全自动细胞计数仪的优势在于将经典的台盼蓝染色排除法与现代数字成像技术相结合,实现了细胞分析的快速化与标准化。传统手动计数依赖实验员在显微镜下观察和人工计数,不仅耗时(通常需要数分钟至十几分钟一个样本),而且容易因疲劳、视野选择等人为因素引入误差。而全自动系统需加入20μL细胞悬液,仪器便可自动完成上样、对焦、多视野图像捕捉与分析的全过程,在20秒内输出总细胞浓度、活细胞浓度、细胞存活率以及细胞平均直径、圆度等形态学参数。其背后的智能图像识别算法能够准确区分被台盼蓝染色的死细胞与未着色的活细胞,并进行精确计数。这种高效率和高通量(单个计数板可检测5个样品)使其特别适用于需要频繁监测细胞状态的培养工艺开发、细胞库检定或生产过程中的质控环节,将实验人员从重复性劳动中解放出来,并确保了数据结果的客观性与一致性。荧光计数仪结合 CD3/CD8 荧光抗体,确保回输细胞数量(如 1×10⁶ cells/kg)与功能活性。高校高通量细胞计数仪经销商

在细胞和基因领域,对细胞产品“健康”状态的评估远超简单的“活”与“死”的二元划分。早期凋亡细胞虽然膜完整性尚未完全丧失(台盼蓝无法染色),但已进入程序性死亡路径,若被注入患者体内可能引发炎症或无效。因此,精细区分活细胞、坏死细胞和凋亡细胞至关重要。高速自动化细胞计数系统搭载的双荧光染色技术(通常使用吖啶橙AO和碘化丙啶PI)为此提供了强大工具。AO能穿透所有细胞的细胞膜,与DNA和RNA结合发出绿色荧光;而PI只能穿透膜受损的坏死细胞,与DNA结合发出红色荧光。通过荧光显微镜和特定滤光片,仪器可以清晰识别并定量三类细胞:活细胞(AO着色,绿色)、早期/晚期凋亡细胞(AO着色,膜通透性改变,可能呈现橙红色)以及坏死细胞(AO和PI双着色,红色)。这种精细的细胞亚群分析能力,使得在细胞产品生产的多个环节——从起始物料评估、生产过程监控到终制剂放行——都能实施更严格、更科学的质量控制,从而提升终产品的安全性与有效性预期。荧光细胞计数仪可用于细胞生长增殖、细胞器的结构和功能分析、细胞周期和细胞凋亡等研究。

手工计数(血细胞计数板法)是传统的细胞计数基准,可直接验证自动计数仪的准确性。操作步骤:取同一份细胞悬液,按自动计数仪标准流程计数(重复 3 次,取平均值)。同时用血细胞计数板手工计数:取 10μL 细胞悬液(或染色后的混合液)滴加至计数板计数室,显微镜下计数 4 个角 + 中心共 5 个大方格的细胞数。计算浓度:浓度(个 /mL)=(5 个方格总细胞数 ÷5)×10⁴× 稀释倍数。比较两种方法的结果:若偏差在10%-15% 以内,说明自动计数仪准确性可接受;若偏差过大(如 > 20%),需排查自动计数仪的参数设置(如细胞大小阈值、是否排除团块)或手工计数是否有误(如漏数、计数区域错误)。
若仪器支持活 / 死细胞区分(如台盼蓝染色),需验证其对死细胞的识别能力。操作步骤:制备 “已知活率” 的细胞悬液:取活细胞悬液,分为两组:一组直接用台盼蓝染色(活率≈100%);另一组通过加热(如 56℃处理 10 分钟)或冻融杀死部分细胞,制备 “低活率样本”(如活率 30%-50%)。用自动计数仪计数活 / 死细胞比例,同时用手工计数(显微镜下观察染况)对比。若自动计数的活率与手工计数偏差 <10%,说明染色识别功能可靠;若死细胞被误判为活细胞(或反之),需检查染色时间(是否过短 / 过长)或仪器的 “细胞大小阈值”(是否误将碎片当作死细胞)。酸奶中乳酸菌(如保加利亚乳杆菌)的活菌计数(需≥1×10⁶ CFU/mL),确保产品功效。

工作原理:通常基于图像分析技术,通过光学系统对细胞悬液样本进行拍照,然后利用机器学习或人工智能算法对图像中的细胞进行识别和计数。部分仪器还可结合荧光染色技术,对特定标记的细胞进行检测和分析。特点:准确性高:采用先进的算法和光学系统,能精确识别细胞,减少人为计数误差,如赛默飞 Countess 3 自动细胞计数仪利用机器学习算法,可准确计数成团细胞并忽略碎片。自动化程度高:具备自动聚焦、自动调节光强度、自动上样等功能,只需将样品准备好放入仪器,即可快速得出计数结果,无需繁琐的手动操作。速度快:可在短时间内完成细胞计数,如 CCEasy 全自动高通量细胞计数分析仪能在 1 分钟内完成单个样品的制备及检测。功能多样:除了基本的细胞计数,还能进行活细胞与死细胞区分、细胞活力分析、细胞大小测量、细胞形态分析等,部分仪器支持多通道荧光检测,满足不同实验需求。数据管理方便:可自动保存数据,并支持多种格式输出,还能通过网络将数据传输到电脑或云端,便于数据的存储、分析和共享。样本处理模块:包含样本进样口、流动池(微流控芯片)或计数室,确保细胞均匀分散。无锡细胞分析仪细胞计数仪电话
对于贴壁细胞,需使用胰蛋白酶等消化液将细胞从培养瓶壁上消化下来,然后加入适量的培养基制成细胞悬液。高校高通量细胞计数仪经销商
细胞计数仪的图像识别技术可区分活死细胞,如CountstarMiraFL能快速准确计算转染效率:细胞计数仪的图像识别技术为细胞研究提供了更加精细的分析手段。通过图像识别技术,细胞计数仪可以清晰地分辨出活细胞和死细胞。以CountstarMiraFL细胞荧光分析仪为例,它配备了强大的软件,能够对荧光图像进行自动识别和分析。在细胞转染实验中,科研人员需要了解转染效率,即成功转入目的基因的细胞比例。CountstarMiraFL可以根据实验需要选择不同的荧光通道和滤镜,确定比较好的检测条件,然后通过图像识别技术快速准确地计算出GFP/RFP转染效率,并生成相应的统计数据和图表。这为细胞转染实验的研究提供了重要的数据支持。高校高通量细胞计数仪经销商