金华广州鼠尾胶原

一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法：随着现代医学的发展，各种医用耗材的更新换代也是日新月异。止血材料是常见的医疗器械产品。但是现今市面上的止血材料不光存在着容易引起伤口传染的缺点；同时还存在着容易与伤口粘附不易去除，导致伤口溃烂，或者因为粘附导致传染；再次就是止血材料多是通过吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血，很少有止血材料是使用能够自身具有止血性质的材料来生产的。现今市面上的可吸收止血材料有氧化纤维素、α -氰基丙烯酸酯类组织胶、医用止血明胶等，但是都有各自的缺点。如氧化纤维素可引起组织周围PH值升高；α -氰基丙烯酸酯类组织胶降解过程中释放出氰和甲醛等有毒物质；医用止血明胶黏附性较差，易脱落，因其吸收血液后膨胀可能压迫伤口周围组织等。鼠尾胶原醋酸溶解：不建议用过滤的方法无菌化。金华广州鼠尾胶原

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23ul 10×PBS或10×培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。无锡鼠尾胶原直销厂家鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿。

一种海狸鼠尾胶原手术缝合线制备方法，其特征在于，步骤如下：(1)胶原纺丝液的配制：将备用的海狸鼠尾筋切成薄片，用无花果蛋白酶进行酶解处理，再用双氧水溶液杀酶；将杀酶后的切片用蒸馏水冲洗，然后用乙酸溶液溶胀，把溶胀后的切片分散搅拌，然后用滤网过滤，除去杂质及不溶胀物，然后把该溶液离心脱泡制得胶原纺丝溶液；(2)手术缝合线纤维的成形：将胶原纺丝液装入立式向上湿法纺丝机的纺丝液贮罐中，用氮气挤压入含有pH＝8-11、质量浓度为50-80％的硫酸钠溶液的立式凝固浴中凝固成型，再经过质量浓度为60-90％的乙醇水溶液的脱水浴脱水，再经过假捻器加捻，合股后再进入含有pH＝9-11、质量浓度为0.8-1.2％戊二醛的交联浴中交联，经过水浴水洗，再经第二次加捻，除去水及交联剂，干燥后，在卷绕辊上卷绕即得手术缝合线。

鼠尾胶原：1实验制备：实验设备及材料：大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容：1、制备鼠尾胶原（两个同学一组操作）。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。实验步骤：制备鼠尾胶原：1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟；2、手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的较高，折断尾骨后拉出尾腱；3、将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡；4、重复步骤2、3，直至尾腱量够用；5、吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）。胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同。

详细步骤如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.将尾巴剪开、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右），抽出银色的尾键；3.把剪碎的尾键置于150ml，0.1％消过毒的醋酸中，4℃放置，并不时振荡；4.48h后取上清，4000转离心30min后，取上清；5.分装上清（鼠尾胶）4度（或-20度）保存。有时可继续向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重复以上步骤，以制备更多的鼠尾胶。在使用时，先将冰存的胶原液在室温下解冻，再按以下步骤包被培养器皿：1）用吸管吸取胶原液，在无菌的培养器皿的生长面内壁上均匀地涂上薄薄的一层胶原溶液。2）若包被的是培养瓶，可向培养瓶通入氨气或用浸有氨水的棉球封口片刻。让氨气充入瓶内后，即可旋紧瓶盖或塞紧瓶塞。若为培养皿或板的话，可将培养皿或板放在已消毒的饭盒内，将浸有氨水的棉球放入饭盒内，盖紧饭盒盖，四周用封口胶封死。鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验长时程的记录。徐州正规鼠尾胶原厂家批发价

制备鼠尾胶原（两个同学一组操作）。金华广州鼠尾胶原

鼠尾胶原的生物矿化和TEM观察：果冻样Ⅰ型胶原蛋白胶体初始浸泡在矿化液中时呈微白色；矿化2 d后，胶体的颜色逐渐加深至乳白色；矿化6 d后，随着羟基磷灰石晶体矿化长入胶原纤维内部，胶体颜色加深至纯白色，并在胶体表面沉积了一层薄薄的羟基磷灰石钙晶体，予镊子夹起，其表层羟基磷灰石钙晶体破碎散落。TEM表征显示：矿化2 d后，Ⅰ型胶原纤维的明暗相隔周期性条纹结构逐渐模糊，羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维内部，胶原纤维部分矿化，沿着胶原纤维生长，忖度变深；矿化6 d后，Ⅰ型胶原纤维的明暗相隔D-Band结构完全消失，胶原纤维内部可以看到黑色羟基磷灰石晶体，嵌入胶原纤维纵向生长。当鼠尾Ⅰ型胶原纤维完全矿化时，由于整条胶原纤维都被羟基磷灰石钙晶体占据，胶原纤维呈现黑色，选区衍射斑图符合羟基磷灰石表征。金华广州鼠尾胶原

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