芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
为了证明检测极低浓度的可能诊断价值使用数字ELISA检测血液中的蛋白质,对接受治理性前列腺切除术(RP)的患者血清样本中的PSA进行了测量。PSA是前列腺病的血清生物标志物病症既用作筛查工具,也用于监测住院患者的复发接受治理性前列腺切除术28。治理性前列腺切除术后,绝大多数PSA被消除,水平低于标准商用检测方法的检测限(3pM或0.1ng/mL)。定期监测这些患者的PSA恢复情况可以检测前列腺病的复发,但术后几年内生化复发可能不会被发现。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,理论可达飞克级;科研数字ELISA检测
芯弃疾JX-8B数字ELISA
产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
单分子酶检测到的比较低酶分子数假设蛋白质检测分析的更终灵敏度为背景信号可能由非特异性相互作用产生。为了评估内在敏感性,我们通过将400,000个带有生物素的珠子与不同浓度的酶缀合物链霉亲和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,创建了具有明确酶与珠子比例的珠子群体。为了方便起见,生物素化珠子是通过将生物素化DNA与功能化的珠子杂交提供的。互补DNA。[我们注意到,该实验不应被视为敏感的DNA检测;该检测的敏感性受到非特异性相互作用的限制,如补充图2所示,这些相互作用发生在酶缀合物和表面结合的DNA之间。 科研数字ELISA使用灵活芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,低成本单分子检测;
芯弃疾JX-8B数字ELISA具有超敏的优点:
检测方法为阵列成像。阵列成像涉及对阵列中的每个孔进行检测以确定是否存在微球并判断微球是否具有酶活性。为此,开发了一种图像分析软件,该软件首先创建一个阵列的“掩模”,以定义孔定位和边界进行检测。然后将孔掩模应用于阵列的荧光图像,以确定孔内微球和酶的存在。对于阵列的荧光图像,当进行多重检测时,会生成微球群体或微球亚群的荧光强度直方图。直方图中的峰值自动识别并用于确定微球群体。
芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;
单分子的检测原理:由Simoa数字免疫分析法实现的超灵敏度已在先前讨论过。简而言之,类似免疫分析中的酶-底物反应是在相对较大的反应体积(50-100µL)中进行的,在信号生成步骤中稀释了产物分子。信号分子的扩散和稀释将灵敏度限制在皮摩尔范围内。相比之下,Simoa通过将单独标记的免疫复合物和底物限制在飞升大小的孔中,从而限制了荧光产物分子从酶-底物反应中的扩散。当单一酶标签催化底物转化为荧光产物时,产生的荧光团被限制在孔中,从而在短时间内产生可测量的荧光信号。 芯弃疾单分子芯片依托单分散阵列化技术,实现飞克级高灵敏检测,可捕获数十万反应磁珠。
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。光纤束购自SchottNorthAmericaouthbri,非增强型光泽硅片购自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人,第7页盐酸、无水乙醇和分子生物学级别的吐温-20均购自西格玛-奥德里奇(圣路易斯,密苏里州)。2.7-μm-二羧基磁珠购自瓦里安公司(加利福尼亚州莱克福斯特)。单克隆抗人TNF-α捕获抗体、多克隆抗人TNF-α检测试剂和重组人TNF-α均购自R&DSystems(Minneapolis,MN)。单克隆抗PSA捕获抗体、单克隆抗PSA检测试剂和纯化的PSA购自BiosPacific(埃默里维尔,加利福尼亚州);使用标准方法将检测试剂抗体生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基磺基琥珀酰亚胺(NHS)和SuperBlock®T-20封闭缓冲液购自ThermoScientific(Rockford,IL)。纯化DNA购自综合DNA技术公司(Coralville,IA)。 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,少至可以进行8孔、4孔的灵活检测。微型数字ELISA检测平台开发
6)数字化高敏ELISA芯片试剂盒,10ul样本可同时测2-4个指标;科研数字ELISA检测
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
从TNF-α数字ELISA测定的检测限为~150aM(2.5fg/mL),相当于全血中的~600aM(10fg/mL);市场上可用的ELISA对TNF-α的比较高灵敏度在血清中的LOD为21fM(0.34pg/mL)(补充图3)。两种方法的目标蛋白零浓度尖峰均为为这些实验提供有用的阴性对照:25%的血清含有多种蛋白质的微摩尔浓度,在这些高蛋白质背景之上可以检测到非常低浓度的目标蛋白。我们还开发了一个证明用于显示低浓度核酸可以检测到的DNA的主要数字分析方法,而无需复制目标 科研数字ELISA检测