荧光染料法原理：一些荧光染料（如 SYBR Green I）能特异性地结合到双链 DNA 上。在 PCR 反应体系中，随着 DNA 扩增产物的不断增加，与双链 DNA 结合的荧光染料也越来越多，荧光信号强度与 PCR 产物的数量呈正相关。通过检测荧光信号的强度变化，就可以实时监测 PCR 反应的进程。过程：在 PCR 反应的每一个循环中，当温度降低到退火温度时，引物与模板结合，DNA 聚合酶开始延伸引物，合成新的 DNA 链。此时，荧光染料会结合到新合成的双链 DNA 上，仪器会在特定的时间点检测荧光信号的强度。随着循环次数的增加，荧光信号逐渐增强，当信号强度达到设定的阈值时，对应的循环数被称为阈值循环数（Ct 值）。定量依据：在一定的范围内，起始模板量与 Ct 值呈对数关系。即起始模板量越多，达到阈值所需的循环数越少，Ct 值越小；反之，起始模板量越少，Ct 值越大。通过已知浓度的标准品建立标准曲线，再根据待测样本的 Ct 值，就可以在标准曲线上计算出其对应的起始模板量。精确的温度控制和快速的升降温速度是关键。镇江JOE荧光定量PCR仪厂家
实时荧光定量 PCR 仪在多个领域都有广泛的应用，以下是一些主要的应用领域：作物遗传育种：在作物遗传改良中，可用于筛选优良基因、鉴定杂种优势以及检测转基因作物中外源基因的整合和表达情况。例如，通过检测与作物抗逆性、产量等相关基因的表达水平，筛选出具有优良性状的品种，加快育种进程。植物病害检测：快速检测植物病原体，如病毒、、细菌等，及时发现植物病害，采取相应的防治措施，保障农作物的产量和质量。例如，检测果树中的病毒情况，为果树的病虫害防治提供依据。徐州QPCR荧光定量PCR仪厂家供应结核分枝杆菌的检测，传统的培养方法需要数周时间；
多重荧光定量 PCR：在同一反应体系中同时检测多个目标基因时，VIC 荧光染料可与其他不同发射波长的荧光染料（如 FAM、ROX 等）组合使用。由于 VIC 的光谱特性与其他染料有较好的区分度，能避免荧光信号之间的相互干扰，从而实现对多个不同目标基因的同时定量分析。例如，在疾病诊断中，可同时检测多个与疾病相关的基因标志物，提高诊断的准确性和全面性。SNP 基因分型：在单核苷酸多态性（SNP）检测中，通过设计特定的引物和探针，利用 VIC 荧光染料标记不同等位基因的探针。在 PCR 反应过程中，根据不同等位基因与探针的特异性结合，产生不同的荧光信号，从而实现对 SNP 位点的分型。这种方法具有较高的准确性和灵敏度，可用于疾病关联研究、药物遗传学研究以及个体遗传特征分析等领域。
荧光定量 PCR 仪是一种精密的仪器，正确的维护和保养可以延长其使用寿命，保证仪器的性能和检测结果的准确性。长期维护：定期多方面检查：每年或每两年对仪器进行一次多方面的检查和维护，包括机械部件、电子元件、制冷系统等的检查和保养。由专业的维修工程师对仪器进行深度保养，及时发现并更换潜在的故障部件，确保仪器的整体性能处于良好状态。存放环境维护：如果仪器长时间不使用，应将其存放在干燥、清洁、温度适宜的环境中，避免仪器受到潮湿、灰尘、震动和电磁干扰等影响。定期通电开机，让仪器运行一段时间，以保持各部件的正常性能。通过检测孕妇外周血中的胎儿游离 DNA 或羊水、绒毛等样本中的胎儿基因，可对胎儿进行遗传性疾病的早期诊断。
VIC与 FAM 类似，是一种荧光报告基团，可标记在引物或探针上用于荧光定量 PCR。它在 PCR 过程中，随着引物或探针与目标 DNA 的结合以及 PCR 产物的扩增，会发出特定波长的荧光，其荧光信号强度与 PCR 产物的量成正比，通过检测荧光信号的变化来实现对目标 DNA 的定量分析。特点：激发波长和发射波长与 FAM 有所不同，激发波长约为 538nm，发射波长约为 554nm，荧光颜色为黄绿色。VIC 常用于多重荧光定量 PCR 中，可与 FAM 等其他荧光染料同时使用，实现对多个不同目标基因的同时检测，因为其光谱特性与其他染料有较好的区分度，能避免荧光信号之间的相互干扰。纯度差，含有蛋白质、多糖、酚类等杂质，会抑制 PCR 反应，降低扩增效率，影响荧光信号强度。常州SYBR-Green荧光定量PCR仪价格多少
受到仪器的整体性能、光学系统设计、荧光染料质量以及数据处理算法等多种因素的综合影响。镇江JOE荧光定量PCR仪厂家
荧光定量 PCR 仪是一种通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对 PCR 产物进行标记跟踪，实时监测反应过程的仪器。工作原理：在 PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程。随着 PCR 扩增的进行，每经过一个循环，荧光信号就会相应增加。通过检测荧光信号的变化，就可以判断 DNA 的扩增情况，进而实现对初始模板的定量分析。常用的荧光化学物质有 TaqMan 荧光探针和 SYBR 荧光染料等。TaqMan 探针法中，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR 扩增时，Taq 酶的 5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号。SYBR Green Ⅰ 法中，SYBR 荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的 SYBR 染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。镇江JOE荧光定量PCR仪厂家
