采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价,0分:无神经功能缺损症状;1分:出现左侧 Honer征,轻度神经功能缺损;2分:提尾对侧前肢内旋,肩内收,中度神经功能缺损;3分:向对侧转圈、向对侧倾倒,重度神经功能缺损;4分:不能自发行走,部分意识丧失。鼠侧倾倒,评分为3分。 沿脑桥上界面切断,去除嗅球,称全脑重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做连续冠状切片(切片厚度2 mm)。将脑切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒温振荡器中,37℃避光染色30 min,将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出脑片,相机拍照,用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。发现呼吸异常,用镊子将大鼠舌头牵拉至嘴角一侧,防止舌头根部堵塞呼吸道出现窒息情况。大鼠脑梗MCAO模型手术造模
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。北京定制脑梗MCAO模型供应商脑缺血是指由脑内血流量突然减少或代谢速率速增所致脑血流无法满足正常代谢需求的病理状态,可导致脑损伤。
动物卒中模型的制作也是临床前实验研究的前提,缺血性卒中的动物实验模型具有针对性与多样性的特点,并被不断地进行改进与创新,力争制作的动物模型能无限接近真实的人类脑卒中。目前,大鼠、小鼠、猿、猴、犬、兔、羊、猪等多种动物被用于制备局灶性脑缺血模型。线栓法、开颅法、栓子栓塞法、光化学法、FeCl3诱导法、内皮素-1诱导法和自发性卒中法为常用方法,其中线栓法大脑中动脉栓塞(MCAO)为制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。
这种神经功能缺损评分是一种重要的实验方法,主要用于研究脑梗死后对动物神经功能的影响。在实验中,研究人员会观察动物的行为表现,例如运动协调能力、平衡能力、反应速度等,以评估神经功能缺损的程度。 首先,研究人员需要对实验动物进行脑梗死手术,以模拟人类脑梗死的病理过程。在手术后的一段时间内,研究人员需要密切观察动物的行为变化,并记录下来。例如,如果动物出现运动不协调、平衡能力下降、反应速度减慢等症状,研究人员就会记录下来。 然后,研究人员会根据观察到的行为变化,对动物的神经功能缺损程度进行评分。评分标准可以根据实验需求和具体情况制定,例如0分表示无缺损,1分表示轻度缺损,2分表示中度缺损,3分表示重度缺损等。小鼠缺血性脑梗死模型在神经科学研究中具有重要意义。
缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机。北京定制脑梗MCAO模型供应商
建立大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型动物模型是研究此类疾病的*重要工具之一。大鼠脑梗MCAO模型手术造模
缺血性脑卒中/脑梗对人类健康构成严重威胁,是全国和全球范围内死亡和身体伤害的第三大原因。中风的高发病率、残疾率和死亡率给家庭和社会带来了沉重的负担。为了有效地选择治*缺血性中风的药物,提高治*率和康复率,建立接近人类梗死的大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型一直是研究人员面临的挑战,而使用稳定的动物模型是研究此类疾病的*重要工具之一。本文从实验动物的选择、线栓材料的选择、线栓的制作和加工、外部环境和手术的影响等方面介绍了研究SD大鼠大脑缺血再灌注实验动物模型制作的全部过程,为科研工作者提供长期稳定的SD大鼠大脑缺血再灌注模型,并*终提高实验动物模型的成功率和可行性。大鼠脑梗MCAO模型手术造模