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N末端His标签的泛素蛋白(RecombinantHumanUbiquitinProteinTagged-HisTag,UB)是一种经过遗传工程改造,在其N末端融合了His标签的泛素蛋白。以下是这种蛋白的一些特点:1.**His标签**:N末端His标签是一种常见的融合标签,用于提高蛋白质的可溶性和便于通过亲和层析进行纯化。His标签通常由6到10个组氨酸(His)组成。2.**重组表达**:这种泛素蛋白通常在大肠杆菌(E.coli)或其他宿主细胞中通过重组DNA技术表达。3.**高度保守**:泛素蛋白是一个76个氨基酸残基的多肽,在真核生物中高度保守。4.**分子量**:由于N末端添加了His标签,重组泛素蛋白的分子量会略大于天然泛素(约8.5kDa)。5.**纯度**:重组泛素蛋白通常具有高纯度(>95%bySDS-PAGE),适合用于各种生物化学和分子生物学实验。6.**溶解性**:His标签的添加可以提高蛋白质在水溶液中的溶解性,便于实验操作。7.**稳定性**:冻干粉形式的重组泛素蛋白在-25~-15℃保存,具有较长的有效期,通常为一年。8.**应用广**:N末端His标签的泛素蛋白可用于多种实验,包括蛋白质泛素化、E3泛素连接酶活性测定、蛋白质相互作用研究等。FnCas12a的C端融合了核定位信号(NLS),有助于FnCas12a进入细胞后定位至细胞核,提高基因编辑效率。Streptavidin

Streptavidin,标准物质

重组的化脓性链球菌Cas9蛋白(SpCas9)是一种用于基因组编辑的核酸酶。它是CRISPR-Cas系统的一部分,该系统是一种细菌和古菌的适应性免疫防御机制,能够识别并切割入侵的外源核酸。Cas9蛋白在CRISPR系统中起到关键作用,它能够识别特定的原间隔子相邻基序(PAM),在引导RNA(gRNA)的引导下与目标DNA结合并进行切割。SpCas9蛋白由1053个氨基酸组成,相对较小的体积使其便于在体内递送,因此它在多种生物中都能进行有效的基因组编辑。为了提高SpCas9的表达量和溶解度,研究人员采用了多种策略,例如使用GB1促溶标签和多重启动子策略,这些策略可以显著提高蛋白的产量和活性,同时保持其功能活性不受影响。在基因编辑过程中,SpCas9与gRNA形成稳定的核糖核的蛋白(RNP)复合物,通过gRNA与基因组DNA的序列匹配来识别目标位点,并在距离NGGPAM序列3个碱基以内的位置切割DNA。为了增强SpCas9的基因组编辑效率,研究人员还开发了嵌合融合蛋白,例如与5’至3’核酸外切酶重组J(RecJ)或GFP融合的SpyCas9蛋白,这些嵌合蛋白可以显著提高靶向基因编辑效率,同时保持较低的脱靶效应。

Recombinant Human TSLPR Protein,His Tag将Cas9/sgRNA复合物转染到目标细胞中。可以使用脂质体介导转染、电穿孔或其他转染技术 。

Streptavidin,标准物质

NLS-Cas9Nuclease是一种重组的化脓性链球菌Cas9蛋白,它在N端和C端都添加了核定位信号(NLS),这使得它能够更有效地进入细胞核并进行基因组编辑。这种蛋白与CRISPR/Cas9系统的引导RNA(gRNA)形成稳定的核糖核的蛋白(RNP)复合物,可以在进入细胞后立即定位到细胞核,从而诱导特定的DNA双链断裂,实现基因编辑。与传统的mRNA或质粒系统相比,使用NLS-Cas9Nuclease不需要转录和翻译过程,因此可以避免将外源DNA插入基因组的风险,这对于基因编辑尤其有用。NLS-Cas9Nuclease的特点包括:1.无DNA:系统不添加外部DNA,降低了插入外源DNA的风险。2.高切割效率:双NLS确保Cas9蛋白高效进入细胞核。3.低脱靶效应:Cas9核酸酶的瞬时表达提高了切割的特异性。4.节省时间:无需转录和翻译过程。这种核酸酶可以用于体外DNA切割筛选高效和特异性靶向gRNA,以及通过电穿孔或注射与特定gRNA结合时的体内基因编辑。产品的保存条件通常是在-25~-15℃,有效期为一年。使用时,可以根据推荐的反应体系进行体外DNA裂解实验,并通过琼脂糖凝胶电泳检测消化效率。具体产品的详细信息和应用指南,可以参考金斯瑞生物科技有限公司、NEB、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的资料。

