HEPES缓冲体系的应用
2022年4月15日,施维雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺****药物易安达(通用名:盐酸伊立替康脂质体注射液)获得中国国家药品监督管理局(NMPA)正式批准上市。
伊立替康**早上市的制剂是盐酸伊立替康注射液,在实际使用的过程中,该剂型逐渐暴露出一个问题:伊立替康的内酯环结构易水解,在pH>6条件下平衡快速向羧酸盐型方向转化。羧酸盐型的伊立替康药理活性低,毒性更强。生理条件(pH 7.4)下,由于血清蛋白优先与羧酸盐络合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的内酯型比例过低,达到平衡时,“低效高毒”的羧酸盐形式化合物所占比重高达90%。
q中包裹的伊立替康以有效的内酯型为主,这也意味着伊立替康脂质体内水相pH偏酸性(pH6左右)。而众多文献及Onivyde专利文件实施例均表明外水相pH在近中性时更有利于脂质的稳定,Onivyde专利文件的实施例表明外水相pH在7.25左右时脂质长期稳定性比较好。这需要伊立替康脂质体外水相和内水相存在pH差异,同时外水相偏碱性的缓冲对不能在长期储存中进入内水相升高内水相pH,否则内水相中的伊立替康将会转化为“低效高毒”的羧酸盐形式。四、不易穿过脂质膜的羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更适用于伊立替康脂质体
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与其他的缓冲体系相比,HEPES突出的优势有以下几点:
1. pKa 和 buffer 比较稳定,随温度的变化很小。
2. HEPES 的缓冲能力不会与受其他离子的影响,同时HEPES本身也不会对其他离子的功能造成影,HEPES拥有性质稳定性。
3. 细胞培养基中pH的稳定性主要依靠培养基中的碳酸氢盐和5%的CO2共同维持。当细胞处于开放环境时,二氧化碳的弥散会导致pH上升脱离生理pH范围。可是添加HEPES缓冲对的培养基则不存在这方面问题。
4. HEPES不干扰细胞内的生化反应因为它不易穿过生物膜,因此它更适用于伊立替康脂质体。 山东现货HEPES如何购买注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记实验室询价。

HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养,尤其在CO2培养箱外操作时(如显微镜观察),可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM,过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感,需避光保存。HEPES缓冲液能有效维持细胞外pH稳定,防止因CO2逸出导致的培养基碱化。在胚胎培养中,HEPES需严格过滤除菌,且浓度不超过15 mM,以避免影响囊胚发育。建议与**酸钠联用增强缓冲能力。HEPES还可用于原代细胞培养,其低离子强度特性减少了对细胞的机械损伤。
羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一种不能轻易穿过生物膜的缓冲。 它适用于伊立替康脂质体,因为它可以在稳定脂质体外水相酸碱度为弱碱性的情况下,不改变内水相酸性酸碱度。HEPES 的用量应该在10-25mM 之间,10mM以下的用量会导致缓冲能力较弱, 25mM以上可能对一些细胞造成不良反应。HEPES的使用以及操作应尽量在避光的情况下进行。这是因为在灯光下,HEPES会产生H2O2,而H2O2对活性的物体来说是有害的,这对培养的细胞会造成一定的伤害。
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缓冲溶液在生化反应、实验和生产过程中起着重要作用,能够稳定溶液的酸碱度。本文以磷酸盐缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液和HEPES缓冲溶液为例,介绍了它们的组成、缓冲原理以及在生物化学中的应用。HEPES缓冲溶液是一种常用的缓冲剂,具有对细胞无毒性、不易穿透生物膜、不参与细胞内生化过程等特点。因此,在生化实验中有广泛的应用。例如,它可用于开放式细胞培养、细胞的长期观察以及RNA或DNA提取试剂盒等实验中。由于其特殊性质,HEPES缓冲溶液是一种适合于在细胞实验中使用的缓冲剂。此外,相关研究表明,使用HEPES溶液作为缓冲液有助于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。这意味着HEPES缓冲溶液可以在纳米生物学研究中发挥重要作用。另外,关于HEPES缓冲溶液对镁生物降解的影响的研究表明,HEPES能够提高镁的生物降解性,并抑制镁不溶盐层的形成。这意味着HEPES缓冲溶液可以在镁合金相关研究中发挥重要的作用。总之,HEPES缓冲溶液在生化实验、纳米生物学研究和镁合金研究等方面有广泛的应用,由于其特殊的性质和优势,在科学研究和实验中扮演着重要角色。注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记。浙江高纯HEPES需求
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HEPES缓冲体系在生物化学和细胞生物学研究中扮演着至关重要的角色。以下是对HEPES缓冲体系的详细介绍:在细胞培养中的应用维持pH稳定:在细胞培养中,HEPES能够维持培养液的pH稳定,为细胞提供一个适宜的生长环境。这对于细胞的生长、繁殖和代谢过程至关重要。减少乳酸积累:在某些培养基中,如RPMI-1640,HEPES有助于减缓细胞代谢产生的大量乳酸,从而避免培养液pH下降,抑制细胞生长。适用于无CO2环境:在需要避免CO2干扰的实验中,如细胞观察、转染等,HEPES能够确保细胞在一个稳定的酸碱环境中生长。海南高纯度HEPES如何购买