报告基因选用GFP或RFP，**小启动子来自斑马鱼gata2基因；将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中，受精卵长大后成为founder；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎，从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎，拍照记录后分类培养；F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP（或RFP）表达图式的Tol2插入位点，并通过与已知基因组数据比较，对插入位点进行定位与分析；通过外交纯化得到转基因鱼，直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。斑马鱼实验周期短，大部分实验能够在一周内完成。湖北斑马鱼实验方法
斑马鱼基因突变技术服务：包括插入诱变和ENU化学诱变技术。
斑马鱼转基因资源库和突变体资源库服务：包括研制、收集和分发各种斑马鱼转基因品系和突变体
信息服务：包括建立斑马鱼资源信息网络数据库和提供斑马鱼基因组生物信息学分析服务。
转基因斑马鱼的制备主要采用两种方法：通过Tol2转座子构建组织特异性表达报告基因的方法；利用特定基因的启动子/增强子驱动报告基因在特定细胞组织中表达的方法。
首先构建以Tol2转座子为基础的enhancertrap载体，
在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞
在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞 北京代做斑马鱼实验斑马鱼模型实验技术中心。
成功除了努力还需要借助科学的方法和先进的工具。斑马鱼模型的独特优势使其能够对现有的有体外实验和哺乳动物组成的传统药物研发模式，斑马鱼既可以作为体外实验和哺乳动物实验之间的桥梁，在早期淘汰大量成***不佳的候选化合物，减少哺乳动物实验阶段的时间和费用成本。
同时，一些靠现有方法很难解决的药效和安全性评价模型可以通过斑马鱼来解决，打破实验技术方面的瓶颈和束缚；另外，利用斑马鱼模型，我们可以在一些特定靶向药物的开发上采用新的研发模式，从斑马鱼筛选开始，将活性与安全性较好候选化合物筛选出来后，同时开展体外机制研究和哺乳动物体内实验，通过这种模式，可以大幅缩短早期研发周期、节省研发成本、提高药物发现的成功率。
环特生物拥有业内**的19项已授权斑马鱼发明专利技术和可持续研发能力，创建了130多项斑马鱼技术应用模型，应用“水中小白鼠”斑马鱼提供活性成分筛选、药物功效和安全性评价、食品、功能性食品和化妆品的功能及安全性评价等服务，并针对功能性食品、药品、化妆品、食品等众多行业提供可量化的产品评价服务与专业的技术解决方案。斑马鱼生物检测技术，面向全球多个国家和地区，在2016年杭州G20峰会食品安全检测、新药项目用于CFDA的临床试验申报等重大项目中得到特别应用。应用斑马鱼对临床前药物进行安全性与毒理性评价。
斑马鱼作为模式生物的特点与优势
2015年10月10日浏览量:8181次评论(0)来源:杭州环特发布者:杭州环特
斑马鱼与人类基因同源性高达85%，其信号传导通路与人类基本近似，生物结构和生理功能与哺乳动物高度相似，具有个体小（目前***适于进行微孔板高通量药物筛选的脊椎类动物）、发育周期短(24小时***便可形成）、实验周期短(筛选结果在一周内即可得出)、费用低（约为鼠类的1/10-1/100）、体外受精、透明（可直接观察药物对内部***的作用）、单次产卵数较高（150-200枚）以及实验用药量小（为小鼠用药量的1/100~1/1000）等优点，作为模式生物的优势很突出。目前，斑马鱼已经广泛应用于发育生物学研究、人类疾病模型研究、新药筛选、药物毒性与安全性评价以及环境毒理学研究等领域。美国国家卫生研究院（NIH）将斑马鱼列为继大鼠和小鼠之后的第三大脊椎类模式生物。 可作为脊椎动物模型来研究脊椎动物的胚胎发育过程。湖南斑马鱼实验文献
使用斑马鱼技术进行药物筛选研发。湖北斑马鱼实验方法
斑马鱼作为模式生物的起源和发展
1938年，美国布朗大学Roosen-Rung教授***报道斑马鱼发育形态学研究成果。
1950年代，美国罗格斯大学K.KennethHisaoka教授***报道斑马鱼毒理学研究成果。
1972年，美国俄勒冈大学GeorgeStreisinge教授开始斑马鱼发育生物学研究和模式动物建立工作。
1989年，美国俄勒冈大学MonteWesterfield教授出版斑马鱼研究圣经TheZebrafishBook***版。
1998年，较早斑马鱼模式生物数据库ZFIN成立。
1998年，全球***家斑马鱼药物研发服务外包公司成立。
2004年，斑马鱼国际资源中心（ZIRC）在俄勒冈大学成立。
2011年，斑马鱼模型和技术研究被列入中国科技部「重大新药创制」专项十二五实施计划。
2012年，中国国家斑马鱼资源中心成立。目前，斑马鱼已经成为继小鼠和大鼠之后的第三大脊椎类模式生物，在发育生物学、遗传学、基础医学、药理学、毒理学、药物研发以及生态环境评价等诸多领域得到了广泛应用。 湖北斑马鱼实验方法
杭州环特生物科技股份有限公司位于江陵路88号5幢1楼A区。公司业务分为斑马鱼实验，动物实验，功效安全评价，生物检测等，目前不断进行创新和服务改进，为客户提供良好的产品和服务。公司将不断增强企业重点竞争力，努力学习行业知识，遵守行业规范，植根于商务服务行业的发展。环特生物凭借创新的产品、专业的服务、众多的成功案例积累起来的声誉和口碑，让企业发展再上新高。
