Grace’s昆虫培养基是由Grace改良的Wyatt培养基,该培养基与昆虫血淋巴的化学成分更为相近,Grace使用这种培养基成功建立了***个昆虫连续细胞系。Grace’s昆虫培养基**初用于澳大利亚白星橙天蚕蛾(Anthereaeucalypti)细胞的培养,适当补充添加剂后,Grace’s昆虫培养基可用于培养各种昆虫细胞,包括多种鳞翅类以及一些双翅类昆虫的细胞。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。Grace’s补充昆虫细胞培养基**初设计用于澳大利亚白星橙天蚕蛾(Anthereaeucalypti)的细胞生长。Grace’s补充昆虫培养基目前***用于草地贪夜蛾细胞Sf9和Sf21的生长。Sf9和Sf21细胞常规使用于杆状病毒表达载体系统(BEVS)表达重组蛋白。本产品含有水解乳蛋白、酵母粉、L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。Grace’s补充昆虫培养基含有Grace’s昆虫细胞培养基(PM152011)中不常见的水解乳蛋白和酵母粉,此产品需搭配血清或无血清添加物使用。 MCDB是为特定细胞设计的低蛋白和无血清培养的培养基。湖南医疗细胞培养基厂家

其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍。MEM(MinimalEssentialMedium)培养基MEM(MinimalEssentialMedium)培养基有含Earle's平衡盐的类型,也有含Hanks'平衡盐的类型;有高压灭菌型的,也有过滤除菌型的;还有含非必需氨基酸的类型。是基本、适用范围广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基础上改良,增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交瘤细胞培养,以及无血清培养的基础细胞培养基。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计,含有BSS、21种氨基酸、维生素等,适于多种正常细胞和肿瘤细胞的培养,也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素。河北华晨阳细胞培养基厂家DMEM/F12培养基常作为开发无血清培养基的基础,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。

1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5%CO2的培养条件。天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富,培养效果良好,但缺点是成分复杂,来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物。
CMRL培养基是由康诺特医学研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)设计出来的,初用于L细胞(Earle)的无血清培养。CMRL培养基添加马血清或小牛血清后,特别适用于猴肾细胞的克隆培养以及其他哺乳动物细胞系的培养。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。注意事项本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;为保持本产品的比较好使用效果,请勿进行冻融处理;本产品用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和。Ham’s F-12营养混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)是由Ham以Ham’s F-10营养混合物为基础设计而成的。

L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必要的一种营养,但其在溶液中不安定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞危害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定,不会自发的降解。细胞运用其机制是:在细胞培训时,细胞会日益向培养液中获释一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收运用。细胞运用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养方针相像,连续的将低浓度水准的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成剩余的氨,更有利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无须适应,并且可以延长细胞的培养时间,缩减传代次数,即节约了时间也节省了钱财。与添加L-谷氨酰胺的培养基中培训的细胞相比之下,活性减低得更慢。延滞期稍为延长的缘故是肽酶的释放和二肽的消化需一定的时间。NEAA(非须要氨基酸),是在MEM培养基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(门)冬酰胺、L-天(门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能下降细胞培育时细胞自身生产非须要氨基酸的副作用,有效性推动细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需。TNM-FH昆虫培养基可用于各种鳞翅类昆虫细胞的培养。含有多类细胞培养所需的氨基酸、无机盐等多种成分。实验细胞培养基批发
Eagle培养基是一种基本、适用范围广的培养基,是动物细胞培养中常用的培养基之一。湖南医疗细胞培养基厂家
培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。缓冲系统大多数细胞所需pH在-。但是,细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(-),而传代转化细胞系则需要偏酸pH(-)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲,因此,气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量为;如果CO2浓度维持在10%,培养液中NaHCO3的加入量为。细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH-范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠()共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色。湖南医疗细胞培养基厂家
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