编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律，测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面，利用荧光分光光度计时，使用荧光强度。在低浓度时，荧光强度与浓度成正比，所以，可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果，对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较，下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中，调配～5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示，根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中，用～5ug/ml的6点和空白样品（蒸馏水）创建，得到了线性度良好的标准曲线（相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中，噪声的影响相对较大，导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。超微量分光光度计一般具有多个光程;河北元析分光光度计原理
在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量不同其中铁含量为，其余溶液构成标准系列溶液。并用移液管吸取，并编号为7。将溶液放置15min左右；3、接通722N分光光度计电源，调节分光光度计的透光度T示数为（即T%=100%）发现此时吸光度A的示数位，波长调节至510nm条件下；4、拿出比色皿，一次只能测四种溶液，先用1、2、3、4号容量瓶中的溶液分别润洗(不能搞混了)，并依次倒入编号溶液（不能倒太满，否则容易溢出），用面巾纸擦干比色皿表面尤其是光滑的一面。将擦干装有对应溶液的比色皿依次放入分光光度计的光路中使测定的顺序为1、2、3、4（要盖上仪器的盖子）。记录对应的吸光度；5、将4上述测完的比色皿拿出，将溶液倒入废液缸中，先用蒸馏水洗净4只比色皿。在按4步骤中的方法进行操作，此时的溶液编号为5、6、7。记录对应的吸光度；6、将记录的数据在电脑上用ORANGE软件进行处理。并绘出相应的图,并根据原理求出原始待测溶液中铁的含量；7、实验完毕断开分光光度计电源，清洗玻璃仪器和比色皿，整理实验台离开实验室。实验数据处理结果记录及讨论标准系列的实验数据及测定结果铁标准溶液/mL铁含量。湖北火焰分光分光光度计教程超微量分光光度计不需要比色皿.
在仪器改变测试波长和测试一段时间后可通过按0%键和100%/0A键对仪器进行调零和调满度、吸光度。（5）显示方式的选择【相关实验】邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告实验目的邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量；熟悉722N型分光光度计的原理和操作。实验原理邻二氮菲吸光光度法是测定铁含量的常用方法。在PH为2~9的溶液中，Fe2+的显色剂邻二氮菲形成稳定的橘红色络合物，该络合物在508nm波长处有**大吸收。为了消除Fe2+的副反应及其他因素的影响，在微酸溶液进行，且用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+。吸光光度法定量分析的依据是朗伯比尔定律A=Ɛbc，当液层厚度b一定时A=Kc，吸光光度法定量分析的方法有直接比较法和标准曲线法，这个实验用标准曲线法。在标准曲线上查出试液中铁的含量，按下式求出原始待测溶液中铁的含量（ρ表示溶液中铁的含量，mg/L）ρFe,原始待测溶液=ρFe,标准曲线查得50/10实验步骤1、取出容量瓶和移液管，用蒸馏水清洗容量瓶并用相应的溶液润洗移液管；2、在6个容量瓶中用刻度移液管分别加入,、、、、、，5mLHAc-NaAc缓冲溶液，1mL10%盐酸羟胺溶液及，用水定容。将其分别对应编号为1、2、3、4、5、6号。
X6智能扫描型紫外可见分光光度计产品名称：X6智能扫描型紫外可见分光光度计产品型号：仪器特点和功能；采用双光路，双光束及获得的自研光学系统（实用新型zhuan利号ZL20132）；使用精选光栅及灯源；系统获得的自研光学结构，整体光路固定在同一全铝制光学底板上，确保运输安全；机械和电子部件密切配合，仪器的运行速度和扫描速度快；仪器具有吸光度、透过率、能量、浓度等测量功能；仪器主机具有建立标准曲线、光谱扫描、动力学扫描、多波长测试、DNA/蛋白质测量、光谱平滑和峰值检测及数据打印等多种功能；采用获得的钨灯稳压电源电路设计（实用新型zhuan利号ZL20132），使噪声减小，能量输出稳定；扫描精度和扫描速度根据用户的不同需求可供选择，波长采样刻度显示；标配样品池：长样品池可放10mm-100mm比色皿；仪器采用基于Windows设计的中英文操作软件MetaspecPro，轻松联机操作可实现谱扫描、动力学扫描、多波长测试、ADN/蛋白质测量、光谱平滑和峰值检测等功能三维显示，软件遵循GMP和GLP规范，具备多用户管理、日志记录功能、质量控制功能、报告输出等功能。仪器指标波长范围185-900nm光谱带宽≤(220nm，Nal；340nm。为了测量吸光值，分光光度计制造商通常使用光电倍增管和光敏二极管。
一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3,000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽（bandwidth）很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值，分光光度计制造商通常使用光电倍增管（photo-multipliertubes，PMTs）和光敏二极管。紫外可见分光光度计的钨灯光源发出400～760nm波长的光谱。中国香港紫外可见分光分光光度计使用
超微量分光光度计显示吸光度值的同时，程序直接给出浓度值!河北元析分光光度计原理
分光光度计可分为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。项目对分析结果的影响1、波长准确度分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。试剂盒包含一个空白滤光片、三个检查光度的滤光片和三个校正波长的滤光片。每个滤光片的吸光值是相对空白滤光片测定的。这个试剂盒不仅能让用户获得测量准确性的信息，也能提供精确度的信息，包括平均值和变异系数。河北元析分光光度计原理
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