取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟; b.最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀; c.将上一步的混合液转移至硅基DNA吸附材料,分离液体和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脱液洗脱硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR扩增及电泳 将上步纯化的DNA进行PCR扩增,在电泳仪中检测DNA。 本发明具有以下有益效果: 本发明的土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,配制好土壤裂解液、结合液、漂洗液、洗脱液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入结合液之前,样品土壤来源的二氧化硅不与DNA结合,离心分离固体颗粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入结合液,混合后转入含有硅基DNA吸附材料中,分离液体和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脱获得纯化DNA;土壤DNA提取保证正规产品——益启生物公司。黄浦区土壤微生物土壤DNA提取联系方式
12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,崇明区土壤微生物DNA土壤DNA提取商家在上海益启生物买土壤DNA提取可以退货吗?
(c)漂洗液,所述漂洗液为70-80%乙醇; (d)洗脱液,其组分为:10 mmol/L Tris-HCl,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二钠,pH 8.0; (e)硅基DNA吸附材料,所述硅基DNA吸附材料为二氧化硅纳米颗粒、硅胶膜、玻璃纤维膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒中的任意一种。 使用本发明的试剂盒,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步骤: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤样品,离心分离土壤和上清液,上清液加入结合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,分离硅基DNA吸附材料和液体,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脱DNA;具体包括以下步骤: a.刮取含有尿液的表层土壤,烘干,
A ladder、Lane 3: Flowerbed soil、Lane 4: Saline soil、Lane 5: Desert soil、Lane 6: Negative control。结论:采用SPINeasy DNA Kit for Soil提取多种类型土壤基因组DNA,可直接用于PCR扩增。3.优不***,看看就知道。备注:260/280比值在1.7-2.0范围视为提取效果良好,纯净的DNA其260/280约为1.8。备注:260/230比值大于1.0视为提取效果良好。结论:实验证明,SPINeasy DNA Kit for Soil与市场上其他土壤基因组DNA提取试剂盒相比,具有更高的产量和。土壤DNA提取 ,就选上海益启生物科技有限公司。
NA基因扩增子测序及分析,研究菌群分布。参考文献2:·样本类型:***种子。·样本粉碎:每管20粒种子,电动组织研磨器配合研磨杵,研磨5min。·样本DNA提取:FastDNA Spin Kit for Soil提取。·下游实验:细菌16S rDNA基因扩增子测序及分析,研究菌群分布。 相关文献:1.Campisano A ,Antonielli L , Pancher M , et al. Bacterial Endophytic Communities in theGrapevine Depend on Pest Management【J】. Plos One, 2014, 9.2.Chen X , Krug L ,Yang H , et a上海益启生物科技有限公司是一家专业提供土壤DNA提取的公司。上海FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取商家
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解决方案应对以上难点?MP Biomedicals:MP有三款试剂盒可供选择。产品:提取方式、裂解介质、样本类型、样本硬度、去杂提纯、操作耗时。FastDNA Spin Kit:玻璃奶法、介质A、植物样本、艰难样本、高效提纯、需一定时间。需一定时间:柱膜法、介质E、微生物样本、较软样本、高效提纯、省时简便。FastDNA Spin Kit for Soil:玻璃奶法、介质E、微生物样本、较软样本、高效提纯、需一定时间。解决方案:解决方案1:当作植物样本看待,选择Fas黄浦区土壤微生物土壤DNA提取联系方式