PreScissionProtease(PSP)是一种由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST组成的融合蛋白。它具有以下特点:1.**特异性识别**:PreScissionProtease能在低温下(4°C)特异识别短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸残基之间进行酶切。2.**依赖结构**:底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构,还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。3.**分离GST标签**:它可以特异性的将pGEX-6P系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST标签进行分离。4.**表达宿主**:本品由大肠杆菌中重组表达,并以无菌液体形式提供。5.**物理性质**:分子量约为46kDa,物理外观为无菌无色液体。6.**储存缓冲液**:25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)Glycerin。7.**酶切缓冲液**:10×酶切缓冲液为500mMTris-HCl(pH7.0),1.5MNaCl,10mMEDTA,10mMDTT。8.**纯度**:经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度大于95%。9.**酶活定义**:在5℃条件下反应16小时,能够切割10µg的GST标签的融合蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。牛痘DNA拓扑异构酶I具有解超螺旋的活性,可以解开双链闭合环状DNA的超螺旋结构,便于后续的酶切反应。

Streptavidin,标准物质

NLS-Cas9-EGFPNuclease在基因编辑中提高特异性的策略包括:1.**核定位信号(NLS)**:NLS有助于Cas9蛋白快速定位到细胞核,这可以减少Cas9在细胞质中的非特异性结合,从而降低脱靶效应。2.**瞬时表达**:由于NLS-Cas9-EGFPNuclease是作为蛋白质直接递送的,它在细胞内不会经历长时间的表达,这限制了Cas9的活性时间窗口,减少了长时间存在导致的脱靶风险。3.**优化gRNA设计**:精心设计的gRNA可以提高特异性,通过选择与目标基因特异性匹配的gRNA,可以减少Cas9在非目标位点的切割。4.**使用高保真Cas9变体**:一些Cas9变体被设计为具有更高的特异性,通过突变Cas9蛋白的某些氨基酸,可以降低其在非目标位点的活性。5.**荧光标记(EGFP)**:EGFP标签不仅用于追踪和分选,还可以帮助研究者通过荧光激起细胞分选(FACS)富集成功编辑的细胞,从而提高编辑特异性。6.**体外验证**:在实际进行体内基因编辑之前,可以通过体外DNA切割实验验证gRNA的特异性和效率,筛选出比较好的gRNA。7.**使用PAM序列优化**:通过选择具有限制性PAM序列的gRNA,可以减少可能的脱靶位点。

Cas9 NLS与CRISPR/Cas9系统中的gRNA兼容,可以进行位点特异性的DNA切割 。Recombinant Mouse MIG/CXCL9 Protein

GPRC5D蛋白在宿主细胞内通过自组装形成VLP。这一步骤通常在细胞内发生,以提高VLP的产量和质量。Streptavidin

大肠杆菌表达的重组抑肽酶(Aprotinin)是一种通过基因工程技术在大肠杆菌中生产的蛋白酶抑制剂,具有以下特性和应用:1.**来源**:重组抑肽酶是通过大肠杆菌(E.coli)表达系统生产的,确保了无动物源性成分,减少了病毒污染的风险。2.**结构**:它是一种单体球状蛋白,由58个氨基酸组成,具有三个交联二硫键的单个多肽链。3.**功能**:作为一种竞争性、可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,重组抑肽酶能够抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽释放酶和血纤维蛋白溶酶等的活性。4.**应用**:在生物技术过程中,重组抑肽酶可以替代动物源性抑肽酶,用于重组蛋白生产中抑制丝氨酸蛋白酶的活性,以及在细胞培养等过程中。5.**产品信息**:通常以粉末形式提供,具有明确的货号和规格,如1mg或10mg的包装。6.**产品性质**:包括外观、溶解度、纯度、蛋白含量、酶浓度和活性定义等详细参数。7.**储存条件**:冻干粉在2~8℃保存,有效期为2年。8.**使用方法**:推荐的结合pH>6.0,在pH<3.0的条件下不结合,可直接使用0.9%NaCl溶解,溶解后可-20℃储存。9.**注意事项**:产品作科研用途,操作时需穿着实验服并佩戴一次性手套。Streptavidin

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重组人TFPI-2蛋白(HisTag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。TFPI-2(TissueFactorPathwayInhibitor-2)是一种分泌性蛋白,广参与细胞外基质的重塑、细胞迁移和瘤抑制。它在胚胎发育、组织修复和瘤发生中发挥重要作用。TFPI-2的功能与机制TFPI-2更初被认为是血液凝固的调节因子,但其在细胞外基质重塑中的作用更为明显。它通过抑制基质金属蛋白酶(MMPs)的活性,调节细胞外基质的降解和重塑,影响细胞的迁移和侵袭。TFPI-2在胚胎发育过程中对身体形成和组织分化至关重要。在瘤发生中,TFPI-2通过抑制肿瘤细胞的侵袭和转...

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