上周，我们后台有收到小伙伴私信问：做制备液相实验时，流动相使用前为什么要脱气?“流动相使用前先脱气”是老师反复强调、标准操作规程里明确标注的步骤，但很多人对其背后的原理和重要性可能一知半解，甚至想偷懒。所以，本周小编决定来和大家唠一唠！一、流动相里藏着“隐形气泡”？我们常用的流动相（比如甲醇、水、乙腈等体系，或含缓冲盐的溶液），即便看起来澄清透明，其实都溶解了一定量的空气，会在你的色谱系统中引发一系列棘手的问题，直接影响分析的准确性、稳定性和仪器寿命。二、偷懒=隐患，不可取想过偷懒的小伙伴这一趴是重点：1、压力不稳+基线噪音现象：色谱基线剧烈漂移、出现毛刺或假峰，泵的输出压力忽高忽低。元凶：流动相中的气泡在高压泵工作时，会被压缩和释放，产生脉冲，导致流速不稳定。这些气泡流经检测器时，会引起剧烈波动，产生噪音。后果：严重影响数据的准确性，特别是在检测低浓度样品时，信号可能被完全淹没在噪音中，白忙活一场。2、峰形畸变+分离失效现象：目标峰拖尾、展宽、分叉，甚至出现“肩峰”。元凶：微小的气泡进入色谱柱后，相当于“堵塞”了部分固定相通道，导致流动相流速不均、传质效率下降。后果：色谱柱的分离效率下降。 一次投资，长期回报，有效提升科研产出效率。江苏快速制备液相色谱仪厂家
不同领域、不同规模的用户对制备液相色谱仪的需求存在差异：科研实验室需要小批量、多批次的样品处理能力，生产企业则需要连续化、大体积的纯化方案。快速制备液相色谱仪通过模块化设计，可灵活搭配不同规格的进样器、收集器与色谱柱，满足多样化场景需求。例如，科研实验室可选择微量进样器与自动馏分收集器，实现小体积样品的高效分离与准确收集；生产企业可配备大体积进样系统与连续流收集装置，满足每小时数升样品的连续纯化需求。自动化液相色谱仪销售主要部件自主研发，配合本土化快速响应服务，保障实验进程。
注意：终梯度维持时间不宜过长（如超过10分钟），否则会延长分析周期，且高比例有机相可能对某些色谱柱（如亲水作用柱）造成损伤。4.平衡时间：解决“基线漂移”与“保留时间重现性”平衡时间是指梯度运行结束后，用初始流动相冲洗色谱柱的时间，目的是让柱内流动相组成恢复至初始状态，避免“前一次梯度残留影响下一次分析”，导致保留时间漂移、基线不平。优化技巧：基础平衡时间：≥10倍柱体积（CV）柱体积（CV）=πr²L（r为柱半径，L为柱长，单位均为cm），例如×150mm的色谱柱，CV≈；若流速为1mL/min，10倍CV即25mL，对应平衡时间≥25分钟。▶误区：只平衡5-10分钟，柱内流动相未完全恢复，易导致下一次进样的保留时间偏差（如±）。特殊情况调整：用缓冲盐流动相（如磷酸盐、醋酸盐）：平衡时间需延长至15-20倍CV，因为缓冲盐与有机相混合后，在柱内的平衡速度更慢；梯度范围宽（如5%-95%乙腈）：平衡时间延长20%-30%，避免高比例有机相在柱内残留；快速分析（如用×50mm短柱）：可适当缩短至8-10倍CV，但需通过连续进样验证保留时间重现性（RSD≤1%）。三、不同实战场景的梯度优化策略针对常见的分析需求（如杂质检测、复杂样品分离、快速筛查）。
