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使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞,加入去污剂,如sds等,除去膜脂。去除细胞内的蛋白质,包括与DNA结合的组蛋白,通过加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA,如实验不严密,可省略此步。沉淀DNA,需在冷乙醇或异丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结:DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法:基本同1法,*用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)五.表面活性剂快速制备法:用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和。
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华晨阳科技|2017年德国国际医疗设备展(MEDICA)开幕在即,华晨阳邀您一起交流和学习。
展会名称:2017年德国国际医疗设备展(MEDICA)
展会位置:Hall 16 F46-A
展会时间:2017年11月13-16日
展会地点:德国杜塞尔多夫展览馆
MEDICA & COMPAMED Exhibition 2017
Booth No.:Hall 16 F46-A
Date: 13th.—16th. Nov.,2017
Address: ?Dusseldorf Exhibition Center,Dusseldorf, Germany
德国杜塞尔多夫“国际医及医疗设备用品展览会”是世界**的综合性医疗展,被公认为世界上比较大的医及医疗设备展览会,以其不可替代的规模和影响力位居世界医疗贸易展的**。每年都有来自140多个国家和地区的5000多家公司参展,其中70%来自德国以外的国家,展出总面积达13万多平方米,吸引来自各国贸易观众约18万人次。拥有逾20个各自行业里世界***的展览品牌,其中MEDICA 2015为全球规模超大、超***的专业医疗展览会。面向医疗产业供应商的国际**的Compamed(第24届国际医疗制造业配件、零件及原材料展览会)将同期举办。
届时,华晨阳科技也带上大家十分期待的基因检测产品齐齐亮相,从单品到套装,华晨阳为你健康带来全新的守护方式。 广西泡沫植绒拭子生产产家
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