液相色谱类型
液相色谱按其分离机理,可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法
离子交换色谱
离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换,由于各组分离子的交换能力不同,从而达到色谱的分离。
离子交换色谱法是新发展起来的一项现代分析技术,已***用于氨基酸、蛋白质的分析,也适合于某些无机离子(NO3-、SO42-、Cl-等无机阴离子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等无机阳离子)的分离和分析,具有十分重要的作用。
温度范围从 5°C 至 120°C,主动预加热。北京进口液相色谱系统采购
反梯度应用 Vanquish Duo 系统
提高定量分析水平,获取更多未知化合物信息
反梯度的 Vanquish Duo 系统可通过电雾式检测技术(CAD)为所有检测分析物提供一致的响应。等度分离可产生一致的 CAD 响应,但某些分离需要采用梯度洗脱导致相应不一致。Vanquish Duo系统通过使用第二个泵对检测器输送反向梯度,可实现:
• 采用 CAD 检测器在梯度洗脱条件下获得一致的响应
• 在无标准品的情况下,可靠地定量已知和未知化合物
• 通过自动反梯度计算功能考查所有系统体积,简化了方法设置
无论化合物何时在梯度中进行洗脱,进入检测器的洗脱液通过反梯度补偿功能,始终保持相同的溶剂组成。即使缺乏特定化合物的单个标准品,也能够可靠地为您提供一致的定量响应信息。
新疆赛默飞世尔液相色谱系统哪家好低扩散性的10 mm 和 60 mm流通池可以为特定的应用提供极高的灵敏度和极宽的线性。
串联 LC 或 LC-MS应用提**析通量 Vanquish Duo系统
很大程度地 提高了质谱仪的利用率
梯度分离通常用于 LC 或 LC-MS。色谱柱清洗和重新平衡耗费时间长从而降低了总体样品通量。串联 LC或 LC-MS 的 Vanquish Duo 系统通过以下方式消除了这些限制并提高了分析效率:
• 在不更改验证方法的情况下增加了样品通量
• 通过尽可能地提高仪器利用率增加了投资回报
• 通过延伸的色谱柱清洗方法减少了色谱柱残留量,同时不影响通量
• 根据原始梯度方法自动进行串联方法转换,简化了双梯度方法设置
高效液相色谱分离原理
空间排阻
(Steric Exclusion Chromatography)
空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻,因此就直接通过柱子,首先在色谱图上出现,一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中,这些组分在柱上的保留值比较大,在色谱图上***出现。
更高的流速:达 5 mL/min。
高效液相色谱的历史
1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)***提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography 来描述他的彩色试验。
1930年以后,相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。
1952年,英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作,提出了关于气-液分配色谱的比较完整的理论和方法,把色谱技术向前推进了一大步,这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。
1958年,基于Moore和Stein的工作,离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现,这是近代液相色谱的一个重要尝试,但分离效率尚不理想。
1960年中后期,气相色谱理论和实践发展,以及机械、光学、电子等技术上的进步,液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。
1970年中期以后,微处理机技术用于液相色谱,进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。
1990年以后,生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展,为高效液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题,如人类基因组计划,蛋白质组学有HPLC作预分离等。
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高效液相色谱相对分子质量
对于相对分子质量较低(一般在200以下),挥发性比较好,加热又不易分解的样品,可以选择气相色谱法进行分析。相对分子质量在200 ~ 2000的化合物,可用液固吸附、液-液分配和离子交换色谱法。相对分子质量高于2000,则可用空间排阻色谱法。
高效液相色谱溶解度
水溶性样品比较好用离子交换色谱法和液液分配色谱法;微溶于水,但在酸或碱存在下能很好电离的化合物,也可用离子交换色谱法;油溶性样品或相对非极性的混合物,可用液-固色谱法。
高效液相色谱化学结构
若样品中包含离子型或可离子化的化合物,或者能与离子型化合物相互作用的化合物(例如配位体及有机螯合剂),可首先考虑用离子交换色谱,但空间排阻和液液分配色谱也都能顺利地应用于离子化合物;异构体的分离可用液固色谱法;具有不同官能团的化合物、同系物可用液液分配色谱法;对于高分子聚合物,可用空间排阻色谱法。 北京进口液相色谱系统采购
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