万立仪器：科技主导，创新驱动万立（南通）仪器科技有限公司，自成立以来，便以成为一家出色的科技型公司为目标。公司位于江苏南通市海门生物医药科技园，这里汇聚了众多生物医药领域的创新企业，为万立仪器的发展提供了得天独厚的环境。万立仪器深知，在科技日新月异的现在，唯有不断创新，才能立于不败之地。因此，公司投入大量资源用于研发，致力于为生命科学行业提供更加先进、更加实用的分析仪器和系统。除了快速制备液相色谱仪外，公司还推出了Flash快速制备液相色谱系统、中低压快速制备色谱仪、自动进样快速制备液相色谱等一系列中高层次的实验室仪器，满足了不同科研场景的需求。全流程解决方案：提升科研效率，助力科研创新万立仪器不仅提供高质量的产品，更致力于为客户提供全流程解决方案。从仪器的选型、安装、调试，到后期的维护、升级，万立仪器都提供一站式服务。这种全流程的解决方案，不仅确保了仪器的稳定运行，更提升了科研效率。以快速制备液相色谱仪为例，万立仪器不仅提供操作便捷的仪器本身，还为用户提供详细的操作指南、实验方案及数据分析软件。用户在使用过程中遇到任何问题，都能得到及时、专业的解答。这种多方位的支持。 万立制备液相，中高压稳流，复杂样品分离一步到位。
特种化学品纯化等3、问：制备液相色谱系统主要由哪些部件构成？高压输液泵：提供稳定、高流量的流动相（通常流量范围在10mL/min到1000mL/min甚至更高）。进样系统：将较大体积的样品溶液引入色谱柱（常用六通阀配合定量环或自动进样器）。制备色谱柱：主要分离部件，内径大、填料量多（固定相类型多样，如反相C18、正相硅胶等）。检测器：常用紫外-可见（UV-Vis）检测器，用于在线监测流出液，根据目标物吸收峰触发馏分收集。馏分收集器：根据检测器信号或时间程序，自动将含有目标组分的流出液收集到指定的试管或容器中。这是制备型区别于分析型的关键部件。控制系统/软件：控制整个分离纯化过程（泵流速、梯度程序、检测波长、收集触发条件等），并记录色谱图。辅助单元：在线脱气机、溶剂瓶、废液容器等。4、问：制备液相色谱的分离纯化策略主要有哪些？常用纯化策略：等度洗脱、梯度洗脱其他方法：循环色谱、中心切割等5、问：制备液相色谱的关键操作参数有哪些？样品载量：直接影响单次运行能处理的样品量和产物量。需在柱容量范围内优化，平衡收率、纯度和分离度。流动相流速：影响分离速度、柱压和分离度。制备中常使用较高流速以提高效率（但需在系统耐受压力内）。万立仪器制备液相色谱仪，专为复杂样品纯化而设计。南通如何选液相色谱排行
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二、样品过载：纯度与回收率的“双重打击”错误表现：色谱峰严重展宽、拖尾，甚至相邻峰重叠无法分离，收集的目标组分纯度大幅下降；部分样品因超载在柱头结晶，反而导致回收率降低。常见原因：1、进样量过大：超过色谱柱的负载能力（通常制备柱的较大进样量与柱体积、样品浓度正相关，如10mm内径柱单次进样不宜超过1mL浓溶液）。2、样品浓度过高：高浓度样品在流动相中溶解度不足，进样后在柱头析出，影响分离效率。3、梯度洗脱不当：梯度变化过快，导致样品在柱内保留过强，累积形成过载。解决方案：l紧急处理：停止进样，用初始流动相冲洗色谱柱30分钟，去除柱头残留样品；若峰形已严重畸变，需重新优化分离条件。l预防措施：1、逐步摸索进样量：从低浓度、小体积开始测试，观察峰形变化，以峰对称因子>、相邻峰分离度>为标准；2、稀释样品浓度：确保样品在流动相中完全溶解，必要时加入少量助溶剂（如DMSO），但需注意与色谱柱兼容性；3、优化梯度程序：采用缓梯度洗脱（如有机相比例每分钟升高1%-2%），延长样品在柱内的分离时间，减少过载风险。总结：实验成功的重要原则制备液相实验的关键在于“预防为先”：样品前处理做到“无杂质、全溶解”。江苏快速制备液相色谱仪厂家
