南京流式数字PCR如何选型

       数字PCR(d PCR)是近年来引起重视并迅速发展起来的一种突破性的核酸定量分析技术。该技术先将核酸模板进行稀释,分配到大量**的反应单元中,使每个反应单元中只有单个模板分子,然后进行PCR扩增反应,扩增结束后对每个反应室的荧光信号进行统计学分析,来定量DNA拷贝数。数字PCR采用先扩增后定量,因此不依赖扩增曲线的循环阈值(Ct),也无需采用内参基因和标准曲线,准确度高、重现性好,可以实现***定量分析。由于其独特的技术优势,已经在临床诊断、转基因成分定量、单细胞基因表达分析、环境微生物检测和下一代测序等研究领域显示出巨大的优势和应用前景。线性范围达到6个数量级，灵敏度低至万分之一。南京流式数字PCR如何选型

研究方向

       低丰度及稀有序列的精确定量

       目前对于低丰度目标序列的检测，定量PCR、杂交、毛细管测序及NGS等方法都因受到背景DNA的干扰，使得检测灵敏度及精确性都达不到精细定量的要求(如定量PCR检测中Ct值大于33的情况下，其重复性就不是很高)， 而微滴式数字PCR系统通过**的微滴  化处理，使得稀有的核酸序列从大量的背景DNA中分离出来，从而提高了检测的灵敏度及重复性。

       此外，由于样品微滴化处理的同时，也将样品中可能存在的***剂进行了分装，提高了数字PCR扩增对于***剂的耐受程度，因此可具体应用于很多临床样品(血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液等)中对**核酸标记物的检测。一般而言，毛细管电泳和定量PCR的检测灵敏度约在10%;NGS的灵敏度可达到1%;而ddPCR的检测下限为0.001%。 苏州JUE对定量数字PCR销售电话理论上可覆盖qPCR（荧光定量PCR)的所有应用。

产品特点

       无需依赖传统荧光定量PCR的标准曲线即可实现核酸的***定量。

       全封闭防污染设计，一键式自动化操作。

       采用主流可靠的解决方案，系统由微滴生成仪、微滴检测仪、数据分析软件组成，并可选配同品牌封膜仪、PCR仪等

       微滴生成采用油包水乳化微滴技术，在微管道中利用气压驱动，2mins生成高达10万个皮升级的微滴，高效高产，支持多重数字PCR的开发。

       微滴生成芯片为高精度微流控芯片设计，三维微纳防污染结构，一张芯片可同时处理8个样本。

       微滴检测使用双通道荧光，支持EvaGreen染料法及探针法。

       检测线性范围达到6个数量级，基因突变检测灵敏度高达0.01%。

       检测通量高，可一次检测高达96个样本，支持灵活设定。

       全中文分析软件，人性化界面设置，多种分析工具供用户选择。

       本系统为开放式平台，可使用第三方PCR反应液，支持用户自行开发试剂、产品。

       数字PCR检测及分析原理在上世纪90年代就被提出来了，但是无奈受限于当时的技术条件，样本稀释及分配都是靠手工来完成的，受到很多因素的干扰和限制；并且结果分析对于研究者来说也十分枯燥与繁琐，因此在很长一段时间dPCR发展停滞不前。后来由于微流控技术与微纳集成制造工艺的发展解决了dPCR过程中的几个关键技术问题，推动了dPCR的研究与商业化的发展。

       目前根据dPCR样本稀释分配的方式，基本可分为三大类，一种是基于大规模集成微流控芯片；第二种是使用微反应室/孔板；第三种是微滴式。但不论是走芯片式还是微滴式，其基本原理都是将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或者微滴当中，每个反应器的核酸模板数少于1或者等于1。经过PCR扩增之后，有一个核酸分子的模板的反应器就会给出荧光信号，没有模板的反应器没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积，可以推算出原始溶液的核酸浓度。 支持多重数字PCR，可选全中文分析软件。

数字PCR的应用

检验检疫 食品安全

•转基因食品检测（国标）

•病原菌鉴定

•动物源性检测分析

科研

•基因表达差异监测

•CRISPR-Cas9基因编辑结果验证

•甲基化含量鉴定

•单细胞研究：测序、PCR

临床

•**液体活检：早筛、用药、监测、复发

•无创产前筛查：低成本、快速

•***性疾病：HBV、HIV定量

       据悉，MiniDrop™**团队由微流控、光学、机电学、化学、临床医学、分子生物学等多学科交叉领域的**组成，依托精密仪器研发、生物纳米材料与分子生物学等平台，以微滴式数字PCR仪为**，打造了全自动液体处理工作站、核酸提取试剂盒等创新产品，致力于解决**、***领域的精细诊断。

无创产前筛查：低成本、快速。微流控芯片数字PCR价格

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       数字PCR（Digtal PCR）是一种核酸定量精密检测的新兴技术手段，于20世纪由Vogelstein等提出。它是将稀释后的核酸模板分配到大量不同的反应单元中，使每个反应单元中有一个或没有核酸。利用PCR扩增的同时，加入可检测荧光。待扩增结束时，使用统计学方法采集每个反应单元出现的荧光次数，从而定量检测样本中的核酸浓度。

       基于分液方式的不同，数字PCR主要分为3种：微流体数字PCR(Microfluidic digital PCR，mdPCR)、微滴数字PCR(Droplet digital PCR，ddPCR)和芯片数字PCR(Chip digital PCR，cdPCR)。

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