细胞培养中支原体污染会对实验结果产生多方面的影响,具体包括:
1. 细胞生长受影响:支原体污染可能导致细胞生长速度减慢,甚至停滞。
2. 细胞形态改变:支原体感*的细胞可能会出现形态的改变,如细胞体积增大、形态不规则等。
3. 细胞功能改变:支原体污染会影响细胞的代谢、增殖、分化等生理功能。
4. 细胞产物改变:支原体感*可能影响细胞产生的蛋白质、细胞因子等生物活性物质的表达和分泌。
5. 实验结果不准确:支原体污染会干扰实验结果的准确性,导致实验数据不可靠。
6. 实验重复性差:支原体污染的细胞培养批次间差异大,影响实验的重复性。
7. 影响后续实验:支原体污染的细胞培养产物用于后续实验,如转染、基因编辑等,可能会影响实验效果。
8. 影响细胞培养产物的质量:支原体污染会影响细胞培养产物的质量,如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本:支原体污染需要花费额外的时间和成本进行检测、处理和重复实验。
细胞培养中支原体污染的后果?深圳细胞支原体去除价格
支原体去除试剂使用后,对支原体的检测可能会有影响。一些支原体去除试剂通过特异性地与支原体膜结合、改变支原体膜的通透性来杀死支原体,而对真核细胞几乎没有影响。然而,某些情况下,去除试剂可能会对细胞的活力和形态产生一定的影响,尤其是在去除剂作用期间。此外,如果去除剂的效果不彻底,可能会导致细胞再次被支原体污染。
需要注意的是,某些支原体去除试剂可能会在去除支原体的过程中导致支原体膜溶解,从而释放出支原体的DNA,这可能会在随后的支原体核酸检测中引起假阳性结果。因此,在去除支原体后,建议在继续正常传代培养几代细胞后再进行支原体检测,以确保检测结果的准确性。
深圳细胞支原体去除价格细胞培养支原体污染怎么检测?
支原体是细胞外生存的 小微生物,是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.2~0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝形、分枝状等多种态。
1、支原体存在于我们周围,他可能就如尘埃一样存在于我们的环境中
2、可透过一般的滤膜,所以不要寄希望于过滤可以清楚支原体污染的液体
支原体对培养细胞的污染发生率高,据估计平均发生率在60%左右。同时又非常隐秘,早期不容易被发现,除非用特异性和灵敏度都非常高的检测试剂盒。支原体因为个头小,能穿过0.22微米滤器,并且在实验室内会潜在的扩散。支原体污染使得用被污染的细胞样本做的实验完全失去意义和价值。
细胞被支原体污染后可能会出现以下几种情况:
1. 生长速度变慢:支原体污染的细胞生长速度可能会减慢,甚至停止生长。
2. 形态改变:部分细胞可能会变圆,从培养瓶壁脱落。有些细胞在支原体污染后,形态变化可能不明显,但有些细胞可能会出现体积增大、细胞碎片增多等现象。
3. 培养液pH变化:支原体污染的细胞可能导致培养液pH值变化明显,更换培养液后几小时内变酸(颜色变黄)。
4. 细胞间隙出现膜状沉积:在某些情况下,细胞与细胞间隙可能出现膜状沉积,影响细胞的正常生长和传代。
5. 细胞功能受损:支原体污染可能会影响细胞的代谢和功能,如影响细胞蛋白质、DNA、RNA的合成。
6. 染色体畸变:支原体污染可能会导致细胞染色体断裂、数目减少,出现双着丝点染色体、环状染色体等异常。
7. 免疫细胞产量受影响:对于巨噬细胞等免疫细胞的培养,支原体污染可能会抑制干扰素的合成和降低其活性。
8. 细胞培养环境的污染:污染的细胞可能成为实验室的污染源,影响工作区域、培养箱和液氮罐等。
9. 实验结果的不确定性:使用被支原体污染的细胞进行实验可能会得到不准确的结果,影响科研的可靠性。
为什么要去除支原体?
支原体是一类细菌,由于缺乏细胞壁,具有灵活的膜结构。这使得支原体的形态多变,很难在高倍显微镜下识别。并且能够抵抗压力、温度、渗透压和脱水,对许多针对细胞壁合成的常见抗*素具有抗性。它们的体积非常小,直径通常在0.15~0.3μm,因此能够轻易地穿过过滤系统。支原体能在哺乳动物细胞培养中可以高浓度生长,而不引起明显的混浊或其他可见的污染迹象。
支原体通过特殊的前端细胞器与宿主细胞结合。支原体前端细胞器富含粘附素,可以附着在真核细胞上并穿透宿主细胞。支原体缺乏刚性细胞壁,可能有助于其与宿主细胞膜融合,并交换其膜和细胞质成分。支原体的对细胞的毒性包括支原体侵袭性、分泌的致病酶和一些膜成分等都能够有效地侵犯宿主。
支原体及污染方式有哪些?细胞支原体预防价格
支原体检测实验的方法?深圳细胞支原体去除价格
一步法支原体检测试剂盒的防污染版本通常采用等温扩增技术,如LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)原理,通过支原体特异性引物在恒温条件下对样本进行检测,终通过颜色变化确定样品中是否含有支原体污染。这种方法的优势在于:
1. 快速检测:可以在较短的时间内完成检测,通常在60分钟以内。
2. 高灵敏度和特异性:等温扩增技术可以检测到非常低浓度的支原体DNA。
3. 操作简便:不需要复杂的设备,如PCR仪或电泳设备,只需水浴锅即可完成扩增反应。
4. 减少污染风险:由于无需开盖电泳,可以减少因气溶胶造成的交叉污染。
此外,试剂盒还包含UNG(Uracil-N-Glycosylase)酶,用于防止PCR过程中的污染,UNG酶可以消化反应液中可能存在的尿嘧啶,从而减少因污染导致的假阳性结果。
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