在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是***定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的***定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
MicroDrop™数字PCR平台是由永诺生物自主研发并已投入生产的微滴式数字PCR检测系统。南京数字PCR报价

相对于二代测序、基因芯片和定量PCR而言,数字PCR具备以下优势:
· 灵敏度可达到单个核酸分子:检测限低至0.001%,主要系为数字PCR可以实现靶标DNA/RNA的生物浓缩;
· 无需标准曲线活参照基因进行对比来测定核算量,可对靶分子起始量进行***定量,直接独处DNA分子的个数;
· 适合环境复杂样品的检测:终点PCR检测,不依赖Ct值,不依赖扩增效率,能克服PCR***剂的影响,避免样品间的交叉***问题,适合各类复杂环境中的样本进行***定量,如动血样、粪便、尿液、痰液、水样、土壤、植物等; 南京数字PCR报价样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定。

我国***拥有完全自主知识产权的微滴式数字PCR仪MiniDrop™研发成功并投入生产。MiniDrop™创新性采用高压驱动的方法将样本分割成50万份,打破了国外厂商在微滴式数字PCR领域的垄断。永诺生物依以微滴式数字PCR仪为**,打造了全自动液体处理工作站、核酸提取试剂盒等创新产品,致力于解决**、***领域的精细诊断这是国内***微滴式数字PCR检测系统,能广泛应用于医疗、农业、环境等领域,未来,采用外周血、唾液、尿液、脑脊液等样本进行低成本、高灵敏、快速的无创检测成为可能。
数字PCR可以直接计算目标序列的拷贝数,因此无需依赖于对照样品和标准曲线就可以进行精确的***定量检测;此外,由于数字PCR在进行结果判读时*判断有/无两种扩增状态,因此也不需要检测荧光信号与设定阈值线的交点,完全不依赖于Ct值的鉴定,因此数字PCR的反应受扩增效率的影响**降低,对PCR反应***物的耐受能力**提高;数字PCR实验中标准反应体系分配的过程可以极大程度上降低与目标序列有竞争性作用的背景序列浓度,因此数字PCR技术也特别适合在复杂背景中检测稀有突变。
**行业的10万个微滴数,保证泊松分布所需要的充分的样本量。

数字PCR的应用
检验检疫 食品安全
•转基因食品检测(国标)
•病原菌鉴定
•动物源性检测分析
科研
•基因表达差异监测
•CRISPR-Cas9基因编辑结果验证
•甲基化含量鉴定
•单细胞研究:测序、PCR
临床
•**液体活检:早筛、用药、监测、复发
•无创产前筛查:低成本、快速
•***性疾病:HBV、HIV定量
据悉,MiniDrop™**团队由微流控、光学、机电学、化学、临床医学、分子生物学等多学科交叉领域的**组成,依托精密仪器研发、生物纳米材料与分子生物学等平台,以微滴式数字PCR仪为**,打造了全自动液体处理工作站、核酸提取试剂盒等创新产品,致力于解决**、***领域的精细诊断。
准确度不完全依赖于扩增效率。深圳MicroDrop-100数字PCR正规代理
不依赖Ct值,无需标准曲线。南京数字PCR报价
与常规PCR方法相比,数字PCR有如下优势:
能够***定量:常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线,但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系,条件上会存在差异,另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可进行***定量。
样本需求量低:适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本
灵敏度高:数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个**PCR反应,这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。
高耐受性:由于目的序列被分配到多个**反应体系中,***降低了背景信号和***物对反应的干扰,扩增基质效应大大减小。 南京数字PCR报价
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与常规PCR方法相比,数字PCR有如下优势:1、能够***定量:常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线,但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系,条件上会存在差异,另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可进行***定量。2、样本需求量低:适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本。3、灵敏度高:数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个 PCR反应,这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多个 反应体系中,***降低了背景信号和***物对反应...