干细胞研究同样与 DMEM 培养基紧密相连。DMEM 培养基能够为干细胞群体的维持和扩增提供适宜环境。以胚胎干细胞为例,高糖型 DMEM 培养基凭借充足的能量供应,助力胚胎干细胞保持良好的生长状态,维持其多能性。在诱导干细胞分化为特定细胞类型时,科研人员可根据需求对 DMEM 培养基进行优化,添加特定的生长因子等成分,引导干细胞向目标细胞分化。比如,在神经干细胞向神经元细胞分化的研究中,通过调整 DMEM 培养基成分,促进神经干细胞的分化进程,为神经再生医学研究奠定基础。TNM-FH昆虫培养基是改进的Grace’s昆虫培养基,适当补充添加剂后,可用于各种鳞翅类昆虫细胞的培养。江苏正规细胞培养基供应商

无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分,才能帮助细胞贴壁生长,包括以下几大类物质:1)促贴壁物质:一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2)促生长因子:针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,有些是许多细胞必不可少的,如胰岛素。3)酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中需含酶抑制剂,以终止酶的消化作用,达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4)结合蛋白和转运蛋白:常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大,可增加培养基的粘度,保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常见的。河南医疗细胞培养基供应商即用型DMEM/F12,确保细胞活力与实验结果可靠性。

细胞培养基的种类很多,按其来源分为合成培养基和天然培养基(目前使用的培养基绝大部分是合成培养基),按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌,液体培养基由专业商家提供,用户可直接使用,非常方便。1、合成培养基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质:氨基酸氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。因此,各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时,还应重新加入原来量的谷氨酰胺。碳水化合物碳水化合物是细胞生长主要能量来源,其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖和醋酸等。无机盐培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外,通过提供钠,钾和钙离子,帮助细胞调节细胞膜功能。
可在血清含量低时用,适用于克隆化培养。F12适用于CHO细胞,也是无血清细胞培养基中常用的基础细胞培养基。DMEM/F12细胞培养基将DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后营养成份丰富,血清使用量也减少。常作为开发无血清细胞培养基时的基础细胞培养基。与天然培养基相比,有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代,因此,细胞培养中使用合成培养基时必须加入一定量的天然培养基成分,以克服合成培养基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,这样才能维持细胞活力,促进细胞增殖。针对不同的动物细胞,现已开发了多种商业化、个性化的低血清细胞培养基配方,营养成份更加丰富,血清使用量可降低至1~3%,由此可减少了血清等动物来源成份对生物制品安全性的影响。无血清细胞培养基(serumfreemedium,SFM)经历了天然培养基、合成培养基后,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本,简化分离纯化步骤,避免病毒污染造成的危害。无血清培养基,一般是在合成培养基的基础上,加入成份完全明确的或部分明确的血清替代成份,达到既能满足动物细胞培养的要求,又能有效克服使用血清所带来问题的目的。Ham’s F-12与DMEM等体积混合后,得到的DMEM/F12培养基营养更为丰富,使用更为广。

培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。缓冲系统大多数细胞所需pH在-。但是,细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(-),而传代转化细胞系则需要偏酸pH(-)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲,因此,气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量为;如果CO2浓度维持在10%,培养液中NaHCO3的加入量为。细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH-范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠()共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色。TNM-FH昆虫培养基不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。广东细胞培养基厂家直销
RPMI-1640是改进型的McCoy ‘s 5A培养基,使用碳酸氢盐缓冲系统。江苏正规细胞培养基供应商
DMEM,即 Dulbecco 改良的 Eagle 培养基,在细胞培养领域占据着极为重要的地位。它源于经典的 Eagle 培养基,经科学家 Dulbecco 改良优化后,焕发出全新活力。DMEM 培养基成分丰富,氨基酸浓度是原始 Eagle 培养基的两倍,还涵盖了非必需氨基酸,为细胞蛋白质合成筑牢根基。其维生素含量亦是 Eagle 培养基的四倍之多,积极参与细胞内各类代谢反应,助力细胞维持正常生理功能。同时,培养基中包含酸,这一糖酵解途径的关键物质,在细胞能量供应方面发挥着重要作用,时刻为细胞的生命活动提供动力支持。江苏正规细胞培养基供应商
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