上海非侵入式成像纺锤体Hoechst染料

    亨廷顿病是一种由亨廷顿基因突变引起的神经退行性疾病，其主要病理特征是亨廷顿蛋白的异常聚集。研究表明，纺锤体功能障碍在亨廷顿病的发生和发展中也起着重要作用。亨廷顿病患者中，亨廷顿蛋白的异常聚集影响微管的稳定性和纺锤体的组装，导致染色体分离异常和细胞周期紊乱。纺锤体功能障碍会导致染色体不稳定，增加基因组的不稳定性，进而影响神经元的正常功能和存活。纺锤体功能障碍会导致细胞周期紊乱，增加细胞凋亡的风险，加速神经元的丢失。 纺锤体，作为细胞分裂的“引擎”，驱动着生命的延续与多样性。上海非侵入式成像纺锤体Hoechst染料

纺锤体生成在含中心体的细胞中，纺锤体的生成开始于细胞分裂前初期-即在细胞核膜分解(NuclearEnvelopeBreakdown,NEB)之前。初期的结构为两个**的以中心体为核的星状体(asters)。当细胞核膜分解后，染色体和星状体发生一系列复杂的互动反应。**终结果为所有的染色体在纺锤体的**(赤道板,)排列整齐，每两条染色体有一个着丝点，每一个着丝点被一束极性相同的微管（通常称为纺锤丝）附着。此时细胞处于分裂中期，纺锤体生成完毕。实验证明，中心体在这个过程中的作用不是必需的。动物细胞在中心体被激光捣毁后仍旧能够筑构纺锤体，但其位置通常不在细胞的大致几何中心，其后的胞质分裂也会受严重影响。纺锤体[1]在不含中心体的细胞中，纺锤体的生成是由染色体本身主导的。此过程由一小分子量的GTP连接蛋白（RanGTPase）控制。细胞核分解后，纺锤丝由染色体周围生成。其后这些纺锤丝会在动力分子与为微管动力的合作影响下自动排列为极性相反大致数目相同的两组。每组的极性相对于一组着丝点。同时在微管远端的动力蛋白dynein会将这些微管束集中到一点，形成纺锤极区(SpindlePolarZone)。与此同时，染色体会自动在赤道板排列整齐。纺锤体生成完毕。上海非侵入式成像纺锤体Hoechst染料纺锤体的形成和功能受到多种信号分子的调控，如生长因子等。

Oosight影像分析系统采用液晶偏光成像技术，无需对卵母细胞进行染色，即可实时、清晰、高对比度地进行纺锤体结构和透明带成像，对ICSI、核移植操作、卵母细胞质量评价等有很好的辅助作用。

主要应用ICSI：在单精胞浆注射过程中定位初级卵母细胞，避免卵的破裂损伤，增强胚胎的发育潜能。卵评估：利用定量的分析数据对卵进行分级，改善对胚胎的选择。体外成熟评估：在未成熟卵催化（IVM）过程判断成熟期，判断依据采用的是准确的识别纺锤体，而非不准确的极体。质量控制：利用定量的分析数据对卵进行分级，改善对胚胎的选择。

核移植：显著提高核移植的成功率。由于在核摘除的过程可以清楚的看到核质，使得核移植的成功率增加了80%，并减少了线粒体DNA的摘除。卵冷冻研究：对冷冻的初级卵母细胞进行解冻前和解冻后的定量分析，从而判断卵的发育力，改善妊娠率。纺锤体研究：检测胚胎中纺锤体的发育过程，确定正常和非正常分裂率（只可用于搭配有培养箱的显微镜）。可以对染色体非正常的或非整倍体的胚胎成像，从而选择***的前体做PGD诊断。透明带研究：测量卵母细胞的透明带；准确测量纺锤体和透明带中分子排列方向的差别变化，判断纺锤体和透明带是否处于正常状态

