贵阳鼠尾胶原

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23ul 10×PBS或10×培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。鼠尾胶原蛋白的用途很普遍，可用于化妆品，工业和食品生产等领域。贵阳鼠尾胶原

实验应用：鼠尾胶原为底物的人鼻腔纤毛上皮细胞培养模式的建立目的建立以鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式，为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法.方法制备鼠尾胶原并铺片，以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞，培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构，应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率.结果鼠尾胶原要平坦均匀，平均厚度约为1mm；HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开；扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形，纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接；同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的；同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的.结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立，为今后研究鼻内用药对纤毛清理功能的影响提供了良好的方法和途径。石家庄鼠尾胶原产品介绍它是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型。

利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。 方法 通过醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白，并重构成胶原纤维。然后，将重构后的胶原纤维放置在矿化液中模仿骨生物矿化2～6 d，通过透射电子显微镜和电子衍射观察骨生物矿化。 结果 酸解提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白能够重构成胶原纤维，并且具有特征性的D-Band结构。透射电子显微镜和电子衍射显示：矿化2 d后，羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维，胶原纤维部分矿化；矿化6 d后，胶原纤维内部完全矿化，形成Ⅰ型胶原蛋白/羟基磷灰石钙的仿生骨材料。 结论 利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白可以重构成胶原纤维，经矿化可形成与人类自体骨组织化学成分和分子结构一致的仿生骨材料。

提取鼠尾腱胶原工艺的优化：单因素分析,胶原提取率在一定参数范围内随浸提时间、乙酸浓度及料液比的增加而增加。正交试验,鼠尾腱胶原提取的较佳工艺参数为浸提时间72h、乙酸浓度0.5mol·L-1、料液比为1∶40。SDS-PAGE电泳显示,样品为Ⅰ型胶原,单宁酸沉淀实验显示胶原降解程度低,傅里叶红外光谱显示胶原结构完整。样品氨基酸含量测定符合胶原蛋白的成分特征。中性胶原溶液在37℃时能够形成固态胶原凝胶,胶原凝胶经过碳化二亚胺(EDC)交联后,扫描电镜下显示内部相互连接,构成孔径适中的蜂窝状多孔结构。结论:成功建立并优化鼠尾腱胶原蛋白的提取工艺,得出浸提时间、乙酸浓度及料液比等因素的较佳工艺参数,有效提高了鼠尾腱胶原的提取效率。酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料，从而破坏分子间的盐键和希夫碱。

酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原及相对分子质量和浓度检测鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下，其腱性组织被水解成胶冻状溶液，从而分解成鼠尾Ⅰ型胶原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型胶原150 μL滴在薄膜上，可形成液滴状胶原蛋白凝胶( ，其生物力学强度极差，一碰即散。将鼠尾胶原蛋白进行SDS-PAGE，结果显示：Ⅰ型胶原蛋白原液在相对分子质量130 000附近有明显条带，另一条带的相对分子质量大于170 000(图 2) 。胶原蛋白浓度为1.8 mg/mL。吸取矿化液倒入小培养皿中，将鼠尾Ⅰ型胶原纤维浸泡在矿化液中。矿化2、6 d后，分别将矿化后的Ⅰ型胶原纤维进行TEM和电子衍射观察。本品可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养。宁波鼠尾胶原厂家推荐

4°C沉淀10小时，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀。贵阳鼠尾胶原

简介：鼠尾I型胶原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备，纯度达到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准：1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞，贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL，pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶，NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。贵阳鼠尾胶原