代谢组研究对二代测序结果的验证与拓展
验证基因表达调控效果:二代测序得到的转录组信息反映的是基因表达层面的情况,而代谢组中代谢物的实际含量变化可以直观地验证基因表达调控是否真正落实到了代谢环节。例如,转录组测序显示某脂肪酸合成途径的多个基因转录下调,若代谢组分析中相应的脂肪酸及其前体代谢物含量确实减少,就说明基因表达的改变确实引发了代谢过程的相应调整。
拓展功能机制认知:代谢组数据能呈现出生物体在特定状态下复杂的代谢网络变化,这可以帮助我们发现一些二代测序单纯从基因层面难以察觉的信息。比如某些代谢物可以作为信号分子反馈调节基因表达,这种代谢对基因的反向调控机制只有结合代谢组和二代测序相关分析才能完整揭示,从而拓展对整个生命活动调控机制的理解。 一代和二代测序的区别?静安区嘉安健达二代测序公司
转录组测序的主要测序对象包括以下几类(下):
长链非编码RNA(lncRNA):lncRNA长度较长,具有多种生物学功能,如参与基因表达调控、染色质修饰、转录因子活性调节等。转录组测序有助于发现和鉴定新的lncRNA,并分析其在不同组织和细胞中的表达模式及功能机制。其他RNA
环状RNA(circRNA):circRNA是一类特殊的非编码RNA,呈环状结构,具有稳定性高、不易被降解等特点。转录组测序可以检测circRNA的存在和表达水平,研究其在基因表达调控、细胞信号转导以及疾病发***展中的作用。
小核RNA(snRNA)和小核仁RNA(snoRNA):snRNA主要参与真核生物mRNA的加工过程,如mRNA的剪接等;snoRNA则主要参与rRNA的加工和修饰。转录组测序可以对它们的表达和功能进行研究,以揭示其在细胞内的作用机制。 辽宁哪里有二代测序应用16s测序是二代测序吗?
宏基因组二代测序,你了解多少?宏基因组二代测序(mNGS)是一项覆盖病原谱广且高通量的检测技术,已在临床领域得到了广泛的应用。对于血液病患者,病原mNGS通过对样本快速高通量测序,可以获得更准确、相对无偏倚的病原信息,对病原诊断起到积极的作用,尤其对传统微生物学检测未覆盖到或检测周期较长、阳性率较低的病原可提高检出率。对于临床相关样本应首先完善传统微生物学检测,病理、无菌标本培养仍然是诊断的金标准,病原mNGS是对传统微生物学检测的有力补充和延展而非替代。病原mNGS的报告解读应充分评估检出微生物的致病性、流行病学、生物信息学信息,同时在结合患者临床特征的基础上进行综合判断。
常见的二代测序平台有哪些?
二、IonTorrent系列
包括Proton/PGM等型号,其技术基于半导体芯片,可检测DNA聚合反应中释放的氢离子,从而实现对DNA序列的测定,通量适中,测序速度快,适用于快速检测和一些临床诊断应用,如病原体检测等.
华大智造系列DNBSEQ-T7/T20:通量高,能够快速完成大量样本的测序工作,适用于大规模的基因组学研究和临床检测项目,如群体基因组测序、**基因突变检测等.MGISEQ-2000:性能稳定,可提供准确可靠的测序数据,在转录组测序、全基因组甲基化测序等多种应用场景中都有良好表现.
赛纳生物S100利用流式荧光发生测序化学技术和ecc纠错编码测序技术,将测序精度提升至Q40,可检出0.1%低频突变,在bitseq简并测序模式下,**快6.5小时完成基因测序,适用于未知病原微生物等亟需快速检测的场景. 二代测序技术使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能。
二代测序——转录组测序的实验流程(下)测序根据研究需求和预算选择合适的测序平台,如Illumina测序平台。它的测序原理主要是边合成边测序(SBS)。在测序过程中,dNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)带有不同颜色的荧光标记,当新的dNTP加入到正在合成的DNA链时,通过检测荧光信号来确定碱基类型,从而读取cDN**段的序列。测序深度(覆盖度)也是一个重要参数,一般来说,测序深度越高,检测到的低表达转录本的概率就越大,但成本也会相应增加。数据分析数据质量控制是第一步,要去除低质量的reads(如含有较多不确定碱基“N”的reads)和接头序列。然后将高质量的reads比对到参考基因组或转录组上,常用的比对软件有TopHat、STAR等。在确定了reads的位置后,就可以计算转录本的表达量,常用的方法有RPKM(ReadsPerKilobaseofexonmodelperMillionmappedreads)、FPKM(FragmentsPerKilobaseofexonmodelperMillionmappedfragments)等。此外,还可以进行差异表达分析,找出在不同样本条件下(如疾病组和健康组)表达量有***差异的转录本,用于后续的功能注释和通路分析,了解这些转录本可能参与的生物学过程和信号通路。二代测序通量大,可以产生上G的reads.河南嘉安健达二代测序运用
二代测序是先打断DNA,使其片段化。静安区嘉安健达二代测序公司
二代测序技术的一些研究进展②植物基因组学研究领域:花生四倍体野生种基因组测序:河南农业大学殷冬梅教授团队和上海交通大学韦朝春教授团队联合发布了花生四倍体野生种近乎完整基因组amon2.0版本。该研究结合ONT超长读段、二代测序和Hi-C等多种测序技术,使基因组的连续性、完整性和准确性都得到了显著提高,为花生的遗传驯化和分子育种提供了重要的基因组数据信息资源。长雄野生稻基因组解析:中科院昆明动物所王文研究组与云南省农科院粮食作物研究所胡凤益研究组等中外机构合作,利用二代测序技术成功组装出高质量的长雄野生稻基因组,并对其与近缘物种的分歧时间、基因的收缩扩张等进行了分析,还鉴定出一批可能影响地下茎以及自交不亲和性状的候选基因及代谢途径,为解析相关分子机制提供了重要线索。静安区嘉安健达二代测序公司