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鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：胶原蛋白具有抗氧化作用，但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建，对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的：探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法：将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿（实验组）和普通培养皿（对照组）中，并且均用0，10，100μmol/L H2O2诱导。24 h后，以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态，应用MTT 比色法检测心肌细胞存活率，TUNEL 法检测心肌细胞凋亡形态，流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率，黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平，Western-Blot 检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。昆明鼠尾胶原哪家便宜

一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，采用酸法与酶法相结合的工艺，保持恒低温无菌的环境，利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心，简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液，并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中，进行多次真空冷冻干燥，并经进一步处理获得含水率在3％以下的胶原蛋白微粉；较后由灭菌、无菌包装，成品胶原蛋白粉末的纯度在98％以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了产率和生物相容性，降低了成本，适用于生物医用材料。杭州鼠尾胶原厂家现货整个操作请在无菌环境下无菌操作，避免污染以影响细胞生长。

鼠尾胶原是一种天然培养基和一种天然的黏附剂，可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。制备鼠尾胶原方法：1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟；2、手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的较高，折断尾骨后拉出尾腱；3、将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡；4、重复步骤2、3，直至尾腱量够用；5、吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）；6、将尾腱置于平皿内剪碎，转移至三角烧瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、离心，4000转/分，10-15分钟；10、吸取上清，分装成小瓶，4℃保存。

胶原蛋白分离提纯实验方案：提取鼠尾胶原蛋白的实验步骤： 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行 酶解， 持续一段时间待混合物变成无色、 透明、 粘稠液体后即可在 4℃， 5000g 的离心力下离心 20min， 收集上清即为粗制鼠尾胶原蛋白原液。 2、将一定浓度的氯化钠溶液加入其中，持续搅拌直至白色絮状沉淀 从溶液中析出，继续加入氯化铵直至沉淀不在析出为止，4℃，5000g 的离心力下离心 20min 后获得白色沉淀。 沉淀物加入一定浓度的醋酸 溶液中溶解。 3、将溶解后的鼠尾胶原蛋白溶液继续反复进行盐析处理，重复步骤 2 的过程 2~4 次。 _x000c_鼠尾胶原蛋白经 SDS- PAGE 蛋白质电泳。冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至目。

鼠尾Ⅰ型胶原：组装液的配置：1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化钾 100 mL，用1 mol/L 氢氧化钠调节酸碱度至9.2。2.胶原纤维的重构吸取胶原10μL至小培养皿中，倒入0.5 mL自组装液，室温放置20 min。予自组装液自组装24 h。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培养皿中，将自组装24 h的胶原浸泡在戊二醛中。然后将胶原经去离子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后进行TEM观察。3.生物矿化形成仿生骨材料静滴配置钙磷矿化液将25mL钙液(10 mmol/L 二水氯化钙+150 mmol/L氯化钠+50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷+0.02%三氮化钠)倒入烧杯中，滴入聚丙烯(PAA)至浓度350 μg/mL；滴加1 mol/L的氯化氢，调节酸碱度至7.4，然后缓慢滴入25 mL磷液(6 mmol/L磷酸氢二钠)，约16滴/min。鼠尾胶原，是一种细胞支持物，它是细胞外基质的主要成份。武汉正规鼠尾胶原哪家便宜

将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡。昆明鼠尾胶原哪家便宜

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项：将培养器皿在室温(25 度左右)下 放置 20 分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是 10PBS， 使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。 B．含细胞的三维胶原的制备（以配制 200ul鼠尾胶原蛋白(5mg/ml)加到（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH 加到胶原溶液中，会由于 NaOH 不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即 混匀。再加入 23ul 10PBS 10培养液，混匀(混匀后pH 左右，如果 PBS 或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用 pH 试纸测试)。加入 760ul 的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放 20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。 注意事项：在室温下pH 中性时可迅速成胶，在操作过程中要 尽量保持低温。昆明鼠尾胶原哪家便宜