精子手工计数原理及操作方法
1.原理：将精液用适当的稀释液作一定量稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每毫升精液中精子数。2.方法（按照***版第四版《全国临床检验操作规程》）1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式：精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml CASA系统用量少，检测速度快，能够显著提高实验室的工作效率。南京鱼精子分析DSL
在精子形态学检查中，通过CASA系统对精子形态学特征进行分析，有些特征（细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它）可由操作者选择，这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[10]。4结论和展望计算机辅助**分析具有较好的可靠性、重复性和稳定性，与传统的光学显微镜目测估计相比，更具有快速方便、对比性强、便于交流等明显优点[11]，常规**检查无法测定精子微细运动特点，显示CASA在男性不育症诊断筛选中的优越性。王益鑫亦发现，部分手工**检查正常的不育患者，进行**全自动分析及生化检测，均发现明显异常[12]。因此，CASA系统在男性生殖能力检验方面具有重要的实际应用意义。香港鱼精子分析负相差CASA系统主要用于精子动力学的分析，可以评估精子的浓度、活力等参数。
检查具备条件
受检者，经历一段经常排精过程后，禁房事5－7天（上次排精到取标本间隔时间至少不得少于100小时）； [1]备大口有盖清洁干燥容器一个，以**方式获取精液，一次全部射入容器，盖上盖，记录标本离体时间； 贴身保温，30分钟内送到化验室，并向检验员提供标本取出时间。 精液常规观察：精液总容量（毫升），精子活动情况，精子密度（个/毫升），精液液化时间（标本取出到精液液化的时间），不动精子（个/高倍视野）等。见不动精子，须染色方可区分：不活动的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必须离心后检验，仍然找不到精子；方可报告无精。经三次取样化验，结果仍然找不到精子方可确认无精子症。
CASA系统进行**分析应注意以下几点：
3.2**分析仪阈值的确定（1）精子灰度、对比度阈值：由于分析仪是根据灰度的高低来判断精子的真伪，对亮度和对比度要求特别高，检测时应多次试用，寻找能准确识别精子的比较好灰度阈值[8]。（2）碎片：测定精子浓度准确性受**中细胞成份和非精子的颗粒物质的干扰，测定活动精子的百分率也受精子中非精子物质的影响[9]，这些也是需要注意的。对于系统误认为精子的非精子成分，如精原细胞、白细胞和非白细胞颗粒等，可人为准确记数后在可删除杂质一栏将其舍去。3.3出现1次异常结果应间隔复查反复检查2�3次方能得出比较正确的结果。3.4对于无精子的患者应仔细进行视野检查注意不要将杂质误认为精子计数在内，应将**3000ɡ离心15分钟后，再涂片检查，确认无精后再出报告。 HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数，鞭打频率（BCF）：精子曲线路径跨越其平均路径的平均频率。
CASA系统虽然有诸多优点，但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点：3.1标本的采集与制作（1）采集前禁欲2�7天，禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。（2）容器要清洁。（3）特殊情况下，*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套，普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。（4）注意保温（20�37℃），并于30分钟内送检验科。（5）标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性，因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。（6）密切注意**液化的情况，确保液化时间准确，因**样本随放置时间的延长，精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间，然后进行分析。（7）检测精子活动力，标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度（如高于50×106/ml）精子的标本，通常会增加碰撞的频率，并可能由此出现错误的结果。在这种情况下，建议用同源精浆稀释标本。Hamilton Thorne自动精子分析仪具有高精度、高效率和自动化的优点。上海绵羊精子分析VCL
全自动精子分析仪极大提高临床检验水平，广泛应用于泌尿科，男性科以及计划生育、优生优育研究等。南京鱼精子分析DSL
精子检测是通过一系列检测方法来评估男性生育能力的指标之一。而检测方法的选择直接影响到检测的准确性和结果的可靠性。目前，常用的检测方法有手动计数法、显微镜计数法、电子显微镜计数法、精子运动轨迹分析法等。手动计数法是通过显微镜手动计算精液中精子数量的方法，该方法简单易行，但因操作者技能不同，容易出现误差。显微镜计数法是通过显微镜观察精液中精子数量的方法，该方法比手动计数法更加准确，但需要专业的技能和经验。电子显微镜计数法是通过电子显微镜观察精液中精子数量的方法，该方法非常准确，但需要昂贵的设备。精子运动轨迹分析法是通过计算机分析精子运动轨迹来判断精子活力和数量的方法，该方法不仅准确性，而且可以直观地显示精子的运动状态，但需要较为复杂的技术。除了以上常见的检测方法，还有一些新兴的检测方法，如流式细胞术、全自动分析系统等。这些检测方法虽然在检测精子数量、活力等方面具有一定优势，但由于技术上的限制和设备的昂贵，目前还没有得到广泛应用。在选择检测方法时，需要考虑检测的目的、检测的准确性和结果的可靠性等因素。同时，需要选择正规的医疗机构进行检测，避免因设备不足或技术不过关等因素导致检测结果出现误差。南京鱼精子分析DSL
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