含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。I型胶原蛋白(Collagen, Type I)结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体。昆明正规鼠尾胶原厂家现货

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。B.含细胞的三维胶原的制备(以配制200ul鼠尾胶原蛋白(5mg/ml)加到(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul10PBS10培养液,混匀(混匀后pH左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。注意事项型在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。鼠尾肌腱胶原蛋白I(rattailtendoncollagentypeI)根据Birkedal-Hansen方法,经过醋酸(HAc)抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备所得。金华正规鼠尾胶原厂家供应制备鼠尾胶原:手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的,折断尾骨后拉出尾腱。

鼠尾胶原备用胶凝程序:1)在冰上放置以下物品:胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2)确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3)在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4)在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS(终体积/10)mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积(不要添加到管中直到步骤4.6为止)终体积x终胶原蛋白I浓度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的胶原体积×0.023)mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水:添加蒸馏水体积=V(终)—V(胶原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积,混匀,冰上备用。5)胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6)使用时,无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。
实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。方法制作鼠尾胶原,观察全细胞膜片钳实验中,自制的鼠尾胶原对前庭毛细胞的贴壁黏附作用。结果无鼠尾胶原时,前庭毛细胞悬浮于外液,不宜封接;有鼠尾胶原时,前庭毛细胞贴附于培养皿底壁,易于封接和长时间(约8h)的观察和记录。鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。结论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。在接种细胞前用无菌的水漂洗。

一种海狸鼠尾胶原手术缝合线制备方法,其特征在于,步骤如下:(1)胶原纺丝液的配制:将备用的海狸鼠尾筋切成薄片,用无花果蛋白酶进行酶解处理,再用双氧水溶液杀酶;将杀酶后的切片用蒸馏水冲洗,然后用乙酸溶液溶胀,把溶胀后的切片分散搅拌,然后用滤网过滤,除去杂质及不溶胀物,然后把该溶液离心脱泡制得胶原纺丝溶液;(2)手术缝合线纤维的成形:将胶原纺丝液装入立式向上湿法纺丝机的纺丝液贮罐中,用氮气挤压入含有pH=8-11、质量浓度为50-80%的硫酸钠溶液的立式凝固浴中凝固成型,再经过质量浓度为60-90%的乙醇水溶液的脱水浴脱水,再经过假捻器加捻,合股后再进入含有pH=9-11、质量浓度为0.8-1.2%戊二醛的交联浴中交联,经过水浴水洗,再经第二次加捻,除去水及交联剂,干燥后,在卷绕辊上卷绕即得手术缝合线。通常情况下骨质总量中的钙、镁、磷等无机物质光占总量的百分之几而胶原蛋白等有机物质却要占超过80%。徐州正规鼠尾胶原厂家推荐
细胞培养器皿的表面包被以包被浓度为2μg/cm2为例。昆明正规鼠尾胶原厂家现货
胶原蛋白的功效:1.胶原蛋白可以作为一种补钙食品,胶原蛋白的特征氨基酸羟基脯氨酸是血浆中运输钙到骨细胞的运载工具,骨细胞中的骨胶原是羟基磷灰石的粘合剂,它与羟基磷灰石共同构成了骨骼的主体。因此,只要摄入足够的胶原蛋白,就能保证正常机体钙质的摄入量,胶原蛋白可制成补钙的保健食品。2.胶原蛋白在人体运动锻炼的过程中,可以促使身体消耗大量脂肪达到的效果。但需要注意的是胶原蛋白本身是没有作用的,它只能在运动呢锻炼是增加脂肪的消耗量。3.胶原蛋白是身体免疫作用中负责重要功能的阿米巴细胞清扫异物的感知器,因此对预防疾病很有帮助。可提高免疫机能、克制细胞、活化细胞机能、活化筋骨、治好关节炎及酸痛。昆明正规鼠尾胶原厂家现货
鼠尾胶原简介:鼠尾I型胶原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备,纯度达到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准:1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞,贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL,pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶,NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶...