报告基因选用GFP或RFP，**小启动子来自斑马鱼gata2基因；将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中，受精卵长大后成为founder；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎，从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎，拍照记录后分类培养；F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP（或RFP）表达图式的Tol2插入位点，并通过与已知基因组数据比较，对插入位点进行定位与分析；通过外交纯化得到转基因鱼，直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。和其它动物模型相比较斑马鱼优势。上海国内做的斑马鱼实验室
围绕人体测试的复杂伦理问题已经导致在医学研究领域中使用动物模型。有许多不同的动物模型，从苍蝇到猴子再到老鼠，用来研究人类疾病。
斑马鱼的拉丁名字叫“达尼o雷里奥”。然而，它们的条纹身体就像斑马，因此给它们起了一个常用的名字，斑马鱼。条纹是海军和水平的，沿着身体的长度从尾鳍延伸到鳃。
斑马鱼作为宠物饲养了很长一段时间，但是，它们**早是在20世纪60年代被乔治·斯特雷辛格用于医学研究的。经过多年的努力，斯特雷辛格成功克隆了斑马鱼，创造了***个成功的脊椎动物克隆。
在取得这一里程碑式的成就之后，这一模式的普及程度急剧增加，现在已被用于各种人类疾病的研究。
斑马鱼因其众多的有益特性而被广泛应用于研究。 福建斑马鱼实验中心长沙斑马鱼实验提高实验预测的准确性。
斑马鱼基因突变技术服务：包括插入诱变和ENU化学诱变技术。
斑马鱼转基因资源库和突变体资源库服务：包括研制、收集和分发各种斑马鱼转基因品系和突变体
信息服务：包括建立斑马鱼资源信息网络数据库和提供斑马鱼基因组生物信息学分析服务。
转基因斑马鱼的制备主要采用两种方法：通过Tol2转座子构建组织特异性表达报告基因的方法；利用特定基因的启动子/增强子驱动报告基因在特定细胞组织中表达的方法。
首先构建以Tol2转座子为基础的enhancertrap载体，
在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞
在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞
斑马鱼作为模式生物的特点与优势
2015年10月10日浏览量:8181次评论(0)来源:杭州环特发布者:杭州环特
斑马鱼与人类基因同源性高达85%，其信号传导通路与人类基本近似，生物结构和生理功能与哺乳动物高度相似，具有个体小（目前***适于进行微孔板高通量药物筛选的脊椎类动物）、发育周期短(24小时***便可形成）、实验周期短(筛选结果在一周内即可得出)、费用低（约为鼠类的1/10-1/100）、体外受精、透明（可直接观察药物对内部***的作用）、单次产卵数较高（150-200枚）以及实验用药量小（为小鼠用药量的1/100~1/1000）等优点，作为模式生物的优势很突出。目前，斑马鱼已经广泛应用于发育生物学研究、人类疾病模型研究、新药筛选、药物毒性与安全性评价以及环境毒理学研究等领域。美国国家卫生研究院（NIH）将斑马鱼列为继大鼠和小鼠之后的第三大脊椎类模式生物。 利用模式生物斑马鱼来研究肌肉再生。
在国际上，斑马鱼模式生物的使用正逐渐拓展和深入到生命体的多种系统（例如，神经系统、免疫系统、心血管系统、生殖系统等）的发育、功能和疾病（例如，神经退行性疾病、遗传性心血管疾病、糖尿病等）的研究中，并已应用于小分子化合物的大规模新药筛选。我国开展斑马鱼相关的研究无论在规模还是在重视程度上都远远落后于国际形势发展的需要。推动和发展斑马鱼模式生物在我国生命科学研究中的***使用是本中心的宗旨。在国家科技部重大科学研究计划的支持下，我们汇集优势，整合我国现有的斑马鱼主要研究力量，在未来几年内逐步建立全国共享的斑马鱼模式动物研究技术和资源库，向国内同行提供斑马鱼资源、信息和技术支撑。本着提高服务效率和质量为原则，我们在上海和北京分别建立国家斑马鱼模式动物南方中心和北方中心。南方中心依托于中国科学院上海生命科学研究院，北方中心依托于北京大学和清华大学。两个中心本着优势互补的原则，共同开发研究技术和资源，以辐射状向国内研究人员提供服务，积极推进我国斑马鱼相关科学研究。斑马鱼应用于化学品安全和环境毒理学监测领域。上海国内做的斑马鱼实验室
斑马鱼实验模型在国内的兴起。上海国内做的斑马鱼实验室
保持
首先，斑马鱼非常强壮，易于维护。由于它们是在池塘中自然发现的，它们的理想条件可以很容易地复制。
他们也很便宜；然而，它们确实需要比其他模型生物如苍蝇更多的空间。这种模式也是脊椎动物，这使它优于其他模式。
生殖
斑马鱼的繁殖力非常高，每周产数百个卵。他们也有很短的生成时间，这意味着科学家有一个永无止境的供应这种模式。这缩短了整个实验过程，并且在突变体生产中特别有用。
另一个优点是斑马鱼卵是从外部发育的，科学家可以很容易地研究它们**初的发育过程。这是一个优于其他模型，如小鼠，发展内部，因此阻碍视觉调查。 上海国内做的斑马鱼实验室
