适当的培养物。下面介绍的是用定量、半定量和定性方法评估生长率和选择性的方法。所推荐的这些方法都是通过将液体培养基以倾注或划线方式接种到琼脂平板上培养后,计数或计算液体培养基分数而得出其生长数量的。对于液体培养基定性测试方法,则通过肉眼观察来实现。目标菌和非目标菌的定量稀释法步骤如下:选择液体培养基10mL/管待检。接种目标菌:将少量测试菌株培养物(每管10CFU~100CFU)接种测试肉汤和标准肉汤,混匀。接种非目标菌:将大量测试菌株培养物(每管大于1000CFU)接种测试肉汤和标准肉汤,混匀。不锈钢内桶培养基制备器全自动培养基制备仪主要特点:保证细菌不被引入容器中。
培养基的制备:(1)称量:根据培养基的配方,称取适量药品于搪瓷杯中;(2)溶解:用量筒量取所需水量,置电炉上加热,一边搅拌,至完全溶解,加热至沸腾,拔掉电源,待冷却;(3)分装:根据不同需要,立即趁热分装入三角瓶或试管中,分装三角瓶以不超过三角瓶一半为宜,分装试管一般为管长的1/5(需根据试管的大小而定).液体培养基如乳糖胆盐发酵培养基约分装10毫升左右.(4)塞硅胶塞:装好培养基的试管应塞上硅胶塞,松紧合适,紧贴管壁,不留缝隙,约1/2塞入内,这样即可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发.(5)包装:三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎,试管集中于试管篓.2、无菌水的制备:(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸馏水(稀释水)装入试管中.(2)用100ml量筒量取95ml蒸馏水(稀释水)装入150ml的三角瓶中.可置少许玻璃珠于三角瓶内,防止暴沸.(3)量取240ml蒸馏水(稀释水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮纸包扎好,高压灭菌备用。
天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。较广使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。血清种类:目用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因:来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。Systec培养基准备器能够保证快速温和的制备标准和高敏感性培养基。
天然培养基中血清主要作用:对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被较广用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢中起重要作用,如SeO3、硒等。培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,培养基各成分完全溶解后,应进行PH的初步调正。青海琼脂培养基 培养基制备器
有的培养基还含有素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。北京全自动培养基制备器
培养基的类型:1.合成培养基合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。2.半合成培养基在合成培养基中,加入某种或几种天然成分;或者在天然培养基中,加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马铃薯蔗糖培养基等。这种培养基在生产实践和实验室中使用较多。北京全自动培养基制备器
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