自动细胞计数仪的使用方法1. 实验前准备仪器检查:开机预热(部分仪器需 10-15 分钟),检查镜头是否清洁,软件是否正常启动。试剂与耗材:准备台盼蓝染液(0.4%,过滤除菌)、无菌 PBS 或培养基(用于稀释细胞)、计数板(一次性或可重复使用,重复使用需用 75% 酒精清洁并晾干)。细胞悬液制备:将培养的细胞消化、吹打均匀,避免细胞成团(若有团块,需过筛或重新吹打)。2. 样本处理与上样稀释细胞:若细胞浓度过高(超过仪器计数范围,通常 1×10⁴-1×10⁷个 /mL),用培养基或 PBS 稀释至合适浓度(例如,取 100μL 细胞悬液 + 100μL 稀释液,稀释倍数为 2)。染色:按 1:1 比例混合细胞悬液与台盼蓝染液(如 50μL 细胞悬液 + 50μL 台盼蓝),轻轻混匀,室温静置 30 秒 - 1 分钟(避免染色过久影响细胞活性)。上样:用移液器取 10-20μL 混合液,缓慢滴加到计数板的进样口,使液体自然充满计数池(勿溢出),放置 1-2 分钟让细胞沉降。结合荧光染料(如台盼蓝、AO/PI、Calcein-AM/PI)区分活细胞与死细胞。高校荧光细胞计数仪型号

维护和耗材成本:不同仪器维护要求和耗材成本差异较大。一些仪器需定期校准和维护,要考虑其维护难度和费用。同时,耗材如计数板、染色试剂等的价格和消耗频率也需关注,长期使用下,这些成本不可忽视。技术支持和服务:选择具有良好市场口碑和完善售后服务的品牌和供应商。当仪器出现故障或使用过程中遇到问题时,能及时获得专业技术支持,确保仪器正常运行,减少对实验的影响。预算和性价比:根据实验室预算选择仪器,并非价格越高越好,应综合考虑性能、功能和成本,权衡不同仪器的性价比,选择能满足实验需求且价格合理的产品。实验室空间:若实验室空间有限,应选择体积小巧、便携性强的仪器,如手持式细胞计数仪或一些小型台式仪器,避免因仪器体积过大占用过多空间,影响实验室操作和布局。灌流系统细胞计数仪经销商电阻抗法:当细胞通过一个小孔时,会引起小孔内电阻的变化,产生一个电脉冲信号。

关注仪器性能准确性:可查看厂家提供的性能指标,或参考用户评价,还可通过与手工计数结果对比,或借助标准品验证。也可要求厂家提供复杂样本的计数演示,观察其对细胞的识别是否准确。重复性:了解仪器的变异系数(CV)值,一般要求 CV<5%,CV 值越小,重复性越好。速度:关注单样本计数时间和整体检测通量,选择计数速度快、能在短时间内处理多个样本的仪器,以提高实验效率。计数范围:若实验中细胞浓度波动大,需选择计数范围宽的仪器,确保在不同浓度下都能准确计数。
若仪器支持活 / 死细胞区分(如台盼蓝染色),需验证其对死细胞的识别能力。操作步骤:制备 “已知活率” 的细胞悬液:取活细胞悬液,分为两组:一组直接用台盼蓝染色(活率≈100%);另一组通过加热(如 56℃处理 10 分钟)或冻融杀死部分细胞,制备 “低活率样本”(如活率 30%-50%)。用自动计数仪计数活 / 死细胞比例,同时用手工计数(显微镜下观察染况)对比。若自动计数的活率与手工计数偏差 <10%,说明染色识别功能可靠;若死细胞被误判为活细胞(或反之),需检查染色时间(是否过短 / 过长)或仪器的 “细胞大小阈值”(是否误将碎片当作死细胞)。利用图像分析技术,对视野中的细胞进行识别和计数。这种方法适用于细胞形态较为规则易于与背景区分的情况。

手工计数(血细胞计数板法)是传统的细胞计数基准,可直接验证自动计数仪的准确性。操作步骤:取同一份细胞悬液,按自动计数仪标准流程计数(重复 3 次,取平均值)。同时用血细胞计数板手工计数:取 10μL 细胞悬液(或染色后的混合液)滴加至计数板计数室,显微镜下计数 4 个角 + 中心共 5 个大方格的细胞数。计算浓度:浓度(个 /mL)=(5 个方格总细胞数 ÷5)×10⁴× 稀释倍数。比较两种方法的结果:若偏差在10%-15% 以内,说明自动计数仪准确性可接受;若偏差过大(如 > 20%),需排查自动计数仪的参数设置(如细胞大小阈值、是否排除团块)或手工计数是否有误(如漏数、计数区域错误)。在生物制药生产中,从细胞培养、筛选到产品的纯化与检测,每一步都需要对细胞数量进行精确把控。灌流系统细胞计数仪市场报价
样本处理模块:包含样本进样口、流动池(微流控芯片)或计数室,确保细胞均匀分散。高校荧光细胞计数仪型号
细胞计数仪是生物学研究、医学检测及生物制药等领域中用于快速、准确计数细胞数量和分析细胞活性的仪器。它能替代传统的血细胞计数板(手动计数),显著提高计数效率和准确性,减少人为误差。自动细胞计数仪的工作原理(以常用光学成像型为例)样本制备:将细胞悬液与台盼蓝染液按比例混合(台盼蓝可穿透死细胞细胞膜使其着色,活细胞不着色)。上样:将混合液滴加到计数板的计数池中,确保无气泡,细胞均匀分布。成像与识别:仪器通过光学镜头拍摄计数池内的细胞图像,内置算法自动识别:活细胞(透明、形态完整)和死细胞(蓝色、形态可能破损)。排除杂质、细胞团(通过大小和形态筛选)。数据计算:自动统计细胞总数、活细胞数、死细胞数,并计算活细胞率(活细胞数 / 总细胞数 ×100%)、细胞浓度(个 /μL 或个 /mL)等参数。高校荧光细胞计数仪型号