芯弃疾JX-8B数字ELISA产品是什么?怎么做到单分子技术的低成本实现?
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使用创新的fg级超敏免疫检测simoa单分子产品原理;只强度变化的单个信号二维离散化、阵列单分散排布,形成数万个荧光信号;将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号;创新型原理,有效提高检测灵敏度,可达fg/aM级!
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每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测使用现有平台就能做的单分子免疫检测;
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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
单分子酶检测到的比较低酶分子数假设蛋白质检测分析的更终灵敏度为背景信号可能由非特异性相互作用产生。为了评估内在敏感性,我们通过将400,000个带有生物素的珠子与不同浓度的酶缀合物链霉亲和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,创建了具有明确酶与珠子比例的珠子群体。为了方便起见,生物素化珠子是通过将生物素化DNA与功能化的珠子杂交提供的。互补DNA。[我们注意到,该实验不应被视为敏感的DNA检测;该检测的敏感性受到非特异性相互作用的限制,如补充图2所示,这些相互作用发生在酶缀合物和表面结合的DNA之间。 单分子免疫检测数字ELISA多重检测新型的单分子检测方法的普及版;
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只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战:医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而,传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足,这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M(~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述,包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱,但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡,例如程序较长或无法提供定量答案。
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我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
将200,000个功能化DNA捕获探针与100μL孵育含有目标DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小时后,移除DNA靶标溶液,用0.2×SSC缓冲液洗涤珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新悬浮并与10nM混合生物素标记的信号探针(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)对目标DNA具有特异性,孵育1小时。然后将珠子在去除信号探针后用含0.1%吐温-20的0.2×SSC缓冲液洗涤三次。随后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混匀并混合1小时。然后将珠子分离并在含0.1%吐温-20的5×PBS缓冲液中洗涤六次。重悬于10μLofPBS中并加载到飞升微升孔阵列上。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,极速检测,检测步骤只需要3次操作,远远快于常规ELISA;
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,微量样本实现多重快速检测!科研用数字ELISA检测速度快
芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,超敏检测,低至可测试到亚皮克级;单分子技术数字ELISA检测通量
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。循环血液转化为~2×10−15M(或2飞摩尔,fM);早期HIV传染血清中每mL含有10-3000个病毒颗粒,相当于p24抗原浓度范围为从50×10−18M(50attomolar,aM)到15×10−15M(15fM)10.尝试开发能够测量这些蛋白质浓度的方法集中在蛋白质上的核酸标记复制,11,12或测量整体、结合标记蛋白分子的性质13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金纳米颗粒和DNA生物条形码的标记物,已将蛋白质的检测范围扩展至低飞摩尔水平;更近使用该技术的一篇报道展示了检测到10飞摩尔PSA插入物17。这些方法所达到的灵敏度然而,检测蛋白质仍然落后于核酸,如聚合酶链反应(PCR),从而限制了蛋白质组中具有已在血液中检测到6,19。单个蛋白质分子的分离和检测为测量极低浓度的蛋白质s1,2提供了一种有希望的方法。 单分子技术数字ELISA检测通量