快速光栅扫描有多种实现方式,使用振镜进行快速2D扫描,将振镜和可调电动透镜结合在一起进行快速3D扫描,但可调电动透镜由于机械惯性的限制在轴向无法快速进行焦点切换,影响成像速度,现可使用空间光调制器(SLM)代替。远程聚焦也是一种实现3D成像的手段。在LSU模块中,扫描振镜进行横向扫描,ASU模块包括物镜L1和反射镜M,通过调控M的位置实现轴向扫描。该技术不仅可以校正主物镜L2引入的光学像差,还可以进行快速的轴向扫描。想要获得更多神经元成像,可以通过调整显微镜的物镜设计来扩大FOV,但是具有大NA和大FOV的物镜通常重量较大,无法快速移动以进行快速轴向扫描,因此大型FOV系统依赖于远程聚焦、SLM和可调电动透镜。多光子显微镜市场集中,由于投产生产的成本较高,技术难度大,目前涌现的新企业不多。进口多光子显微镜层析成像
多光子激发的特点。激发波长∶两个或多个光子同时激发,激发波长是单光子激发波长的两倍或多倍(i.e.红光能激发UV探针)。多光子激发∶依赖于多个光子同时到达的时间。使用脉冲飞秒激光器(i.e.10-16seconds),且能提供更高的峰值功率。荧光限制在焦点处,能满足多个光子同时达到产生多光子吸收。荧光强度正比于(激光强度)n。为什么使用飞秒激光器?多光子激发需要超快的激光器,皮秒脉冲不能实现三光子激发。深度成像需要更高、更窄脉冲输出功率。多光子激发光源处于近红外区,对细胞毒性和光漂白更小。进口多光子显微镜层析成像证实了多光子显微镜对皮肤和别的皮肤病的诊断的可行性。
随着生物分子光学标记技术的不断进步,光学技术在揭示生命活动基本规律的研究中正发挥越来越重要的作用,也为医学诊疗提供了更多、更有效的手段。生物医学光学是近年来受到国际光学界和生物医学界关注的研究热点,在生物活检、光动力、细胞结构与功能检测、基因表达规律的在体研究等问题上取得了一系列研究成果,目前正在从宏观到微观上对大脑活动与功能进行多层面的研究。细胞重大生命活动(包括细胞增殖、分化、凋亡及信号转导)的发生和调节是通过生物大分子间(如蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸等)相互作用来实现的。蛋白质作为基因调控的产物,与细胞和机体生理过程代谢直接相关,深入研究基因表达及蛋白质-蛋白质相互作用不仅能揭示生命活动的基本规律,同时也能深入了解疾病发生的分子机理,进而为寻找更有效的药物分子、提高药物筛选和药物设计的效率提供新的方法和思路。
细胞在受到外界刺激时,随着刺激时间的增长,即使刺激继续存在,Ca2+荧光信号不但不会继续增强,反而会减弱,直至恢复到未加刺激物时的水平。对于细胞受精过程中Ca2+荧光信号的变化情况,研究发现,配了在粘着过程中,Ca2+荧光信号未发生任何变化,而配子之间发生融合作用时,Ca2+荧光信号强度却会出现一个不稳定的峰值,并可持续几分钟。这些现象,对研究受精发育的早期信号及Ca2+在卵细胞和受精卵的发育过程中的作用具有重要的意义。在其它一些生理过程如细胞分裂、胞吐作用等等,Ca2+荧光信号强度也会发生很强的变化。多光子显微镜是一款针对厚样本进行深层成像的利器,特别是在实验中。
1,光源、光路高度整合通过精密的设计,将飞秒激光器、扫描振镜、PMT、滤光片组,甚至是单光子荧光光路全套整合在一个不大的扫描头内,无论扫描头如何移动,扫描头内的光路都可以保持稳定不变,从而实现了超稳定、免维护的特点。2,配合多维度、高精度机械控制系统。扫描头直接架设在一个多维运动的机械装置上,可沿任意方向和角度移动扫描头,方便对动物样本进行多方位的扫描观察。而这在常规方案的多光子显微镜上有很大的实现难度,不但需要多个关节组合的光路导向机构,并且在这些关节旋转的时候,都冒着极大的光路偏移的风险,以至于在使用一段时间后都需要对光路进行再次校准,而这样的问题在我司上则完全不会发生。3.一机多能。高能短脉冲激光,多光子显微镜实现超快、超高清成像速度。高速高分辨率多光子显微镜长时间观察
高速扫描,高分辨率,多光子显微镜助力科研进步。进口多光子显微镜层析成像
2020年,TonmoyChakraborty等人提出了加速2PM轴向扫描速度的方法[2]。在光学显微镜中,物镜或样品缓慢的轴向扫描速度限制了体成像的速度。近年来,通过使用远程聚焦技术或电调谐透镜(ETL)已经实现了快速轴向扫描。但远程对焦时对反射镜的机械驱动会限制轴向扫描速度,ETL会引入球差和高阶像差,无法进行高分辨率成像。为了克服这些限制,该小组引入了一种新的光学设计,可以将横向扫描转换为无球面像差的轴向扫描,以实现高分辨率成像。有两种方法可以实现这种设计。***个可以执行离散的轴向扫描,另一个可以执行连续的轴向扫描。如图3a所示,特定装置由两个垂直臂组成,每个臂具有4F望远镜和物镜。远程聚焦臂由振镜扫描镜(GSM)和空气物镜(OBJ1)组成,另一个臂(称为照明臂)由浸没物镜(OBJ2)组成。两个臂对齐,使得GSM与两个物镜的后焦平面共轭。准直后的激光束经偏振分束器反射进入远程聚焦臂,由GSM进行扫描,使OBJ1产生的激光焦点可以进行水平扫描。进口多光子显微镜层析成像