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八方同创提醒猪场实验室，核酸检测规范流程如下：（1）、确认样品有效性，样品外包装消毒，对接检测完成时间。（2）、根据样本类型选择样品预处理方式。（3）、混样检测需先提后混。（4）、净区配制，单独于其它区；试剂配置前手动颠倒混匀后简短离心。（5）、防止交叉污染，运行前确认PCR管盖盖紧，PCR体系内无气泡。（6）、及时沟通汇报检测结果，记录和汇总。（7）、垃圾清理；设备，实验台面，地面，板架，样品消毒；紫外照射30min，通风。八方同创提醒猪场PCR实验室原则上分为4个单独的区域，收样区，试剂准备区，核酸提取区、扩增区。虾十足目虹彩病毒诊断试剂参考价格

八方同创提醒猪场实验室，猪场实验室也会偶发失控事宜，失控的识别方法如下：1、每次检测过程中至少放置1个阴性样品于待检样本中参与提取全过程，看阴性样本有无CT值。2、根据检测频率定期对实验室内空气进行采样监测，监测范围应包括样本处理区、核酸提取间和扩增间，看环境监测是否为阳性。3、定期对实验室台面、门把手、仪器设备等表面进行取样监测，看是否出现CT值。4、观察每一批上机完成的样品中，阴性对照是否出现CT值，看运行曲线是否正常。猫杯状病毒PCR诊断试剂检测八方同创推出的迷你PCR仪适用于猪场内部网格化管理，不同单元车间使用。

八方同创提醒猪场实验室，移液器是常用的工具，需要时常做好维护和校准工作；1.1移液器的维护每天对使用过的移液器用75%酒精进行擦拭。每月1次对移液器吸头处进行75%酒精浸泡15分钟左右，若使用过程中发生污染应及时将移液器下半部分拆卸开及时浸泡处理，之后可用灭菌袋/锡纸或牛皮纸等包装灭菌：121℃，0.1MPa，20分钟（只有可灭菌移液器可使用高压灭菌方法）。在室温完全晾干后活塞上油后组装。1.2移液器的校准为确保移液器加样的精确性和准确性，正确使用移液器，需定期（一年）对移液器进行校准。校准可以由法定计量局，第三方校准公司或厂家完成。

实时逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）技术凭借其高灵敏度、高特异性及与高通量检测平台的良好兼容性，已成为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）检测的**方法（Gerber et al., 2013; Harmon et al., 2012; Shin et al., 2022）。通过构建已知浓度PRRSV核酸模板的标准曲线，该技术可实现病毒载量的***定量（即基因组拷贝数测定）（Gerber et al., 2013; Harmon et al., 2012; Shin et al., 2022）。通用筛查型PRRSV RT-PCR引物通常靶向病毒基因组高度保守区域，以覆盖遗传多样性***的各类分离株（Gerber et al., 2013; Harmon et al., 2012; Shin et al., 2022）。目前多种实时RT-PCR检测体系已被建立，例如八方同创研发的猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光PCR检测试剂盒可同步鉴别PRRSV-1与PRRSV-2，但不同商业化试剂盒的诊断效能仍存在差异（Gerber et al., 2013; Harmon et al., 2012; Shin et al., 2022）。针对特定疫苗株的检测方法亦有报道（Rawal et al., 2022, 2023; Yang et al., 2017），但临床应用尚有限。八方同创建议：检测时应结合样本类型与目的，选用经验证的检测体系，并规范操作流程以保障结果可靠性。 八方同创推出的非洲猪瘟冻干微球试剂盒适用于适用于小规模场非专业实验室环境、非专业人员条件下的检测。

八方同创提醒猪场实验室，猪场实验室也会偶发失控事宜，失控的处理方法如下：1、对污染区域使用核酸气溶胶污染清除剂进行大面积处理，包括：地板、墙面、天花板、门、窗户等地方，同时加大通风量（内循环无用，尽可能外循环）；2、对污染区域内的设备使用核酸气溶胶污染清除剂或75%酒精棉进行反复处理；对超净台等含有空气过滤系统的设备，请更换过滤网；对移液器等污染设备采用核酸气溶胶污染清除剂或75%酒精棉进行擦拭清洗，高温灭菌；3、待污染区域及设备器件清理完成后，使用紫外灯辐照4小时以上；4、设计实验对照组进行阴阳对照实验，根据阴性对照确认污染情况，可采用8连排PCR管（2个阳参+6个阴参）；若阳参起跳，阴参起跳，则污染需要继续清理；若阳参起跳，阴参全部不起跳了，则说明污染等到控制，可恢复正常实验；或者每隔一天采样检测，直至实验室环境监测阴性，可恢复正常实验，重新提取样本核酸检测。八方同创提醒猪场检测中阴性质控品不成立，样品频繁出现假阳性，可能是实验室污染所致。猪圆环病毒2型PCR诊断试剂客服电话

八方同创赖志博士参加全球非洲猪瘟研究联盟（GARA）2025年科学会议。虾十足目虹彩病毒诊断试剂参考价格

八方同创提醒猪场，PCR扩增完成后读取和分析结果方法如下：1、反应结束后保存结果，仪器将对结果进行自动分析，给出CT值，注意查看结果的扩增曲线的性状，存在CT值的结果需呈S型曲线。2、根据说明书，查看阴阳对照是否符合质控标准，扩增曲线是否为标准的S型曲线，曲线异常或不满足质量控制的情况下样品检测结果无效。3、质控成立，按照试剂盒判定标准对结果进行阴性、阳性及可疑（可疑样品需复测，两次可疑判阳性）判定。4、对于可疑样本选用50ul的体系复测。5、注意结果是否有内标，内标CT值是否均匀一致，从而验证核酸是否存在抑制物。6、若无内标，则考虑：体系配置错误（未加内标）、仪器设置问题、样品中存在抑制剂、体系未混匀、分装误差等，需对样品进行复测。7、若阳性对照不出值，则考虑：仪器未设置孔位、体系配置错误、人员操作失误、试剂失效等原因。8、若阴性对照出值，则考虑：污染（产物污染、气溶胶污染、试剂污染）；人员操作不当等。立即停止实验排查原因并启动实验室消毒，排除污染后再做样品检测。9、填写检测结果统计表。虾十足目虹彩病毒诊断试剂参考价格

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