对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间。操作步骤1．首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。5．灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。6．将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。灭菌锅使用：续加热，锅内蒸气增加，压力表指针又上升，当锅内压力增加到所需压力时，将火力减小。浙江快速冷却灭菌锅
高压蒸汽灭菌锅的原理:是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。使用方法：加水——堆放—密封——设定灭菌温度及时间——加热(排放冷空气)——灭菌——结束。加水:打开灭菌器盖，取出灭菌桶，向容器内注入蒸馏水至水位线标志处;堆放:堆放时物品之间应保持适当空隙;密封:物品堆放好后，将灭菌器盖盖好，将手轮按顺时针方向旋紧，使盖与口密合，但不宜太紧，以免损坏密封圈;设定灭菌温度及时间:调节设定键设定所需灭菌温度及时间;加热(排放冷空气):接通电源，电源指示灯及加热指示灯亮。四川灭菌锅安装调试杀菌锅的维修以及保养：应定期对喷洒板和出水筛进行清洁。
高压灭菌锅在选购的时候有非常多地方是需要重视的，这样才能更好的保证以后的质量，下面就为您来罗列高压灭菌锅的使用安全。1、严格的出厂检验：高压灭菌锅在出厂之前都需要经过各项检验与调整测试，每一项技术指标都需要满足设计的需求，在平时的运用涂装升降机的时候，也要注意准确的保养维护。2、高压灭菌锅每个月需要进行的维护维护：对高压灭菌锅进行维护维护的时候，对于巡查的这些零部件一定要添加润滑油液，使得它的使用候命能够得到增加。
灭菌锅有效灭菌：1.为了达到灭菌的目的,锅内待灭菌物品应不要太紧太满,以利于蒸汽流通。体积过大蒸汽就不易穿透物品。较下层物品摆放尽量稀疏,因下层蒸汽量相对少,分压不够,往往造成灭菌不完全。因此摆放时注意上下交错叠放,使留有较多空隙,利于蒸汽穿透。如需要对较小物品灭菌时,应事先装在容器中,所选容器也应尽量小且浅,且有通气孔,若用过大、过深及不带孔的容器,蒸汽不易穿透同时灭菌物品应尽量垂直放不要平放,切勿挤压。2.必须充分排除冷空气压力蒸汽灭菌锅内蒸汽的温度不光与压力有关,而且与蒸汽的饱和度有关。灭菌锅内冷空气未排尽时,即使蒸汽压力达到要求,温度也上不到相应的高度,而且还影响高压蒸汽穿透被灭菌物品的能力。如使用灭菌袋时，不要封口，在袋内装入100ml左右的水，以免袋内有空气残留；袋盖的密封性容器灭菌时也应打开盖子，或拧松盖后再灭菌。灭菌锅主要有一个可以密封的桶体，压力表，排气阀，安全阀，电热丝等组成。
高压灭菌器的安全隐患：放气阀放气灼伤：高压蒸汽灭菌一般在121℃左右的温度下实现灭菌，达到灭菌所需的温度和时间后，部分实验人员为快速取出灭菌物品常采用放气阀放气以实现减压，高温热蒸汽会通过放气阀快速喷出，实验人员有被灼伤风险。腔盖打开时热蒸汽灼伤：在压力到达0MPa之前不要打开灭菌器腔盖，即使压力为0，腔盖打开时，因锅内外温差较大，热蒸汽仍存在对使用者造成灼伤的危险。排气孔被堵：灭菌袋等被灭菌物如果堵住排气孔，灭菌器内压力失控，会成为引起容器破裂等重大事故的原因。被灭菌物应完全收纳到不锈钢提篮或提桶中，注意不要将排气孔周围堵住。灭菌器干烧：灭菌器多次使用时，未加满足够水，使灭菌器加热圈过热，加热圈干烧损坏，同时可能导致起火事故。外排水蒸气安全隐患：如果待灭菌对象是致病微生物，在没有达到灭菌所需的温度之前，灭菌器内已具有一定的压强，部分待灭的活菌会随空气排出到灭菌器外，有污染实验室、威胁实验人员的潜在风险。除此之外，密封圈损伤导致的蒸汽泄漏、触电以及灭菌器与多种电器同时使用可能的实验室线路超负荷都需要多加关注。立式高压锅适宜于瓶装或袋装培养基的灭菌。湖南双扉穿墙式灭菌锅
市面上很多灭菌锅并没有达到真正的灭菌效果。浙江快速冷却灭菌锅
高压灭菌锅在使用中容易被忽视的几个问题：影响灭菌效果的3个因素：1）水温应尽量低。温度不超过15℃。水的硬度值在0.7～2.0mmoL/L之间。2）蒸汽的干燥程度灭菌锅应使用干燥程度不小于0.9的饱和蒸汽，即蒸汽含水量不超过10%，金属负载状态下，干燥程度不小于0.95，以保持温度与压力符合线性关系。3）灭菌时间灭菌时间是指灭菌过程中灭菌室内达到规定温度后灭菌所需时间。操作中，应注意观察蒸汽的进汽速度和压力,一般保持压力和温度同步上升。浙江快速冷却灭菌锅
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