可能导致原本能分开的峰变得分不开，纯化效果大打折扣；气泡还可能导致“鬼峰”出现，干扰目标峰的判断。3、保留时间漂移现象：同一样品在连续进样时，出峰时间（保留时间）无法重复，前后飘移。元凶：气泡占据了泵的一部分体积，导致实际输送的流动相体积不准确、不恒定。流速可能因为气泡量的不同而存在微小差异。后果：方法重现性极差，给方法开发、验证以及纯化收集带来困扰。4、仪器部件受损气泡对液相色谱仪的关键部件来说杀伤力很大：泵：气泡进入泵体后，会造成“空化”现象，磨损泵的密封件、单向阀和柱塞杆，导致泵的输液精度下降、漏液，严重时需要更换泵体部件；色谱柱：气泡在柱内形成“气塞”，会破坏固定相的均匀床层结构，导致柱效下降、寿命缩短；检测器：气泡通过流通池时，会产生光散射或折射，不仅干扰检测信号，还可能磨损流通池的窗口，影响检测器灵敏度。三、常用脱气方法1、超声脱气（常用，适合实验室小体积）：将配制好的流动相瓶放入超声波清洗器中，超声处理20-30分钟。此法对有机相（如甲醇、乙腈）效果较好，但脱气后需尽快使用（1-2小时内），否则空气会重新溶解；2、在线脱气（省心，适合连续制备实验）：通过仪器配套的在线脱气机。 万立智能制备液相软件，集成方法开发、运行监控与数据管理功能，实现纯化过程的数字化与可追溯。南通国产制备液相色谱生产厂家
上周，我们后台有收到小伙伴私信问：做制备液相实验时，流动相使用前为什么要脱气?“流动相使用前先脱气”是老师反复强调、标准操作规程里明确标注的步骤，但很多人对其背后的原理和重要性可能一知半解，甚至想偷懒。所以，本周小编决定来和大家唠一唠！一、流动相里藏着“隐形气泡”？我们常用的流动相（比如甲醇、水、乙腈等体系，或含缓冲盐的溶液），即便看起来澄清透明，其实都溶解了一定量的空气，会在你的色谱系统中引发一系列棘手的问题，直接影响分析的准确性、稳定性和仪器寿命。二、偷懒=隐患，不可取想过偷懒的小伙伴这一趴是重点：1、压力不稳+基线噪音现象：色谱基线剧烈漂移、出现毛刺或假峰，泵的输出压力忽高忽低。元凶：流动相中的气泡在高压泵工作时，会被压缩和释放，产生脉冲，导致流速不稳定。这些气泡流经检测器时，会引起剧烈波动，产生噪音。后果：严重影响数据的准确性，特别是在检测低浓度样品时，信号可能被完全淹没在噪音中，白忙活一场。2、峰形畸变+分离失效现象：目标峰拖尾、展宽、分叉，甚至出现“肩峰”。元凶：微小的气泡进入色谱柱后，相当于“堵塞”了部分固定相通道，导致流动相流速不均、传质效率下降。后果：色谱柱的分离效率下降。 江苏液相色谱生产实验纯化遇瓶颈？万立制备液相来突破。
让溶剂峰与早出峰先洗脱，减少梯度变化对早期峰的干扰。3.快速筛查场景：“陡斜率+短柱”，兼顾速度与基础分离快速筛查（如样品定性、批量样品初筛）的重心是“缩短分析时间”，优化策略：用短柱（如×50mm，μm颗粒）+高流速（）；梯度斜率提升至3%-8%/min，梯度范围压缩至10%-90%（如甲醇-水体系），分析周期控制在5-10分钟；注意：需验证关键组分的分离度（R≥即可，无需严格），避免因过快导致漏检。四、梯度优化常见问题与规避技巧问题1：梯度运行中基线漂移严重原因：溶剂纯度不足（如HPLC级乙腈含杂质）、梯度斜率过陡、缓冲盐浓度过高；规避：使用梯度级溶剂、降低梯度斜率（尤其是在低有机相区间）、缓冲盐浓度控制在50mmol/L以下，同时在梯度程序前运行“空白梯度”（不进样走梯度），验证基线稳定性。问题2：保留时间重现性差（RSD>2%）原因：平衡时间不足、柱温波动（梯度洗脱中柱温变化会加剧保留时间漂移）、流动相混合不均匀；规避：平衡时间≥10倍CV、开启柱温箱（控制±℃）、使用带在线混合器的仪器，流动相配制后超声脱气（避免气泡影响混合比例）。问题3：峰形展宽（拖尾/前伸）原因：梯度斜率过缓（晚出峰展宽）、初始有机相比例过低。
当前市场正从传统设备向智能化、自动化升级，带有AI算法、在线监测功能的系统成为主流。传统仪器方法开发依赖经验试错，往往耗时2天以上，而万立仪器将AI技术与色谱分离深度融合，输入样品参数后3分钟即可生成较好方案，还能通过机器学习动态调整程序。设备搭载的物联网模块可实时上传数据，云端平台实现故障预警与性能预测，维护响应速度提升50%。某高校实验室使用该功能开发多酚分离方法，实验时间从48小时缩短至15分钟，结合智能峰解析功能自动识别重叠峰，分析效率实现质的飞跃，带动行业技术升级方向。万立仪器将继续以创新为驱动，迭代升级，携手全球用户，共同探索科学发现的无限可能。
冲洗10倍柱体积。2、起始流动相平衡冲洗后用起始流动相平衡柱体，使固定相与流动相达到分配平衡，若流动相含缓冲盐，先以5%有机相-水相冲洗10倍柱体积，再切换至目标比例，避免盐在柱内析出。为了更直观地展示以上流程，我们特别录制了一段在万立制备液相色谱系统上的实操视频片段，具体操作可参考视频演示哦！您的浏览器不支持video标签。三、试用结束后的保存实验完成后，必须对色谱柱进行正确冲洗和保存，以备下次使用。还是以反相色谱柱为例：1、采用甲醇：水或者乙腈：水（8：2），让这个比例的有机溶剂填满色谱柱。2、将色谱柱两端用堵头密封好，并贴上标签，注明保存介质和日期，置于干燥处存放。小贴士：保存教学我们也有具体操作视频哦！您的浏览器不支持video标签。结语：正确试用色谱柱，是保证制备纯化结果可靠性、延长色谱柱使用寿命的关键第一步。遵循“准备-平衡-测试-保存”的科学流程，并采用像万立仪器这样稳定可靠的设备和直观的软件，让每一次制备实验都更加高效和安心。希望本篇内容对您有所帮助！如有任何疑问，欢迎在评论区留言讨论。声明：部分内容来源于网络、《液相色谱实战宝典》，本篇文章只是用于科普，不作任何商业用途。 万立提供多方面应用支持与联合开发服务，其专业团队深入用户具体项目，提供定制化的解决方案与技术保障。江苏万立仪器液相色谱厂家直供
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