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广州细胞培养支原体检测如何取样

支原体污染和黑胶虫污染是两种不同类型的细胞培养污染，它们具有各自的特点和区别：支原体污染：在相差显微镜下，...

支原体基本参数

品牌
世途科生物
型号
CM0001

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支原体污染和黑胶虫污染是两种不同类型的细胞培养污染，它们具有各自的特点和区别：

支原体污染：在相差显微镜下，支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。

黑胶虫污染：在高倍镜下，被黑胶虫污染的细胞膜会变得模糊不清，边界不清晰，有粗糙感。

污染的影响：

支原体污染：可能导致细胞增殖缓慢，甚至从培养器皿脱落，影响细胞的DNA、RNA及蛋白表达。

黑胶虫污染：与细胞竞争性生长，开始时对细胞没有什么影响，但当数量多时，细胞生长会受到影响直至死亡。

污染的来源：

支原体污染：可能来源于工作环境的污染、操作者本身、培养基的污染、交叉污染、实验器材带来的污染以及用来制备细胞的原始组织或部位的污染。

黑胶虫污染：可能来源于细胞本身的污染或从动物取材时的污染，也可能通过培养箱空气进行污染。

细胞培养中，支原体检测的重要性？广州细胞培养支原体检测如何取样

支原体去除的实验步骤通常包括以下几个阶段：

1. 支原体检测：在进行去除之前，首先要确认细胞培养物是否受到支原体污染。这可以通过多种方法实现，如PCR法、LAMP法或支原体培养法。

2. 选择合适的去除试剂：一旦确认存在支原体污染，需要选择一种有效的去除试剂。

3. 去除试剂的添加：根据去除试剂的说明书，将试剂添加到受污染的细胞培养基中。通常，这涉及到将一定比例的去除试剂加入到细胞培养液中。

4. 孵育：添加去除试剂后，将细胞培养物放回培养箱中孵育。孵育时间和条件（如温度、CO2浓度）应根据试剂的推荐进行调整。

5. 监测去除效果：在孵育过程中，定期监测细胞的状态和去除效果。这可能包括观察细胞形态、生长速率的变化，以及通过显微镜检查是否有支原体存在的迹象。

6. 后续检测：去除过程完成后，再次使用支原体检测方法确认污染是否已被成功。

细胞支原体去除试剂价格细胞培养中支原体为什么难以彻底消灭？

根据提供的信息，支原体去除试剂是一种混合制剂，通过抑制DNA和支原体生长所必须的相关蛋白合成来取得良好的支原体清*效果，同时对细胞无伤害。它被设计为对细胞毒性小，不影响后续的细胞实验，包括细胞活力检测和细胞转染等。这表明使用支原体去除试剂去除支原体后，理论上不应该对细胞的转染效率产生负面影响。

此外，支原体污染本身会对细胞的转染效率产生负面影响。研究表明，与未污染的细胞相比，支原体污染的细胞转染后具有较低的基因表达水平。因此，去除支原体后，可以预期细胞的转染效率会得到改善，因为移除了影响细胞正常功能的污染物。

支原体去除的原理通常涉及以下几个方面：

1. 抗*素作用：使用特定的抗*素制剂来抑制支原体的生长和繁殖。例如，含有喹诺酮类、四环素衍生物类和大环内酯类抗*素的混合制剂，这些抗*素能够抑制支原体的DNA和蛋白合成。

2. 破坏细胞膜：支原体去除剂中的抑菌肽（AMPs）成分通过破坏支原体细胞膜的完整性，导致支原体细胞死亡。

3. 抑制DNA复制：支原体去除剂通过抑制支原体DNA回旋酶活性，有效抑制支原体DNA的复制，从遗传物质着手彻底杀灭支原体。

4. 协同作用：某些支原体去除剂利用抑菌肽（AMPs）和穿膜肽（CPPs）的协同作用来除去支原体，穿膜肽能够帮助抑菌肽更有效地穿透细胞膜，增强其杀灭支原体的能力。

细胞培养为什么建议使用支原体检测？

目前有 210 +种不同种类的支原体分布于人类、动物、昆虫和植物中，其中 20 +种在细胞培养中被发现为污染物。支原体在实验室中的传播来源多种多样，主要来源包括实验室人员、胎牛血清（FBS）或新生牛血清（NBS）、以及由猪来源的胰蛋白酶溶液。此外，来自其他实验室或商业供应商的细胞培养物、培养基、污染的试剂；非无菌供应品、培养基和溶液；实验室人员；培养箱；液氮；空气颗粒和气溶胶；抗*素的过度使用；细胞培养器皿的不正确密封；以及其他的支原体细胞培养物等都可能成为支原体的传播途径。
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一步法快速支原体检测的原理？广州细胞培养支原体检测如何取样

支原体去除后对细胞检测的影响主要取决于去除方法和去除后的处理。以下是一些可能的影响：

1. 去除方法的影响：不同的支原体去除方法可能对细胞检测产生不同的影响。例如，一些去除方法可能会对细胞的代谢和增殖产生暂时性的影响，这可能会影响某些类型的细胞检测。

2. 去除后的处理：去除支原体后，细胞可能需要一段时间来恢复其正常的生理状态。在这段时间内，细胞的某些特性可能与去除前不同，这可能会影响细胞检测的结果。

3. 细胞恢复情况：如果细胞在去除支原体后能够成功恢复，那么它们在检测中的表现可能会与未受污染的细胞相似。然而，如果细胞恢复不完全，可能会影响检测结果的准确性。

4. 检测类型的相关性：不同的细胞检测方法对细胞状态的敏感性不同。一些检测可能对细胞的微小变化非常敏感，而其他检测则可能较为宽容。

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