热迁移分析(Cellular Thermal Shift Assay, CETSA)是一种研究靶点与药物在细胞水平结合情况的技术。其原理是药物结合会改变靶蛋白的热稳定性。传统的CETSA依赖蛋白质印迹法检测,通量低。现在,通过与均相发光免疫检测(如Alpha)结合,开发出了均相CETSA(简称CETSA® HT)。该方法将细胞在不同温度下加热后裂解,使用针对目标蛋白的抗体对(偶联Alpha供体/受体珠)检测溶液中剩余的未聚集的天然蛋白量。通过比较药物处理组与对照组的蛋白热稳定性曲线偏移,即可高通量地确认化合物是否与细胞内靶点结合,并评估结合强度。专注体外诊断,均相化学发光冻干试剂,品质值得信赖!广西POCT产品均相发光应用领域

传统的化学发光免疫分析(CLIA)多为异相,需要固相包被和洗涤。均相化学发光免疫分析则通过精巧设计免除了这些步骤。一种常见策略是使用空间位阻或能量转移淬灭。例如,将化学发光标记物(如吖啶酯)标记在一种抗体上,将淬灭剂或另一种能淬灭其活性的物质标记在竞争抗原或另一种抗体上。在未结合状态下,两者靠近,化学发光被淬灭或无法有效触发。当样本中的目标抗原与体系竞争结合,解除了这种淬灭效应,化学发光信号得以恢复。另一种策略是利用酶片段互补:将化学发光酶(如荧光素酶)分割成无活性的两个片段,分别标记在相互作用的分子对上,结合后酶活性恢复,催化底物发光。这些设计实现了在复杂样本中直接进行免疫定量。北京诊断试剂均相发光免疫诊断试剂浦光均相发光检测试剂盒,操作简便,快速获得可靠结果!

研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸等生物分子间的相互作用,对于理解生命过程至关重要。均相化学发光技术,特别是Alpha技术,为PPI研究提供了强大的定量平台。通过将相互作用的双方分别与供体珠和受体珠偶联,可以直接在溶液生理条件下测量结合信号。该方法不仅可以验证互作,还能通过竞争实验测定小分子抑制剂的IC50,或通过滴定实验估算结合常数(KD)。相较于传统的表面等离子共振(SPR)或等温滴定量热法(ITC),均相化学发光方法通量更高,样品消耗更少,更适合于大规模筛选和初步的相互作用表征。
高通量均相发光筛选可产生海量数据。人工智能(AI)和机器学习(ML)算法可以深入挖掘这些数据中的隐藏模式。例如,在药物筛选中,AI可以分析不同化合物结构与其在多种均相检测(针对不同靶点或毒性指标)中活性谱的关联,预测化合物的作用机制或潜在毒性。AI还可以用于优化检测条件,识别和排除实验中的异常值或干扰因素,提高数据质量和筛选结果的可靠性。随着AI技术的发展,其在均相发光数据解析和决策支持中的作用将愈发关键。均相化学发光与荧光免疫技术相比,优势在哪?

除了基于荧光的能量转移,均相检测也可利用化学发光能量转移(CRET)。在CRET中,供体是化学发光反应(如鲁米诺-过氧化物酶反应)产生的激发态分子,其发出的光能直接激发邻近的荧光受体发出更长波长的光。通过设计使受体标记在结合事件的另一方,即可实现均相检测。电化学发光(ECL)也可用于均相模式。例如,将三联吡啶钌标记在一方,另一方标记上能够在其电极氧化还原循环中起共反应物作用的物质(如三丙胺)。当两者因生物识别事件靠近时,电化学触发的高效ECL反应得以发生,产生强信号。这些方法进一步拓展了均相发光的技术边界,提供了更多样化的信号输出选择。均相化学发光的反应机制是怎样的,有哪些关键步骤?北京浦光生物均相发光优点
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均相化学发光技术因其超高的通量、灵敏度和易于自动化的特性,已成为现代药物发现高通量筛选(HTS)的支柱技术。在靶点导向的筛选中,它广泛应用于:激酶/磷酸酶抑制剂筛选(通过检测磷酸化底物的量)、GPCR功能分析(检测cAMP、IP3或β-arrestin招募)、核受体转录活性筛选(报告基因检测)、蛋白-蛋白相互作用抑制剂筛选(如使用Alpha技术)、以及酶活性分析(蛋白酶、去乙酰化酶等)。其“混合-读数”的模式允许在1536孔甚至更高密度板中进行超大规模化合物库(数十万至上百万)的筛选,每天可产生海量数据,极大加速了先导化合物的发现进程。广西POCT产品均相发光应用领域
在重症炎症(如脓毒症)、CAR-T诊疗或某些自身免疫病中,细胞因子风暴是危及生命的状态,需要快速监测多种炎症因子。基于微球阵列的均相化学发光多重检测技术,能够从单份微量血清或血浆样本中,同时定量检测IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等十几种关键细胞因子的浓度。这种高通量、多参数的分析能力,使得临床医生或研究人员能够多方面、快速地掌握患者的炎症风暴谱系,评估严重程度,并监测诊疗干预(如抗细胞因子抗体)的效果,为精细免疫调控提供依据。均相化学发光与电化学发光相比,有什么不同?山东CRET技术均相发光生产厂家传统的化学发光免疫分析(CLIA)多为异相,需要固相包被和洗涤。均相化学发光免疫分...