纺锤体观测仪使ICSI更加安全可靠在进行单精子卵胞浆内注射（ICSI）授精时，**初人们观察人体内成熟的卵母细胞时，通常认为，卵母细胞纺锤**于***极体附近，故传统的ICSI操作是转动卵母细胞使其***极**于6点或12点处，然后在3点处注入精子。但是，在大量使用纺锤体观测仪后发现，***极体并不能很好地预测纺锤体的位置。一项研究提示，在ICSI后，用纺锤体观测仪观察纺锤体与***极体的夹角，结果发现小于30°这组卵母细胞的正常受精率更高。极体在卵周隙中的移动，或者纺锤体在胞质中的易位都使两者的位置关系发生改变，普通光学显微镜下ICSI穿刺部位的选择，可能会损伤纺锤体和(或)造成染色体的异常。通过纺锤体观测仪，可以精确地对卵母细胞中纺锤体的位置进行定位，从而避免在ICSI过程中损伤纺锤体，使ICSI更加安全可靠。有文献报道，在进行ICSI时，观察到“双折射纺锤体”的成熟卵母细胞的受精率和质量胚胎率***高于未观察到双折射纺锤体组。也有学者发现，有些卵母细胞在普通光学显微镜下看到是正常的，但在纺锤体观测仪这个“照妖镜”下，就能显出原形，表现为有***极体、但缺乏双折射的纺锤体，这类卵母细胞ICSI后的受精率和妊娠率极低。纺锤体微管的数量和分布随细胞分裂阶段而变化。

    纺锤体成像技术的中心在于提高成像的分辨率和速度，以捕捉纺锤体的精细结构和动态变化。以下是几种主要的纺锤体成像技术的技术原理：结构光照明显微镜（SIM）：SIM通过引入已知的空间调制光场，使样品发出具有特定空间频率的荧光信号。通过采集多个不同空间频率的荧光图像，并利用算法进行重建，SIM可以实现超越传统荧光显微镜分辨率的成像。这种方法不仅提高了成像的分辨率，还保持了较快的成像速度和较好的细胞活性。受激辐射损耗显微镜（STED）：STED利用一束聚焦的激光束（称为STED束）来抑制样品中特定区域的荧光信号。通过精确控制STED束的位置和强度，STED可以实现超越衍射极限的成像分辨率。这种方法特别适用于观测纺锤体等复杂结构中的精细细节。单分子定位显微镜（SMLM）：SMLM通过检测样品中单个荧光分子的位置来实现高分辨率成像。由于荧光分子的随机闪烁特性，SMLM可以在时间域上分离不同分子的荧光信号，从而实现对单个分子的精确定位。这种方法不仅提高了成像的分辨率，还提供了对纺锤体中单个微管和蛋白质分子的动态变化的观测能力。 纺锤体在细胞分裂中的精确调控是生物体发育的基础。香港双折射性纺锤体揭示卵母细胞关键结构

在细胞分裂过程中，纺锤体的形成和功能受到严格的调控。上海非侵入式成像纺锤体Hoechst染料

    纺锤体成像技术在细胞生物学领域具有很广的应用价值。以下是几个主要的应用方向：揭示纺锤体的精细结构和动态变化：纺锤体成像技术能够清晰地捕捉到纺锤体的精细结构和动态变化，如微管的排列、染色体的分离和纺锤体的形态变化等。这些观测结果不仅有助于揭示纺锤体的形成和功能机制，还为理解细胞分裂的复杂过程提供了新的视角。研究纺锤体相关疾病：纺锤体的异常与多种疾病的发生和发展密切相关，如遗传性疾病等。纺锤体成像技术能够实现对纺锤体结构和功能的精确观测，为揭示这些疾病的发病机制提供有力的支持。此外，该技术还可以用于评估药物对纺锤体的影响，为药物筛选提供新的思路和方法。辅助生殖技术：在临床诊疗中，纺锤体成像技术也被广泛应用于辅助生殖技术中。例如，在卵胞质内单精子注射（ICSI）过程中，纺锤体成像技术能够精确观测卵母细胞中纺锤体的位置，从而避免在精子时损伤纺锤体，提高受精率和临床妊娠率。 上海非侵入式成像纺锤体Hoechst染料