HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养，尤其在CO2培养箱外操作时（如显微镜观察），可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM，过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感，需避光保存。HEPES缓冲液能有效维持细胞外pH稳定，防止因CO2逸出导致的培养基碱化。在胚胎培养中，HEPES需严格过滤除菌，且浓度不超过15 mM，以避免影响囊胚发育。建议与**酸钠联用增强缓冲能力。HEPES还可用于原代细胞培养，其低离子强度特性减少了对细胞的机械损伤。注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记；江苏采购HEPES
Tris-HCL与HEPES（供注射用）缓冲液应用对比
**常用的缓冲液有很多，如磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液、氨基酸缓冲液等。不同的缓冲液差别液很大，***主要来对比两种**常用的缓冲液：Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液各自的应用对比。
1、Tris-HCl缓冲液的应用Tris常用于蛋白或者核酸的缓冲液，其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的pH，由于其具有弱碱性，水溶液的pH在10.5左右，可通过添加HCl或者NaOH制备不同pH的缓冲液，根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效范围通常是pH7.0-9.2之间。此外，Tris还可以制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物（磷霉素等）的中间物，在化妆品、医药、涂料以及合成中均有应用。应用于体内时，Tris作为一种不含钠的氨基缓冲碱，在体液中与H2CO3结合，生成碳酸氢盐。因此它能缓冲酸，而且能降低CO2张力，有纠正急性呼吸性酸中毒和代谢性酸中毒双重效果，其作用较碳酸氢钠快而强。HEPES缓冲液对细胞无毒性作用，它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用时浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。在体外诊断、DNA/RNA提取、脂质体药物等方面均有应用。
药用辅料HEPES实验室采购注射用HEPES缓冲液中美双报高性价比；
三、使用注意事项浓度控制：根据药物制剂的需求和细胞类型，严格控制HEPES的浓度。一般来说，药用级HEPES的使用浓度在适宜范围内，以确保其缓冲效果和细胞保护作用。pH调节：在制备药物制剂时，需要准确调节溶液的pH值至适合细胞生长或药物发挥作用的范围内。HEPES的加入有助于维持这一pH值的稳定。储存条件：HEPES粉末应储存在干燥、阴凉、通风良好的地方，避免阳光直射和高温。配制好的HEPES溶液应存放在适当的温度下，避免长时间暴露于空气中或受到污染。与其他成分的兼容性：在制备药物制剂时，需要注意HEPES与其他成分的兼容性。避免与可能产生不良反应或降低药效的成分同时使用。
与其他的缓冲体系相比，HEPES突出的优势有以下几点：
1. pKa 和 buffer 比较稳定，随温度的变化很小。
2. HEPES 的缓冲能力不会与受其他离子的影响，同时HEPES本身也不会对其他离子的功能造成影，HEPES拥有性质稳定性。
3. 细胞培养基中pH的稳定性主要依靠培养基中的碳酸氢盐和5%的CO2共同维持。当细胞处于开放环境时，二氧化碳的弥散会导致pH上升脱离生理pH范围。可是添加HEPES缓冲对的培养基则不存在这方面问题。
4. HEPES不干扰细胞内的生化反应因为它不易穿过生物膜，因此它更适用于伊立替康脂质体。 注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记企业询价。
（5）缓冲溶液在稳定性方面各显利弊：①Tris-HCl缓冲溶液pH值受外界影响较大，一般现用现配。同时需要注意Tris是一级脂肪胺，分子结构中的氨基易与醛类化合物发生缩合反应，是一些生化实验的抑制剂。②硼酸盐缓冲液有一定毒性，不宜用做注射液或者口服液的缓冲液。③虽然磷酸盐缓冲溶液稳定性很好，但磷酸根具有一定的络合能力会抑制一些与金属离子有关的生化反应。④HEPES缓冲溶液是较理想的生物缓冲剂，但其有多种生物学效应，如：缩短血液凝固时间、减缓平滑肌收缩频率以及阻断细胞膜上的阴离子通道等，在一定程度上会影响患者身体状态，使用时应需注意。注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记状态为A；江苏采购HEPES
国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A；江苏采购HEPES
使用注意事项pH调节：在配制HEPES溶液时，需要准确调节pH值至适合细胞生长的范围内。浓度控制：根据实验需求和细胞类型，严格控制HEPES的浓度，避免过高或过低。一般来说，HEPES的使用终浓度为10~50mmol/L，其中20mmol/L HEPES足以满足大多数细胞培养的缓冲需求。避光操作：由于HEPES暴露于光线中时会产生过氧化氢，对培养的细胞或其他有生物活性的物体产生毒性，因此HEPES作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。与其他成分的兼容性：在配制细胞培养基时，需要注意HEPES与其他成分的兼容性。长期稳定性：配制好的HEPES溶液需要存放在适当的温度下，确保其长期稳定性。综上所述，HEPES作为一种高效、稳定的缓冲液，在细胞培养和其他生物化学研究中发挥着重要作用。通过合理控制HEPES的浓度和配制方法，可以维持细胞培养环境的pH稳定，提高细胞的生长和代谢效率。江苏采购HEPES
