高效液相色谱法有“四高一广”的特点:
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到比较好分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
⑥柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物
⑦样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
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高效液相色谱分离原理
空间排阻
(Steric Exclusion Chromatography)
空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻,因此就直接通过柱子,首先在色谱图上出现,一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中,这些组分在柱上的保留值比较大,在色谱图上***出现。
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高效液相色谱梯度洗脱
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提**离效果。梯度洗提可以分为两种:
a.低压梯度(也叫外梯度):在常压下,预先按一定程序将两种或多种不同极性的溶剂混合后,再用一台高压泵输入色谱柱。
b.高压梯度 ( 或称内梯度系统 ) :利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按设定的比例送入梯度混合室,混合后,进入色谱柱。
双LC应用 Vanquish Duo 系统:
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“该仪器在同时运行两种相同化学分离或者同时运行两种不同化学分离时,极大地提高了分析通量,使我们能够快速从同一样品中获取大量表征数据。”--Jonathan Bones 博士 国家生物加工研究和培训研究所(NIBRT)
可以整个***连续记录数据。
双 LC 的 Vanquish Duo 系统更多细节
Vanquish Duo 系统可采用多种分析检测器,包括质谱(MS)、二极管阵列检测(DAD)、电雾式检(CAD)、可变波长检测(VWD)和荧光检测(FLD)。
多功能检测性能
从小分子到复杂生物大分子,根据分析物的分子特征不同,需要采用多种检测器。
双LC的Vanquish Duo系统可同时采用MS、DAD、VWD、FLD 和 CAD 等大量检测器产品中的任意两种检测器。
多功能色谱柱管理
更大的色谱柱容量(每个柱温箱内安装两个 30 cm 色谱柱或多个更短的色谱柱)以及**的温度范围和温度稳
定性。
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温度范围从 5°C 至 120°C,主动预加热。湖南Vanquish液相色谱系统优惠价格
赛默飞世尔Vanquish 超高效液相色谱系统产品简介
Thermo Scientific™ Vanquish™ Duo UHPLC 系统,将两套梯度流路整合在一个超高效液相系统里,并能实现三种不同工作流程(双LC,串联液相或LCMS质谱前端,以及反梯度)这些工作流程可通过节约时间、减少每份样品的成本、在不额外增加工作台面的情况下提高仪器设备容量并更加高效地利用资源,以提升生产率。Vanquish Duo UHPLC 系统可在不影响性能、稳定性或易用性的情况下扩大 Vanquish 平台的优势。 湖南Vanquish液相色谱系统优惠价格
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