目前的主流观点认为,外泌体的产生过程为:细胞膜内陷,形成内体(endosome),再形成多泡体(multivesicularbodies,MVB),较后分泌到胞外成为外泌体。外泌体中携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。外泌体较早见于1981年,EGTrams等在体外培养的绵羊红细胞上清液中发现了有膜结构的小囊泡,并命名为exosome。对于外泌体的作用,当时推测为细胞排泄废物的一种方式。1996年GRaposo等发现类似于B淋巴细胞的免疫细胞也会分泌抗原呈递外泌体(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗一些病症反应。2007年HValadi等进一步发现细胞之间可以通过外泌体中RNA交换遗传物质。随着有关外泌体研究越来越多,研究者发现它普遍参与了机体免疫应答、抗原呈递、细胞分化、一些病症生长于侵袭等各种生物过程中。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点。上海外泌体提取试剂报价

外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。2007年,Valadi等发现鼠的肥大细胞分泌的exosome可以被人的肥大细胞捕获,并且其携带的mRNA成分可以进入细胞浆中可以被翻译成蛋白质,不仅*是mRNA,exosomes所转移的microRNA同样具有生物活性,在进入靶细胞后可以靶向调节细胞中mRNA的水平。这一发现使得研究人员对exosome的研究热情激增,截止目前已经通过286项研究发现了41860种蛋白质、2838种microRNA、3408种mRNA。1983年,外泌体初次于绵羊网织红细胞中被发现,1987年Johnstone将其命名为“exosome”。现今,其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。珠海正规外泌体提取试剂厂家供应在体内参与细胞通讯、细胞迁移、促血管新生和抗一些病症免疫等生理过程,与多种疾病的发生和进程密切相关。

外泌体在肺病治病中的作用:外泌体作为药物递送载体较以往的合成系统具有多方面的优势,比如:人工递送载体具有更低的免疫原性,其含有的磷脂双分子层可与靶细胞细胞膜融合,从而避**核巨噬细胞系统的吞噬作用。Srivastava等开发了一种基于外泌体-金奈米粒子(Exo-GNP)的药物递送系统—“nanosomes”用于肺病的治病,研究表明该系统与单用多柔比星治病相比,前者的多柔比星释放量增加、摄取率提高、化疗毒性降低且化疗效果增强。
大量关于一些病症相关巨噬细胞的研究表明,一些病症相关巨噬细胞通过与一些病症细胞进行细胞间通讯,与一些病症进展和转移相关,然而对TAM与一些病症细胞之间通信的研究限制于可溶性因子,例如促炎细胞因子,其中包括趋化因子、炎症因子和生长因子等。较近的研究证据表明,外泌体是一些病症微环境中不同细胞类型之间的重要通讯媒介。外泌体将信息从一个细胞传递到另一个细胞并重编程受体细胞。目前大部分研究都集中在一些病症细胞分泌的外泌体,关于TAM衍生的外泌体及其对治病细胞的影响知之甚少。TAM具有两种相反的表型:M1亚型巨噬细胞具有抗一些病症作用,M2型巨噬细胞具有致瘤作用活性。TAM的表型由特定的一些病症来源的趋化因子和外泌体调节。较近的一项研究表明,一些病症来源的外泌体miRNA调节一些病症促进M2巨噬细胞的极化。然而,TAM衍生的外泌体对一些病症进展和转移的调节尚未明确定义。目前,TAM的外泌体概况仍然大部分未知,并且TAM衍生的外泌体对于一些病症进展在功能上是否必需还未确定。来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。

外泌体的提取的方式:1、免疫磁珠法,这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备,但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性,不便进行下一步的实验。2、PS亲和法,该方法将PS(磷脂酰丝氨酸)与磁珠结合,利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似,获得的外泌体形态完整,纯度较高。由于不使用变性剂,不影响外泌体的生物活性,外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法较新数据,表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。六是色谱法,这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一,但是需要特殊的设备,应用不普遍。通过过滤膜对上述体液样本进行过滤,进一步去除体液中的细胞残片及其他杂质。珠海正规外泌体提取试剂厂家供应
所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。上海外泌体提取试剂报价
外泌体是细胞间进行物质运输和信息交流的重要工具,可以通过调节免疫功能促进一些病症的增殖,血管新生和一些病症转移。与细菌传染,帮助细菌逃避免疫关系很大,并与心血管疾病,老年痴呆等疾病具有密切关系。外泌体可通过流式、WB(检测指标有CD9,CD63,CD81)、电镜观察、NTA粒径追踪等手段检测,普遍应用于药物载体、疾病诊断marker、精细医疗、一些病症治病等方面研究。由于外泌体直径小,样本含量低,提取十分困难。已有的外泌体分离方式有密度梯度离心、超滤离心法、免疫磁珠抗体捕获、商用试剂盒等。但到目前为止,仍没有一种提取方法能同时保证外泌体的含量、纯度以及生物活性。上海外泌体提取试剂报价
外泌体的提取方法:1、色谱法。色谱法是利用根据凝胶孔隙的孔径大小与样品分子尺寸的相对关系而对溶质进行分离的分析的方法。样品中大分子不能进入凝胶孔,只能沿多孔凝胶粒子之间的空隙通过色谱柱,首先被流动相洗脱出来;小分子可进入凝胶中绝大部分孔洞,在柱中受到更强地滞留,更慢地被洗脱出。分离到的外泌体在电镜下大小均一,但是需要特殊的设备,应用不普遍。2、超滤离心。由于外泌体是一个大小约几十纳米的囊状小体,大于一般蛋白质,利用不同截留相对分子质量(MWCO)的超滤膜对样品进行选择性分离,便可获得外泌体。超滤离心法简单高效,且不影响外泌体的生物活性,是提取细胞外泌体的一种新方法如纯度和回收率低,杂蛋白较多(...